Патент ссср 335253

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

C12N9 - Ферменты, например лигазы (6.); проферменты; композиции их (препараты для чистки зубов, содержащие ферменты A61K 7/28; лекарственные препараты, содержащие ферменты или проферменты A61K 38/43; составы моющих средств, содержащих ферменты C11D); способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов (приготовление солода C12C 1/00)

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

335253

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 17.Х!.1970 (№ 1498246/30-15) М. Кл. С 07g 7/02

А 61k 19/00 с присоединетгием зая вии №

Приоритет

Комитет по делан изобретений и открытиЯ при Совете Мииистрое

СССР

Опубликовано 11.IV 1972. Бюллетень № 13

Дата опубликования описания 25Х.1972

УДК 619.612.128(088.8) Авторы изобретения

P. К. Бурганов и А. П. Кадочников

Заявитель

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ

Предмет изобретения

Изобретение относится к способам определения активности ферментов.

Известны способы определения активности холинэстеразы, основанные па регистрации изменения рН в результате разложения субстрата ацетилхолина, непрерывного титрометрического определения при постоянном значении рН .с применением в качестве субстратов различных эфиров холина, фотокалорпметрический способ с применением в качестве субстрата хромогенного субстрата индифенилацетата и ряд других способов.

Недостатками известных способов являются: высокая концентрация используемых субстратов, низкая чувствительность и точность определения активности холинэстеразы, а также продолжительность определения.

Цель изобретения вЂ” устранение указанных недостатков.

Достигается это тем, что в качестве субстрата используется Р-метилумбеллиферонацетат концентрации 3,6 10 г/мл (1,6 10 вЂ М) в фосфатном буфере с рН 7,8 вЂ” 8.

Оценку активности холинэстсрезы проводят по нарастанию интенсивности люминесценции а фотоэлектрическом приборе в результате образования сильно люминесцирующего голубым светом р-метилумбеллиферона.

Пример. В термостатируемую кювету объемом 10 мл наливают 9 мл фосфатного

5 буфера рН 7,8 вЂ” 8; 0,5 мл раствора р-метилумбеллиферонацетата концентрации 7,2Х

Х10 6 г/мл в этилцеллозольве и 0,5 мл раствора холинэстер азы сыворотки крови в

Воде.

10 По увеличению интенсивности свечения, регистрируемого микроамперметром, через 3вЂ”

5 лтин на основании ранее построенного калибровочного графика определяют активность холинэстеразы.

Способ определения активности холинэстеразы с использованием субстратов для опре20 деления нарастания интенсивности люминесценции, отличающийся тем, что, с целью увеличения чувствительности, точности и уменьщения времени определения, в качестве субстрата используют люминесцентный .субстрат

25 (- метилумбеллиферона цетат концентрации

3,6.10 г/мл в фосфатном буфере с рН7,8 вЂ” 8.