Библиотека |
О П И С А Н И Е 299542
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союэ Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 09.11,1970 (№ 1402704 28-13) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 26.111.1971. Бюллетень № 12
Дата опубликования описания 7Х1.1971
МПК С 12d 13/06
Комитет по делам иэобрвтвний н открытий прн Совете Министров
СССР
УДК 668,394(088.8) Авторы изобретения
E Л. Рубан, Т. К, Аболинь, Б. А. Клинтс и У. 3. Внестур
Институт микробиологии им. А. Кирхенштейна
Заявитель ч
БИБЛ1" ) . - ;-4 fs
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-ТРИПТОФАНА
Изобретение относится к области микробиологии, а именно к способам получения
L-триптофана.
Известен способ получения L-триптофана путем глубинного культивирования его продуцентов в две стадии на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и биологически активные вещества с последующим отделением биомассы от культуральной жидкости и выделением в конце второй стадии из нее триптофана одним из известных способов.
Однако при этом невозможно достигнуть полного извлечения L-триптофана из биомассы.
Предлагаемый способ позволяет дополнительно извлекать триптофан из биомассы и увеличивать таким путем его выход. Для этого в биомассу вводят химический реагент из расчета концентрации дрожжевых клеток не менее 100 г/л, полученную суспензию перемешивают и выдерживают в течение 1 час, затем отделяют жидкость от биомассы, а последнюю перемешивают с водой с последующим обезвоживанием биомассы и передачи водного раствора и раствора химического реагента для выделения из них L-триптофана одним из известных способов.
В качестве химического реагента предпочтительно можно использовать 20%-ный раствор
NaCI или сахара.
Биомассу можно перемешивать с водой при
0 — 5 С в течение 15 мин.
Сущность способа заключается в следующем.
5 Культивируют продуцент L-триптофана
Candida utilis 295-t глубинным способом на питательной среде следующего состава, г/л:
Солодовый экстракт (60% по мальтозе) — 100
10 Сахар-песок 140
Дрожжевой экстракт 20
К НРО, 1
NaCl 0,1
Са С1э 0,1
15 MgSO4 0,5
Мочевина 40.
Во время трансформации состав питательной среды такой же, за исключением, г/л
Сахар-песок 30
20 Мочевина 40
Объем среды в каждом ферментаторе 1,5 л, температура культивирования 28 — 30 С, аэрация по сульфитному числу в первый период
25 ферментации 140 — 160 мг О /л мин, во второй стадии — 80 — 100 мг Оэ/л мин.
Размножение культуры длится 48 час, после чего прибавляют антраниловую кислоту для продуцирования аминокислоты L-трипто30 фана культурой Candida utilis 295-/, 299642
Предмет изобретения
Соста<«зт лв II. Дуни
Техред Л. 8 Куклина Корректор Е. Н. Миронова
Рсд <ктор Н. Старостина
3аказ 1352/12 Изд. Ха 603 Тираж 473 Подписное
ЦНИИП1Л К«гии<ета по делам изобретений и открытий при Сове<е Министров СССР
Москва, )I<,-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2
Антраниловую кислоту добавляют из расчета 3 г/л антраниловой кислоты на 140 г/л биомассы по сухому весу.
Антраниловую кислоту прибавляют через каждые 3 После окончания получения L-триптофана отделяют культуральную жидкость от биомассы центрифугированпсм. Жидкость передают на химобработ ку. 1 биомассе добавля<от, например, 20в/,-ный водный раствор сахара (сахар пищевой или сахар-сырец) из расчета концентрации клеток не менее 100 г/л, т. е. на 1 кг биомассы берут не более 10 л 20%-ного раствора сахара. Смесь периодически перемешивают и выдерживаьот в течение 1 час при температуре ферментации. Затем снова отделяют жидкосгь от биомассы. Жидкость передают на химическу о обработку. К биомассе добавляют охлажденнуlo воду, периодически г<еремешивают и выдерживают смесь при 0 — 5 С в течсние 15 мин. Воду задают из расчета конценграции биомассы не менее 100 г/л, т, е. на 1 кг биомассы берут не более 10 л воды. После выдержки 15 лик содержащую L-триптофан воду отделяют от биомассы и передают на химическую обработку. BHoMdcc) используют jIJ15I 1(opMoBhIx или для приготовления компонентов питательных сред. 1. Способ получения L-триптофана путем глубинного культивирования его продуцентоз в две стадии на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и биологически активные вещества с последующим отделением биомассы от культуральной жидкосги и выделением в конце второй стадии из нее 10 триптофана одним из известных способов, огличающийся тем, что, с целью возможности дополнительного извле ения триптофана из биомассы и увеличения таким путем его выхода, в биомассу вводят химический реагент 15 из расчета концентрации дрожжевых клеток не менее 100 г/л, полученную суспензию перемешивают и выдерживают предпочтительно в течение 1 час, затем отделяют жидкость от биомассы, а последнюю перемешивают с во20 дой с последующим обезвоживанием биомассы и передачи водного раствора и раствора химичес",ого рсагенга для выделения из нпх триптофана одним из известных способов. 2. Способ IIQ п. 1, отличающийся тем, что I3 25 качестве химического реагепта используют 20а/„-ный раствор NaC1. 3. Способ по п, 1, отличающийся тем, ITQ в качестве химического реа гент а используют 20 /о -ный раствор сахара. 30 4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что биомассу перемешивают с водой при 0 — 5 C в течение 15 мин.