Патент ссср 136857

СОЮЗ С011 ТС1хИХ

СОЦИАЛ11СТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК олисА- -.NE р л g, Д р К "Я Я Я,Я

K АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

К liICC 61I!I, 6

s- + = :, - А

° 1я1 ,g:.» у, МПК А 61k № 136857

Заявлено 14.Ч1!.1960 (№ 673397 31)

Олуоликовано 1963. Бюллетень ¹ 3

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ

КОМИТЕТ ПО ДЕААМ иЗОБ Гете ни Й и ОткРыТи Й

СССР

УДК

17 адписиая PI/«I« -" /

06 :110711.А

Д. М. Трахтенберг и А. М. Кан

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФИТОБАКТЕРИОМИЦИНА

Известен способ получения фитобактериомицина путем ферментации штамма актиномицета № 696 с помощью активированного угля.

Предлагаемый способ получения .фитоояктериомицина повышает выход продукта и степень его чистоты. Отличительной особенностью способа является адсорб1.*ия антибиотика из нативного раствора, полученного от якгиномицета № 696, и последовательное применение катионита КБ4-11-2 и аонита 333-10 с сушкой раствора, содержащего антибиотик, В вакууме. Спосоо состоит в адсорбции фитобактериомицина на катионите КБ4-11-2 с последующим вытеснением раствором серной кислоты, нейтрализацией элюата анио нитом

ЭДЭ-10 и выпариванием в вакууме.

Для осуществления способа культуральная жидкость после отделения мицелия актиномицета обрабатывается насыщенным расгвором щавелевой кислоты (из расчета 10 г на

1 л иативного раствора) при рН=4,0. При этом осаждается кальций в виде окса 7ятя, который легко удаляется фильтрованием на обычных воронках. Через колонку диаметром

2 сл, загруженную карбоксильной катионообмениой смолой КБ4-11-2 в количестве 4 г (абсолютно сухой), пропускают нативный растВор фитобяктсриомшп1иа с яктивнюсть1025003500 ед/лл и рН =7,0 со скорость10 400 лл, ыс (125»n/ñë"-/час) до тех пор, пока активность выходящих фракций не будет достигать 90—

100% исходной активности, Процесс насыщения колонны антшн1отиком длится 24 — 28 час. После окончания процесса адсорбции колонну промывают дист;1ллированной водой (1 л), так, чтобы выходяш".H промывная вода была прозрачной. Затем через колонну, в которой находится смоля, ясы1ценная фитобактериомицином, пропускает

1,оо/о-ный pQcI BOp H 0

20 .;f i/c. f"/ fife, фракшш не будет равна 2000 — 1500 сд/л.1. (7Максимальная концентрация в отдельных фракциях достигает 100000 — 50000 eo,:.и.1) .

Десорбция протекает 5 — 6 «ас. Обычно с колонны получают 300 — 350 лл элюятя pH=-1,0.

Выход на этой стадии 100%.

Полученный кислый элюят фитобактериомицииа рН=1,0 со средней яктивис ст;;л

50000 — 60000 сд/лл обрабатывается ан1гонитом 3Д3-10 при механическом перемсшивяиии в течение 30 — 40 л,ин. Нейтрализаци1я Ведется до рН=5,0.

Расход аш1оиита на 300 — 350 лл э 710a То

27 — 30 г аосолютно сухОЙ смо 7bi. После Ilci!трялизации рястВОр, Отф117bTpoBOII .Ibiil От

ЯНИОИИТа, СТЯВЯТ СХ ШИТЬ В ВВКИУ VAI-CVIII! l, fiick при температуре обогревающей волы 70 — &1 C

If остаточном дав.lcHIIII 10 — 20 лл рт. ст. Полученный препарат имеет активность 2000—

3000 сд/л,;301bll0cTb 3,0 — 6,0, в. В вяжи<)сть

4 о . Выход 70 — 80 "„OT IxO 7II !CCTI3я;i l!Tlf()i!OTif»a, адсорбироваиного иа смоле КБ4-11-2.

Регенерация смолы КБ4-11-2 проводится

24 час однонормальным АМВОН (на 1 г смолы

;0 п.л) при периодическом перемени!ванин.

3;Iïм cìîëó отделяют от растгора дскантаi;iicii, промывают дистиллированной водой до

;;сйтральной реакции. Отмытую смолу сушат при 60 — 70 С до влажности 400/;,. Лнионообмсиная смола ЭДЭ-10 регенерируется в ОНформу двунормальным раствором ХаОН (из расчета на 1 г смолы 20 ял) при периодическом псремешивании в течение 24 час. Затем смолу отделяют от раствора декантацией и промывают водой до нейтральной реакции.

Отмытый анионит сушат при 60 — 70 С. Высуц,енная cìîëà до,1кна иметь вла кность !е более 25 — 30О/е.

Предмет изобретения

CH0co() IIQ..x !ения фитобактсриомици1! тем фсрмситации штамма актииомииста

М 696, отл и ч а ю и! и и с я тем, что, 0 целью повышен!!я вы. ода продукта if степени его чистоты, антибиотик адсорбируют i!л нативного раствора на катионитс 1;Б-1-11-2, вытесняют раствором серной кислоты, нейтрализуют элюат с помощью анионита "-1.1Э-10 и выпаривают в вакууме до сухого состояния.

Редактор М. И. Бородина Техред Т. П. Куриако Корректор Н. В. Гераськнка

Подп. к печ. 29/IX — 63 г. Формат бум. БОХ90«а Объем 0,23 нзд. л.

Заказ 2254/6 Тирах 400 Цена 4 коп.

ЦН!!НПИ Государственного комитета ho делам нзооретеннй н открытий СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4.

Типография, пр. Сапунова, 2.