Высокомеченный тритием [3h]-рапамицин

 

Изобретения относится к новому меченному тритием аналогу физиологически активного соединения -[³H]-рапамицин формулы I

который находит применение в органической и биорганической химии и в медицине в качестве иммуносупрессора. Технический результат - получение аналога физиологически активного соединения.

Изобретение относится к органической химии и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине.

При изучении физиологически активных соединений необходимы их меченые аналоги.

Известен рапамицин формулы I

Данное соединение, получившее наименование “рапамицин”, является сильным иммуносупрессором и реагентом, используемым в иммунохимии (N.H.Sigal, F.J.Dumont // Ann.Rev.Immunol., 1992. Vol.10. 519-560. J.Y.Chang, S.N.Sehgai // Brit.J.Rheumatol. 1991. Vol. 30. № 2. 62-65) [1].

Однако его меченный тритием аналог не описан.

Известно, что замена атомов соединений на их меченые аналоги не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения (Evans Е.А. - Tritium and its compounds London Butterworths, 1974, p.48) [2].

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является расширение ассортимента меченых аналогов физиологически активных соединений.

Достигается указанный технический результат получением высокомеченного тритием ³H-рапамицина формулы I.

Ниже приведен пример реализации изобретения.

Пример

В первую камеру реакционной двукамерной ампулы с сообщающимися между собой первой нижней и второй верхней камерами помещали 40 мг окиси палладия и 40 мг 5% PdO/BaSO₄, в другую - 50 мкл абс. диоксана, 5 мкл триэтиламина и 12 мг рапамицина. Вторую камеру замораживали жидким азотом и ампулу вакуумировали до давления 0,1 Па и заполняли газообразным тритием до давления 333 ГПа. Затем первую камеру нагревали до 70С. Окись палладия восстанавливалась, тритиевая вода перемораживалась во вторую камеру. Реакционную ампулу вакуумировали до давления 0,1 Па, продолжая нагревать первую ампулу до 70С, и заполняли аргоном. Затем содержимое второй камеры переносили в первую камеру, которую запаивали. Таким образом реакционная смесь состояла из восстановленного катализатора, 100% тритиевой воды, триэтиламина и раствора рапамицина в диоксане. Содержимое ампулы нагревали в течение 30 мин при 100°С, после чего ампулу вскрывали, реакционную смесь разбавляли 0,5 мл хлороформа. Катализатор отделяли фильтрованием и промывали его последовательно хлороформом (31 мл) и метанолом (31 мл). Тритиевую воду, диоксан и триэтиламин отгоняли. Лабильный тритий удаляли, несколько раз растворяя вещество в метаноле (52 мл) и упаривая последний.

Очистку меченого препарата осуществляли методом ВЭЖХ в две стадии:

1) на колонке Kromasil 100C₁₈, 7 мкм (8250 мм), в 30-минутном градиенте от 0 до 100% элюента В в элюенте А, где элюент А - метанол-вода (70:30), элюент В - метанол; расход элюента - 2 мл/мин; время удерживания рапамицина - 17.78 мин;

2) на колонке Kromasil 100C₁₈, 7 мкм (8250 мм), в 30-минутном градиенте от 0 до 100% элюента С в элюенте D, где элюент С - ацетонитрил-вода (60:40), элюент D - ацетонитрил; расход элюента - 2 мл/мин; время удерживания рапамицина - 17,70 мин,

Выход меченного тритием [³Н]-рапамицина после хроматографии составил 15-20%, молярная радиоактивность - 4,6 Ки/ммоль.

Таким образом, получено новое высокомеченное тритием физиологически активное соединение.

Формула изобретения

Высокомеченный тритием [³H]-рапамицин формулы

MM4A Досрочное прекращение действия патента из-за неуплаты в установленный срок пошлины заподдержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 16.05.2011

Дата публикации: 20.03.2012

---