Способ получения клеток костного мозга
<»>454882
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 25.04.72 (21) 1778644/31-16 с присоединением заявки ¹â€” (32) Приоритет—
Опубликовано 30.12.74. Бюллетень М 48
Дата опубликования описания 28.03.75
Союз Советских
Социалистических
Республик (51) М. К.т. А 01п 1/02
Гасударственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 611-018.46 (088.8) (72) Авторы изобретения (71) Заявитель
ll. M. Медведев и T. И. Фисанович
Ленинградский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА
Изобретение относится к области медицины, а именно к гематолопш.
Известен способ получения клеток костного мозга путем грубого измельчения щипцами
Люэра губчатых костей трупа, вымывания из о остиых фрагментов миелоидных клеток с помощью раствора, содержащего сахар и антикоагулянт, и последующего переноса костиомозговой взвеси в раствор кр|юпротектора.
Однако известный спосоо является трудоемким и не обеспечивает высокого выхода жизнеспособных клеток.
С целью увеличения выхода жизнеспособных клеток по предлагаемому способу кости разрезают поперечно направлеиию их продольной оси иа пластинки толщиной 1 — 5 лья и обрабатывают раствором, содержащим также поливииилпирролидон, левомииетин, оидистиллированную воду, причем компоненты взяты в следующих соотношениях, оо. О/,:
ПоливинилпирролI!äol! 8 — 12
Сахароза 3,5 — 4,5
Гл|окоза 0,3 — 0,4
Трилоп Б 0,15 — 0,20
Левомицетин 0,005 — 0,010
Бидистиллированиая вода до 100
Способ получения клеток костного мозга осуществляют следующим образом.
Нативную очищенную от мягких тканей губчатую кость трупа (ребро, грудина) парезают на плоские пластинки толщтшой
1 — 5 лт.я при комнатной температуре с соблюдением строжайшей асептики и антисептикп.
Нарезанные пластинки губчатой кости помещают при комнатной температуре в стерильный стеклятшьш сосуд с притертой пробкoi содержащий универсальный раствор, обладающий свойствами антикоагулянта и криоконсерванта, предварительно прошедший стерилизацшо автоклавироваиием (1.2 ат.я.
40 лин) .
Состав универсального раствора следуюий о/.
Сополимер винилпирролидона с кротоновой кислотой 0,6 — 0.9
Глицерин 2 — 5
Сахароза 4 — 5
Глюкоза 0,3 — 0,6
Левом ицетин 0,005 — 0,010
Бидистиллированная вода до 100 об. оо
Этот раствор может быть заменен раствором, содержащим широко используемые в криоконсервации ингредиенты, о/о..
Поливинилпирролидои 8 — 12
Сахароза 3,o — 4„3 1 Г
Глюкоза 0,3 — 0,4
Трилон Б 0,15 — 0,20
Левомицетин 0,05 — 0,01
Бидистиллированная вода до!00об., Вымывание клеток костного мозга из наре454882
Составитель С. Малютина
Редактор Н. Суханова Техред Г. Дворина Корректор И. Позняиовенаи
Заказ 133 Изд. № !959 Тираж 565 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, Я-35, Раушская наб., д. 4/5
Обл. тип. Костромского управления издательств, полиграфии и книжной торговли заиных пластинок кости осуществляют путем покачивания сосуда с притертой пробкой. Полученную суспензию клеток костного мозга фильтруют через, капроновые фильтры. Отфильтрованную суспензию центрифугируют при 4 С, 1200 об/хан в течение 15 иин.
Вакуум-отсосом со стерильной насадкой удаляют верхний слой надосадочной жидкости, содержащий,плеи ку жира. Оставшуюся обезжиренную часть суспензии клеток костного мозга разливают в простерилизоваиные металлические контейнеры и подвергают замораживашио.
Предмет изобретения
Способ получе1шя клеток костного мозга путем измельче1шя губчатых, костей, обработки их раствором, содержащим сахара и анти,коагулянт, с последующей фильтрацией и центрифугированием, отлича ои1ийся тем, что, с целью увеличения выхода жизнеспособных
5 клеток, 1кости разрезают поперечно направлению их продольной оси на пластинки толщиной 1 — 5 н н и обрабатывают раствором, содержащим также поливинилпирролидои, левомицетин, бидистиллированную воду, при10 чем компоненты взяты в следующих соотношениях, об. о о:
Поливинилпирролидон 8 — 12
Сахароза 3,5 — 4,5
Глю,коза 0,3 — 0,4
15 Трилои Б 0,15 — 0,20
Левомицетин 0,005 — 0,010
Бидистиллироваиная вода до 100.
