Патент ссср 220170

220170

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимый от №

1 л. 12q, 6(01

Заявлено 06.Ч1!1.1966 (№ 1096290/23-4) с присоединением заявки №

МП1; С 071

УД Ii 547.964.4. 07 (088.8) Приоритет 24 VIII.1965, № 11898(65, Швейцария

Опубликовано 14.VL1968. Бюллетень ¹ 19

Комитет по делам изобретений и открытий при Совета Министров

СССР

Дата опубликования описания 30.1Х.1968

Авторы изобретения

Иностранцы

Янош Плесс (без подданства), Стефан Гуттманн H Роже Буассонна (Швейцария) Иностранная фирма

«Сандос А. Г, Базель» (Швейцария) Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ D-СЕРИЛ-L-ТИРОЗИЛ-L-СЕРИЛ-L-НОРЛЕЙЦИЛ-L-ГЛУТАМИЛ-L-ГИСТИДИЛ-L- ФЕНИЛАЛАНИЛ-L-AP1 È Н ИЛ-L-ТРИ ПТОФАН ИЛ ГЛ И ЦИЛ-L-Л И 3 ИЛ-L-П РОЛ ИЛ-L-ВАЛИЛГЛИЦИЛ-L-ЛИЗИЛ-L-ЛИЗИЛ-1;АРГИНИЛ-1-APГИНИЛ-1-Г РОЛ ИЛ-L-ВАЛ ИЛ-L-Л ИЗ ИЛ-L-ВАЛ ИЛ-L-ТИ РОЗ ИЛ-Ь-П РОЛ ИЛ-L-ВАЛ И НАМИДА

Предлагается способ получения нового пентаикосапептида — D-серил-L-тирозил-1 -серил-L-норлейцил-L-глутамил-L-гистидил — 1 - фенилаланил-1 -аргинил-1 - триптофанилглицил-1 -лизил-1 -пропил-1 -валилглицил-1 -лизил — L-лизил-1 -аргинил-1 -аргинил-1 -пролил - 1 - валил-L-лизил-1 -валил-1 -тирозил-1 -пролил - 1-валинамида, характеризующегося высокой адрснокортикотропной активностью.

Способ заключается в том, что 1-валил-е-N-R-1 -лизил-1 -валил-1 -тирозил-1 -пролил-1 - валинамид, где К вЂ” карботретбутокси-, карботретамилокси-, толуолсульфонил-, фталил-, формил- или трифторацетилгруппа, конденсируют известным способом, например методом смешанных ангидридов, с N-карбобензокси-1—

-валилглицил-в-N-R-1 -лизил-в-N-R - 1 — лизилнитро-1 -аргинилпитро-1 -аргинил-1 — пролином, где R имеет вышеприведенное значение, полученный N-карбобензокси-1 -валилглицил-в-N-R-I -лизил-е-N-И-лизилнитро-L-аргинилнитро-1 -аргинил-1 -пролил-1 -валил-в-N-И - лизил-L-валил-1 -тирозил-L-пролил-L-валинамид после отщепления нитро- и R-групп известным методом, например гидрированием в кислой среде над палладием, конденсируют с а-N-трифенилметил-у-О-третбутил-1 -глутамил - Им

-трифенилметил-1 -гистидил-1 - фенилаланил-1 -аргинил-1 -триптофанилглицил-е-N-R-1 — лизил-1-пролином известным методом, например карбодиимидным, и полученный сЛ-трифенилметил-у-О-третбутил-1-глутамил - И.и - трифенилметил-1 -гистидпл-1 -фенилаланил-1 — аргинил-1 -триптофанилглнцил-е-N-И - лизил - 1-пролил-1 -валплглнцил-в-K-R-1 -лизил-е-N — К-1 -лизил-1 -аргинил-1 -аргинил-1 -пролил-1. - валил-е-N-R-1 -лизил-1 -валил-1 -тнрозил-1 — пролил-L-валинамид после отщепления а-N-трифенилметилгруппы известным способом, например гидролизом 80% -ной уксусной кислотой, конденсируют с М-R -D-серил-1 -тирозил-1 -серил-L-норлейцилазидом, где R. — трифенилме. тил- или карбоIðåòáóòoêñè-, карботретамилокси-, карбобензокси-, трифторацетнл-, ацетил-, 20 хлорацетил- или формилгруппа, с последую:цим отщсплением R-, R - и Илт-трифенилметилгрупп известными способами, например гидрированием нли ацидолизом.

Указанный пентаикосапептид синтезируется

25 общеизвестными методами (метод смешанных

220170

15

50

55 б0 б5 растворяют в 200 л,г диметилформ3MHä3 и

54 лл триэтиламина, охлаждают до 0"-С и отфильтровывают триэтиламингидрохлорид. Диметилформамид испаряют в высоком вакууме и растворяют остаток в 150 мл пиридина. Затем прибHHëHIoò по каплям 100 г третбутилоксикарбоиилазида и оставляют на 2 дня при

20" С. Далее растворитель испаряют и растворяют продукт в эфире уксусной кислоты. После промывания водой, разбавленной соляной кислотой, и раствором двууглекислого калия продукт высушивают над сульфатом натрия.

После испарения эфира уксусной кислоты остается КТБ-D-сер-ОМе " виде масла, которое растворяют в 400 лл метанола и оставляют с

50 лл гидразишидрата на 2 дн", при 20 С.

Гидразид кристаллизуется после испарения метанола. После перекристаллизации из горячего эфира уксусной кислоты получают 53 г

КТБ-D-ссрингидразида с т. пл. 114 С, /а1" — 3 в диметилформамиде.

10 г КТБ-D-серингидразида растворяют при — 10"С в 136 мл раствора 1 н. соляной кислоты, содержащей 15 г хлорида натрия. При этой температуре к ним прибавля1от 160 мл эфира уксусной кислоты, а затем в три порции — 38 г нитрита натрия. При постоянном размешивании при 20 С массу оставляют реагировать еще 5 лик. Далее отделяют фазу эфира уксусНоН кислоты, промывают холодным 1Îi, „-ным раствором двууглекислого калия и просушивают над сульфатом натрия. К просушенному раствору прибавляют раствор, состоящий из 13г хлоргидрата тир-сер-нлей-ОМе в 60 л1 ди.,1етилформамида и 6 л1 триэтилямина. Концентрируют раствор в вакууме и оставляют на !

6 час при 20 С. Оставшийся растворитель отгоняют в вакууме, растворяют остаток в эфире уксуснои кислоты, промывают разбавленIoH фосфорной кислотой и раствором двууглекислого калия и просушивают над сульфатом натрия. После концентрирования растворителя и осаждения эфиром получают 15 г КТБ-D-сертир-сер-нлей-ОМе (т. пл. 135 С, /а/, 0 — 6 в метаноле) .

11 г КТБ-D-сер-тир-сер-плей-ОМе растворяют в 100 лл метанола, прибавляют 45 мл гидразннгидрата и оставляют на ночь при 20 С.

Продукт кристаллизуется. Затем его фильтруIoT H промыва1от метанолом и IIOTpo;leéiii»I,I эфиром. Получают 7,7 г КТБ-D-сер-тир-сер-нлсй-гидразида с т. пл. 210 С, /а/ 0 +о,4 в диметилформамиде.

2 г полученного гидразида растворяют в

12 мл диметилформамида, добавляют 4 л.1 воды, охлаждают до — 10 С, прибавляют еще

2 лл раствора б н. соляной кислоты и 280 лг нитрита натрия, перемешивают все это 5 лин при — 5"С, а затем вводят 300 л.г 0,2 н. раствора бикарбоната калия и центрифугируют.

Растворяют полученный КТБ-сер-тир-сер-нлей-азид в 50 мл диметилформамида, добавляют

45 к пим 10,5 г ацетата ТБО-глу-трит-гис-фал-арг-трн-гли-КТБ-лиз-про-вал-гли - КТБ - лиз-вал-гли-КТБ-лиз-КТБ-лиз-арг-арг- про - вал-КТБ-лиз-вал-тир-про-валинаъ1ида и оставляют ня 12 час при 0 С. После этого добавляют еще тетрапептидазид, приготовленный из 2 г КТБ-D-сер-тир-сер-нлсй-п1дразида, полученную массу оставляют иа 6 час при 0 С, упаривают, обрабатывают эфиром уксусной кислоты, промывают горячим ацетоном и эфиром уксусной кислоты и сушат в вакууме. Полученный продукт растворяют в 100 л.2 90%-ной трифторуксусной кислоты, оставляют на 1 час при

20 С под азото », упаривают, обрабатывают эфиром уксусной кислоты, фильтруют и сушат. Полученный продукт растворяют в 500 л1.1

0,2 н. раствора уксусной кислоты. Обрабатывают амбсрлитом 11 Л-410 в виде ацетата, фильтруют и лиофи.".изиру1от. После сушки над ед1:1.» натром полу чаlот 7,5 я D-сер тир сср нлсй

-глу-гис-фал-арг-три-гли-лиз-про-вал-гли - лиз-лиз-арг-арг-про-вал-лиз-вал-тир-про - валинамидя Гсптяяцстятдекягидрятя, который является гомогенным при хроматографии и элсктрофорезe . Полньш п1дролиз даст следующее соотношение аминокислот: сер1,0, тир1,0, 11лсй 1,1, ГЛУ 1 0, ГНСI,О, фалl,l ЯРГ3,1, ГЛ112.0 лиз4 i проз 0, валг,0 .

Вычислено, 0, 0- С 51,9; Н 7,5; Х 16,2; О 24,4.

Найдено, 0/ . С 52.1: Н 75; Х! 156; О 248.

Т. п. продукта 209-С (с разл.), /а/,,0 — 80 г 1 н. уксусной кислоте.

Предмет и" обрет ния

Способ получения D-серил-1 -тирозил-1 -серил-1 -норлсйцил-1 -глутамил-1 - гистидил - 1-фенилаланил-1 -аргинил - 1 - триптофанилглицил-1 -лизил-1 -пролил-1 - валилглицил-1 - лизил-1 -лизил-1 -аргш1ил-1 -ар131нил-1 - пролил-1-валил-1-лизил-L-валил-1 - тирозил-L - прол ил-L-валин амида, от.1ича1ои1 ий ся тем, что -валил-е-N-R-1 -лизил-1 -валил-1 -тирозил - 1

-пролил-Lкси-, карботретамилокси-, толуолсульфош1л-, фталил-, формил- или трифторацетилгруппа, кондснсируlот извсстиым способом, например

iicTo:IG:iI смешанных ангидридов, с М-кярбобснзокси-L-валилглицил-е-М-К-1 -лизил-е-Х-R — 1лизилнитро-1 -арпшилнитро-1.-арги1шл-1 - пролином, где R Hi»ест вышеприг,.дсннос значение, пол ченный ii-;:àðáîáoíçîêoH-1 -валилглицил-е-Х-iR-1 -лизил-е-Х-R-1 -лизилиитро-1 - арпшилнитро-1-аргинил-1-пролил-1 -валил-е - Х-R-1 -ли- и.ii-L-валил-1 -тирозил-1 -пролил - 1 -валинамид после отщеплеш1я нитро- и R-групп известным методом, например гидрироваиисм в кислой средс i1iяд пa;ляд11cм, кондс11с11pуioт с а-Х-трифенилмстил- -О-третбутил-1 - глутамил-Им-трифенилметил-1 -гистидил-1 - фенилаланил-1 -аргинил-1 -триптофяиилглицил-е - Х-Й- -HH Ii 1-1 -lipo;II;Iic.il Известным licTOIO:ii, H3пример карбодиимидиым, и полученный а-U-трифенилметил-у-О-трстб тил - L - Глутамил220170

Составитель А. Акимова

Техред Л. К. Малова

Редактор Л. А. Ильина

Корректор Н. Босняцкая

Заказ 282ИО Тираж 530 Подписное

Ц11ИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4 ппгоаФия, пр. Сапунова, 2

-Им-трифенилметил-L-гистидил-L - фенилаланил-L-аргинил-L-триптофанилглицил-в-N-R - 1-лизил-L-пролил-L-валилглицил-в-N-R-1.-лизиле-N-R-1-лизил-L-аргинил-1-аргинил - L - пролил-1 -валил-е-Х-К-1 -лизил-1 - валил-1 - тирозил-L-пролил-1 -валинамид после отщепления а-N-три фенилметилгруппы известным способом, например гидролизом 80%-ной уксусной кислотой, конденсируют с N-R -D-серил-1 -ти. розил-L-серил-1 -норлейцилазидом, где R — грифенилметил- .или карботретбутокси-, карботретамилокси-, карбобензокси-, три фторацетил-, ацетил-, хлорацетил- или формилгруппа, с последующим отщеплением R-, R - и Им-трифенилметилгрупп известными способами, например гидрированием или ацидолизом.