Агонисты аполипопротеина а-1 и их применение для лечения заболеваний, связанных с дислипидемией

 

Изобретение относится к области медицинской биотехнологии. Сущность изобретения составляют пептиды и пептидные аналоги, которые имитируют структурные и фармакологические свойства аполипопротеина (АроА-1) человека. Пептиды и пептидные аналоги представляют собой аминокислотные последовательности и мультимерные комплексы с липидами, применимы для лечения различных заболеваний, связанных с дислипидемией. В изобретении описаны фармацевтические композиции и способы лечения на основе имитаторов АроА-1. Технический результат - расширение арсенала средств борьбы с дислипидемией. 8 с. и 44 з.п.ф-лы, 8 ил., 10 табл.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть).

Формула изобретения

1. Агонист аполипопротеина A-I (Apo A-I), включающий (i) пептид из 14-22 остатков или пептидный аналог, который образует амфипатическую -спираль в присутствии липидов и который имеет формулу (I)

Z₁-X₁-X₂-X₃-X₄-X₅-X₆-X₇-X₈-X₉-X₁₀-X₁₁-X₁₂-X₁₃-X₁₄-X₁₅-X₁₆-X₁₇-X₁₈,

где X₁ представлен пролином (Р), аланином (А), глицином (G), аспарагином (N), глутамином (Q) или D-пролином (р);

Х₂ - алифатической аминокислотой;

Х₃ - лейцином (L);

Х₄ - кислой аминокислотой;

X₅ - лейцином (L) или фенилаланином (F);

Х₆ - лейцином (L) или фенилаланином (F);

Х₇ - основной аминокислотой;

X₈ - кислой аминокислотой;

Х₉ - лейцином (L) или триптофаном (W);

Х₁₀ - лейцином (L) или триптофаном (W);

Х₁₁ - кислой аминокислотой или аспарагином (N);

X₁₂ - кислой аминокислотой;

X₁₃ - лейцином (L), триптофаном (W) или фенилаланином (F);

X₁₄ - основной аминокислотой или лейцином (L);

X₁₅ - глутамином (Q) или аспарагином (N);

X₁₆ - основной аминокислотой;

Х₁₇ - лейцином (L);

X₁₈ - основной аминокислотой;

Z₁ - H₂N- или RC(O)NH-;

Z₂ - -C(O)NRR, -С(О)OR или -С(О)ОН или соответствующей солью;

каждый R независимо друг от друга представлен -Н, C₁-C₆-алкилом, C₁-C₆-алкинилом, C₁-C₆-алкинилом, С₅-С₂₀-арилом, C₆-C₂₆-алкарилом, 5-20-атомным гетероарилом, 6-26-атомным алкгетероарилом или 1-4-аминокислотным пептидом или пептидным аналогом;

каждый знак "-" между остатками Х_n независимо друг от друга обозначает амидную связь, замещенную амидную связь, изостер амида или миметик амида; или (ii) делегированную форму структурной формулы (I), в которой по крайней мере один и вплоть до восьми остатков из ₁ - X₁₈ делетированы; или (iii) измененную форму структурной формулы (I), в которой по крайней мере один из остатков X₁ - X₁₈ пo консервативному типу заменен на другой остаток.

2. Агонист АроА-I по п.1, который проявляет по крайней мере 38%-ную активность по активации фермента LCAT по сравнению с АроА-I человека.

3. Агонист АроА-I по п.1, который является измененной формой структурной формулы (I).

4. Агонист АроА-I по п.3, в составе которого гидрофобные остатки зафиксированы в соответствии с структурной формулой (I), а по крайней мере один нефиксированный остаток заменен по консервативному типу на другой остаток.

5. Агонист АроА-I по п.4, в котором X₁ представлен пролином (Р), D-пролином (р), глицином (G), аспарагином (N) или аланином (А); Х₂ - аланином (А), лейцином (L) или валином (V); Х₃ - лейцином (L); Х₅ - лейцином (L) или фенилаланином (F); Х₆ - лейцином (L) или фенилаланином (F); Х₉ - лейцином (L) или триптофаном (W); Х₁₀ - лейцином (L) или триптофаном (W); X₁₃ - лейцином (L), триптофаном (W) или фенилаланином (F); X₁₇ - лейцином (L), и по крайней мере один из остатков Х₄, Х₇, Х₈, Х₁₁, X₁₂, X₁₄, X₁₅, X₁₆ и X₁₈ заменен по консервативному типу на другой остаток.

6. Агонист АроА-I по п.3, в котором гидрофильные остатки фиксированы в соответствии со структурной формулой (I), а по крайней мере один нефиксированный остаток заменен по консервативному типу на другой остаток.

7. Агонист АроА-I по п.6, в котором Х₄ представлен аспарагиновой кислотой (D) или глутаминовой кислотой (Е);

Х₇ - аргинином (R), лизином (К) или орнитином;

X₈ - аспарагиновой кислотой (D) или глутаминовой кислотой (Е);

Х₁₁ - аспарагином (N) или глутаминовой кислотой (Е);

X₁₂ - глутаминовой кислотой (Е);

Х₁₄ - лизином (К), аргинином (R) или орнитином;

X₁₅ - глутамином (Q) или аспарагином (N);

X₁₆ - лизином (К), аргинином (R) или орнитином;

X₁₈ - аспарагином (N) или глутамином (Q) и по крайней мере один из остатков X₁, X₂, Х₃, Х₅, Х₆, Х₉, Х₁₀, X₁₃ и X₁₇ заменен по консервативному типу на другой остаток.

8. Агонист АроА-I по п.6, в составе которого Х₃ представлен лейцином (L), Х₆ - фенилаланином (F), Х₉ - лейцином (L) или триптофаном (W), Х₁₀ - лейцином (L) или триптофаном (W) и по крайней мере один из остатков X₁, Х₂, X₅, X₁₃ и X₁₇ заменен по консервативному типу на другой остаток.

9. Агонист АроА-I по п.5 или 7, в составе которого заменяющий остаток классифицируется в ту же подгруппу, что и заменяемый остаток.

10. Агонист АроА-I по п.1, являющийся делеционной формой формулы (I).

11. Агонист АроА-I по п.10, в составе которого один виток спирали пептида или пептидного аналога делетирован.

12. Агонист АроА-I по п.1, являющийся состоящим из 18 аминокислот пептидом или пептидным аналогом структурной формулы (I).

13. Агонист АроА-I по п.12, в составе которого знак "-" между остатками обозначает группу -C(O)NH-; Z₁ представлен H₂N- и Z₂ - -С(О)ОН или соответствующей солью.

14. Агонист АроА-I по п.13, в котором X₁ представлен пролином (Р), аланином (А), глицином (G), аспарагином (N) или D-пролином (р); X₂ - аланином (А), валином (V) или лейцином (L);

Х₃ - лейцином (L);

Х₄ - аспарагиновой кислотой (D) или глутаминовой кислотой (Е);

Х₅ - лейцином (L) или фенилаланином (F);

Х₆ - лейцином (L) или фенилаланином (F);

X₇ - аргинином (R), лизином (К) или орнитином;

Х₈ - аспарагиновой кислотой (D) или глутаминовой кислотой (Е);

Х₉ - лейцином (L) или триптофаном (W);

Х₁₀ - лейцином (L) или триптофаном (W);

Х₁₁ - глутаминовой кислотой (Е) или аспарагином (N);

X₁₂ - глутаминовой кислотой (Е);

X₁₃ - лейцином (L), триптофаном (W) или фенил-аланином (F);

X₁₄ - аргинином (R), лизином (К) или орнитином;

X₁₅ - глутамином (Q) или аспарагином (N);

X₁₆ - аргинином (R), лизином (К) или орнитином;

X₁₇ - лейцином (L) и

X₁₈ - аргинином (R), лизином (К) или орнитином.

15. Агонист AроА-I по п.1, который выбирают из группы, включающей

пептид 191 PVLDLLRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 191);

пептид 192 PVLDLFKELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 192);

пептид 193 PVLDLFRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 193);

пептид 194 PVLELFRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 194);

пептид 195 PVLELFKELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 195);

пептид 196 PVLDLFRELLEELKNKLK* (SEQ ID NO 196);

пептид 197 PLLDLFRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 197);

пептид 198 GVLDLFRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 198);

пептид 199 PVLDLFRELWEELKQKLK* (SEQ ID NO 199);

пептид 200 NVLDLFRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 200);

пептид 201 PLLDLFKELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 201);

пептид 202 PALELFKDLLEELRQKLR* (SEQ ID NO 202);

пептид 203 AVLDLFRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 203);

пептид 204 PVLDFFRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 204);

пептид 205 PVLDLFREWLEELKQKLK* (SEQ ID NO 205);

пептид 206 PLLELLKELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 206);

пептид 207 PVLELLKELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 207);

пептид 208 PALELFKDLLEELRQRLK* (SEQ ID NO 208);

пептид 209 PVLDLFRELLNELLQKLK (SEQ ID NO 209);

пептид 210 PVLDLFRELLEELKQKLK (SEQ ID NO 210);

пептид 211 PVLDLFRELLEELOQOLO* (SEQ ID NO 211);

пептид 212 PVLDLFOELLEELOQOLK* (SEQ ID NO 212);

пептид 213 PALELFKDLLEEFRQRLK* (SEQ ID NO 213);

пептид 214 PVLDLFRELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 214);

пептид 215 PVLDLFRELLEEWKQKLK* (SEQ ID NO 215);

пептид 230 PVLELFERLLEDLQKKLK (SEQ ID NO 230);

пептид 231 PVLDLFRELLEKLEQKLK (SEQ ID NO 231);

пептид 232 PLLELFKELLEELKQKLK* (SEQ ID NO 232);

либо в заблокированных по N-концу и(или) С-концу, либо в незаблокированных по ним формах.

16. Мультимерный агонист АроА-I, который проявляет по крайней мере 38%-ную активность по активации фермента LCAT по сравнению с АроА-I человека и который характеризуется структурной формулой (II)

или его фармацевтически приемлемая соль,

где независимо друг от друга каждый m=0 или 1;

n=0...10 - целое число;

каждый НН независимо представляет пептид или пептидный аналог по п.1;

каждый LL независимо представляет бифункциональный линкер;

каждый знак "-" независимо обозначает ковалентную связь.

17. Мультимерный агонист АроA-I, который проявляет по крайней мере 38%-ную активность по активации фермента лецитин: холестерин ацилтрансферазы (LCAT) по сравнению с АроA-I человека и который характеризуется структурной формулой (III)

или его фармацевтически приемлемая соль, где каждый Х независимо представлен

где каждый НН независимо представлен базовым пептидом формулы (I) или его аналогом, или мутированным укороченным, делегированным по внутреннему положению или достроенным вариантом в соответствии с описанным в данном тексте;

каждый LL независимо представлен бифункциональным линкером;

независимо каждый m = 0 или 1;

независимо каждый n = 0...8 - целое число;

N_ya и N_yb независимо являются многофункциональной связывающей составляющей, где y_a и y_b представляют число функциональных групп соответственно в N_ya и N_yb;

независимо каждый y_a или y_b = 3...8 - целое число;

р =0...7 - целое число;

каждый знак “-” независимо обозначает ковалентную связь.

18. Мультимерный агонист АроА-I, который проявляет по крайней мере 38%-ную активность по активации фермента LCAT по сравнению с АроА-I человека и который характеризуется формулой (IV) или (V):

или

или его фармацевтически приемлемая соль, где каждый Х независимо представлен

где каждый НН независимо представлен пептидом или пептидным аналогом по п.1; каждый LL независимо - бифункциональным линкером; независимо каждый n = 0 или 1; независимо каждый m = 0...8 - целое число;

R₁ является -OR или -NRR, где

каждый R независимо представлен -Н, C₁-С₆-алкилом, C₁-С₆-алкенилом, C₁-С₆-алкинилом, С₅-С₂₀-арилом, C₆-C₂₆-алкарилом, 5-20-атомным гетероарилом или 6-26-атомным алкгетероарилом.

19. Мультимерный агонист АроА-I по любому из пп.16 - 18, в составе которого бифункциональный линкер является расщепляемым.

20. Мультимерный агонист АроА-I по любому из пп.16 - 18, у которого n = 0.

21. Мультимерный агонист АроА-I по п.20, у которого m = 0.

22. Мультимерный агонист АроА-I по любому из пп.16 - 18, у которого каждый НН независимо друг от друга является пептидом по п.13.

23. Мультимерный агонист АроА-1 по любому из пп.16 - 18, у которого каждый НН независимо друг от друга является пептидом по п.14.

24. Мультимерный агонист АроА-I по любому из пп.16 - 18, у которого каждый НН независимо друг от друга является пептидом по п.15.

25. Комплекс агониста АроА-I и липида, включающий агонист АроА-I и липид, при этом агонист АроА-I является пептидом или пептидным аналогом по п.1, мультимерным агонистом АроА-I по п.16, мультимерным агонистом АроА-I по п.17 или мультимерным агонистом AроА-I по п.18.

26. Комплекс агониста АроА-I и липида по п.25, в котором агонист АроА-I является пептидом по п.12.

27. Комплекс агониста АроА-I и липида по п.25, в котором агонист АроА-I является пептидом по п.13.

28. Комплекс агониста АроА-I и липида по п.25, в котором агонист АроА-I является пептидом по п.14.

29. Комплекс агониста АроА-I и липида по п.25, в котором агонист АроА-I является пептидом по п.15.

30. Комплекс агониста АроА-I и липида по п.25, в котором липидом является сфингомиелин.

31. Комплекс агониста АроА-I и липида по п.25, который находится в форме лиофилизованного порошка.

32. Комплекс агониста АроА-I и липида по п.25, который находится в форме раствора.

33. Фармацевтическая композиция, содержащая агонист АроА-I и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или растворитель, при этом агонист АроА-I является пептидом или пептидным аналогом по п.1, мультимерным агонистом АроА-I по п.16, мультимерным агонистом АроА-I по п.17 или мультимерным агонистом АроА-I по п.18.

34. Фармацевтическая композиция по п.33, в которой агонист АроА-I является пептидом по п.12.

35. Фармацевтическая композиция по п.33, в которой агонист АроА-I является пептидом по п.13.

36. Фармацевтическая композиция по п.33, в которой агонист АроА-I является пептидом по п.14.

37. Фармацевтическая композиция по п.33, в которой агонист АроА-I является пептидом по п.15.

38. Фармацевтическая композиция по любому из пп.33 - 37, в которой агонист АроА-I находится в форме комплекса с липидом, при этом упомянутый комплекс состоит из агониста АроА-I и липида.

39. Фармацевтическая композиция по п.38, в которой комплекс агониста АроА-I и липида находится в форме лиофилизованного порошка.

40. Способ лечения субъекта, страдающего от заболевания, связанного с дислипидемией, характеризующийся тем, что упомянутый способ включает этап введения такому пациенту эффективного количества агониста АроА-I по п.1.

41. Способ по п.40, отличающийся тем, что агонист АроА-I находится в форме фармацевтической композиции, при этом упомянутая композиция содержит агонист АроА-I и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или растворитель.

42. Способ по п.40, отличающийся тем, что агонист АроА-I находится в форме комплекса агониста АроА-I и липида, при этом упомянутый комплекс состоит из агониста АроА-I и липида.

43. Способ по п.40, отличающийся тем, что связанным с дислипидемией заболеванием является гиперхолестеринемия.

44. Способ по п.40, отличающийся тем, что связанным с дислипидемией заболеванием является сердечно-сосудистое заболевание.

45. Способ по п.40, отличающийся тем, что связанным с дислипидемией заболеванием является атеросклероз.

46. Способ по п.40, отличающийся тем, что связанным с дислипидемией заболеванием является рестеноз.

47. Способ по п.40, отличающийся тем, что связанным с дислипидемией заболеванием является дефицит HDL или АроА-1.

48. Способ по п.40, отличающийся тем, что связанным с дислипидемией заболеванием является гипертриглицеридемия.

49. Способ по п.40, отличающийся тем, что связанным с дислипидемией заболеванием является метаболический синдром.

50. Способ лечения пациента, страдающего от септического шока, характеризующийся тем, что упомянутый способ включает этап введения такому субъекту эффективного количества агониста АроА-I по п.1.

51. Способ по п.40 или 50, отличающийся тем, что упомянутым субъектом является человек.

52. Способ по п.40 или 50, отличающийся тем, что упомянутому субъекту вводят от примерно 0,5 до примерно 100 мг/кг агониста АроА-I.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42, Рисунок 43, Рисунок 44, Рисунок 45, Рисунок 46, Рисунок 47, Рисунок 48, Рисунок 49, Рисунок 50, Рисунок 51, Рисунок 52, Рисунок 53, Рисунок 54, Рисунок 55, Рисунок 56, Рисунок 57, Рисунок 58, Рисунок 59, Рисунок 60, Рисунок 61, Рисунок 62, Рисунок 63, Рисунок 64, Рисунок 65, Рисунок 66, Рисунок 67, Рисунок 68, Рисунок 69, Рисунок 70, Рисунок 71, Рисунок 72, Рисунок 73, Рисунок 74, Рисунок 75, Рисунок 76, Рисунок 77, Рисунок 78, Рисунок 79, Рисунок 80, Рисунок 81, Рисунок 82, Рисунок 83, Рисунок 84, Рисунок 85, Рисунок 86, Рисунок 87, Рисунок 88, Рисунок 89, Рисунок 90, Рисунок 91, Рисунок 92, Рисунок 93, Рисунок 94, Рисунок 95, Рисунок 96, Рисунок 97, Рисунок 98, Рисунок 99, Рисунок 100, Рисунок 101, Рисунок 102, Рисунок 103, Рисунок 104, Рисунок 105, Рисунок 106, Рисунок 107, Рисунок 108, Рисунок 109, Рисунок 110, Рисунок 111, Рисунок 112, Рисунок 113, Рисунок 114, Рисунок 115, Рисунок 116, Рисунок 117, Рисунок 118, Рисунок 119, Рисунок 120, Рисунок 121, Рисунок 122, Рисунок 123, Рисунок 124, Рисунок 125, Рисунок 126, Рисунок 127, Рисунок 128, Рисунок 129, Рисунок 130, Рисунок 131, Рисунок 132, Рисунок 133, Рисунок 134, Рисунок 135, Рисунок 136, Рисунок 137, Рисунок 138, Рисунок 139, Рисунок 140, Рисунок 141, Рисунок 142, Рисунок 143, Рисунок 144, Рисунок 145, Рисунок 146, Рисунок 147, Рисунок 148, Рисунок 149, Рисунок 150, Рисунок 151, Рисунок 152, Рисунок 153, Рисунок 154, Рисунок 155, Рисунок 156, Рисунок 157, Рисунок 158, Рисунок 159, Рисунок 160, Рисунок 161, Рисунок 162, Рисунок 163, Рисунок 164, Рисунок 165, Рисунок 166, Рисунок 167, Рисунок 168, Рисунок 169, Рисунок 170, Рисунок 171, Рисунок 172, Рисунок 173, Рисунок 174, Рисунок 175, Рисунок 176, Рисунок 177, Рисунок 178, Рисунок 179, Рисунок 180, Рисунок 181, Рисунок 182, Рисунок 183, Рисунок 184, Рисунок 185, Рисунок 186, Рисунок 187, Рисунок 188, Рисунок 189, Рисунок 190, Рисунок 191, Рисунок 192, Рисунок 193, Рисунок 194, Рисунок 195, Рисунок 196, Рисунок 197, Рисунок 198, Рисунок 199, Рисунок 200, Рисунок 201, Рисунок 202, Рисунок 203, Рисунок 204, Рисунок 205, Рисунок 206, Рисунок 207, Рисунок 208, Рисунок 209, Рисунок 210, Рисунок 211, Рисунок 212, Рисунок 213, Рисунок 214, Рисунок 215, Рисунок 216, Рисунок 217, Рисунок 218, Рисунок 219, Рисунок 220, Рисунок 221, Рисунок 222, Рисунок 223, Рисунок 224, Рисунок 225, Рисунок 226, Рисунок 227, Рисунок 228, Рисунок 229, Рисунок 230, Рисунок 231, Рисунок 232, Рисунок 233, Рисунок 234, Рисунок 235, Рисунок 236, Рисунок 237, Рисунок 238, Рисунок 239, Рисунок 240, Рисунок 241, Рисунок 242, Рисунок 243, Рисунок 244, Рисунок 245, Рисунок 246, Рисунок 247, Рисунок 248, Рисунок 249, Рисунок 250, Рисунок 251, Рисунок 252, Рисунок 253, Рисунок 254, Рисунок 255, Рисунок 256, Рисунок 257, Рисунок 258, Рисунок 259, Рисунок 260, Рисунок 261, Рисунок 262, Рисунок 263, Рисунок 264, Рисунок 265, Рисунок 266, Рисунок 267, Рисунок 268, Рисунок 269, Рисунок 270, Рисунок 271, Рисунок 272, Рисунок 273, Рисунок 274, Рисунок 275, Рисунок 276, Рисунок 277, Рисунок 278, Рисунок 279, Рисунок 280, Рисунок 281, Рисунок 282, Рисунок 283, Рисунок 284, Рисунок 285, Рисунок 286, Рисунок 287, Рисунок 288, Рисунок 289, Рисунок 290, Рисунок 291, Рисунок 292, Рисунок 293, Рисунок 294, Рисунок 295, Рисунок 296, Рисунок 297, Рисунок 298, Рисунок 299, Рисунок 300, Рисунок 301, Рисунок 302, Рисунок 303, Рисунок 304, Рисунок 305, Рисунок 306, Рисунок 307, Рисунок 308, Рисунок 309, Рисунок 310, Рисунок 311, Рисунок 312, Рисунок 313, Рисунок 314, Рисунок 315, Рисунок 316, Рисунок 317, Рисунок 318, Рисунок 319, Рисунок 320, Рисунок 321, Рисунок 322, Рисунок 323, Рисунок 324