Способ определения противотканевых антител в сыворотке крови

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Советских

Социалистических

Реслублик

395086

К АВТОРСКОМУ СВИЯЕТЕЛЬСТВУ

Зависимое от авт, свидетельства №вЂ”

М. Кл. А 61k 23/00

Заявлено 04.Х1.1971 (№ 1712126/31-16) с присоединением заявки №вЂ”

Приоритет—

Опубликовано 28 VII!.1973. Бюллетень ¹ 35

Дата опубликования описания 20.XII.1973

Государственный комитет

Совета Министров СССРпо делам изобретений н открытий

УДК 576.8(088.8) Автор изобретения

H. И. Кондрашова

Киевский научно-исследовательский институт туберкулеза и грудной хирургии им. Ф. Г. Яновского

Заявитель

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОТИВОТКАНЕВЫХ АНТИТЕЛ

В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

Изобретение относится к области медицины, в частности к способам определения аутоиммунных свойств сыворотки крови.

Из вестен Опособ Определения противотканевых антител в сыворопке крови путем постановки реакции потребления комплемента, в которой результаты реакции оценивались путем сравнения степени гемолиза в 38 пробирках (19 опытных и 19 контрольных).

Цель изобретения — повышение точности и чу1всввительнoc TIH способа.

Это достигаепся тем, что конгрольную и опытную сыворотки центрифугируют и по разнице высоты сгол бцом негемолизированных эритроцитов определяют результат реакции.

Пример, Для,проведения реа кции берут

0,2 мл исследуемой сыворовки, разделяют ее на 2 порции (апыгную и контро lblnvIQ) по

0,1 мл. Затем в опытную пробирку вносят

0,1 мл водно-солевого антигена и 0,3 .ил физиолотичес кого расгвора, а 1в контрольную проби рку только 0,4 мл флзиолотического раствора. Обе проблрки встряхивают и помещают .в термостат при 37 С и выдерживают

30 чин.

Затем проводят определение количества комплемента в опыгной и контрольной порциях,исследуемой сыворотки с помощью гематокригных пробирок.

В 2 гематокрипные прооиркп (опыгную и контрольную) вливают по 0,7 мл гемолитической системы, .приготовленной из строго стаидартизировазтной,фотометрическим опособом

2,5%-ной взвеси бараньих эригроцитов. В эти же прооирки доба вляют по 0,1 мл разведенной сыворотки соответственно из опытной и контрольной пробирок. Содвржи мое гематакригных пробирок перемешивают, после чс10 го их помещают в термостат на 15 11ин (температура 37 С), а затем 15 .11пн центрифугируют при 3000 об, з1ин.

Негемолизированные эритроциты при центрифугиро ва нз1и оседают на дно градуирова11НОГО каппллЯРа. BblooTB этОГО QT016III!ig onPP.деляет степень насту пившего гемолиза. Измеряется в делениях, нанесенных на капилляры.

Разница между высотой столби1ка осевших эритроцитов в опыгном и ко нтрольном капил20 лярах определяет цифровой результат реа! ции.

При различии в 0 — 5 делений реакцию считают отрицательной, при разнице в 5 — 10 делений реакцию считают слабоположительной.

25 при разнице свыше 10 делений — считают положительной. Результат реакции выражают в цифрах.

Таким образом, предлагаемый способ определе1тия антител в сыворотке крови в такой модификации позволяет провести иссле395086

Предмет изооретения

ГО

Составитель Т. Головина

Техред Е. Борисова

Редактор Д. Пинчук корректоры Е. Михеева

Е. Миронова

Заказ 693/2275 Изд. Че 944 Тираж 467 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж,-35, Раушскан наб., д. 4!5

Тпп. Харьк. фил. пред. «Патент» дова ние, используя значительно меньшее количество сыворопки. Вследствие этого забор крови для исследова ния можно производить из пальца, а не из вены. Потребность в меньшем объеме сыворотки для реакци|и делает возьможным применение ее при эксперимента IblFIbIx исследова ниях, проводимых на мелких лабораторных животных.

Учет результатов реакции при предлагаемом способе лишен момента субъекпи вното определе ния 1-ой пробирки с 100 /о-illbl I гемолизом, а производится в цифровых единицах, что позволяет легко сравнивать результаты,различных опытов в количественном отношении.

Спосоо определения,противотканевых антител в сыворотке крови путем постановки реакции потребления комплемента, отличаюи1ийся тем, что, с целью повышения точ ности и чу вствительности способа, контрольную и опытную сыворотки центр и фуги руют и по разнице высоты столбцов негемолизиро ванных эритроцитов определяют результат реакции.