Способ получения d-циклосерина

Союз Советских

Социалистических

Республик

Все" о -..- =. ° бигиотек, ): ;".

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 12.Xf.!963 (№ 864163/31-16) Кл. 30Ь, 6 с присоединением заявки ¹

МПК A 61k

УДК 615.779.9(088.8) Приоритет

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

Стпубликовано 12.l fl.1968. Бюллетень № 10

Дата опубликования описания 15Л .1968

Авторы изобретения

Л. Ф. Яхонтова, С. А. Жуковская, Б, fl. Брунс и В. Д. Карцева

Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕИИЯ d-ЦИКЛОСЕРИНА

Известны способы получения антибиотика .а-.циклосерина из культуральной жидкости путем ионообменной сорбции. Указанные способы сложны н не позволяют:получать антибиотик удовлетворительного качества с высо.ким выходом.

С целью повышения выхода и улучшения качества целевого продукта культуральную жидкость попеременно обрабатывают гидратом окиси кальция и фосфорной кислотой при рН около 8,5 — 9,5, а затем осаждают ионы кальция при рН примерно 7,8 — 8,5 тринатрийфосфатом.

Ионообменную сорбцию антибиотика из нативного раствора проводят при конечном зчачении рН 4,2 — 4,0 силbHосшитым сульфокатионитом в водородной форме.

Для получения д-циклосерина к культуральной жидкости при медленном перемешивании попеременно добавляют гидрат окиси кальция в виде известкового молока и фосфорную кислоту. Гидрат окиси кальция взодят в количестве 12 кг на 1 л1а культуральной жидкости, а фосфорную кислоту в таком количестве, чтобы поддер>к.;вать рН раствора на уровне 8,5 — 9,5. По окончании обработки рН раствора должен быть 7,8 — 8,2. Затем в смесь вводят тринатрийфосфат в количестве, необходимом для полного осаждения кальция (1 — 3 кг на 1 хта культуральной жидкости). Значение рН раствора при этом 8,2 — 8,5.

При таком значении рН смесь выдерживают

30 — 40 мин и фильтруют со скоростью 60л/час на 1,и- . К прозрачному нативному раствору добавляют такое количество сильносшптото катионита в водородной форме, чтобы снизить рН раствора до 4,0 — 4,2. При этом находящийся (B растворе в виде катионов и биполярных ионов цпклосерин сорбпруется, а другие низкомолекулярные более слабые органические основания (недиссоциированные) остаются в ра творе. Органические основания большого молекулярного веса не сорбируются сильносшитым сульфокатионптом вслед15 ствие сигового эффекта.

Злюцию циклосерина осуществляют водным раствором аммиака. Злюат осветляют кислым активированным углем и упаривают. К водному концентрату добавляют смсшивающийся с водой органический растворитель, охлаждают и доводят уксусной кислотой до нейтральной реакции, B результате выделяется кристаллический d-циклосерин.

Пример. К 4,55 л культуральпой жидко25 сти с активностью 2900 м/.и т при медленном псремешивании добавляют 54 г СаО в виде известкового молока, поддерживая рН среды на уровне 8,5 — 9,0 добавлением фосфорной кислоты. После окончания добавления СаО

30 устанавливают рН 7,8, добавляют 14 г трп-!

Тсхрсд Л. Я. Бриккер 1(орректоры: С. A. Башлыкова и 8. В. Босняцкая

Редактор Байнова

Заказ 1013;3 Тираж 530 Подписное

ЦИИИПИ 1(огиитета по дслам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2 натрийфосфата и выдерживают 30 пик. Затем культуральную жидкость отфильтровывают со скоростью 60 л/час на 1 л-, получая

4,55 л прозрачного нативного раствора с активностью 2440 у/лл и рН 8,3. Выход на стадии предварительной обработки 84,5%.

К 4,55 л нативного раствора добавляют

124 г (на сухой вес) сильно поперечносвязанного сульфокатионита КУ-2, содержащего

20",о дифенилбензола. Катионит берут в водородной форме. Сорбцию проводят при перемешивании 1 час. Катионит поглощает 9260000у циклосерина, что составляет 84,5% от его содержания в нативном растворе.

Промытый обессоленой водой катионит помещают в дистиллированную воду (100—

150 д1л на 100 г смолы) и при перемешпвании добавляют концентрированный водный аммиак до установления рН 10.5. После часового перемешивания катионит отделяют и повтODHO обрабатывают аммиаком. Оба элюата объединяют, обраоатывают кислым активирова:IIIII I угле;. (5)/< от ооьема элюата) и упаривают в вакууме при 25 С. Получают 66 .ил концентрата с содержанием 122000 т/лл, к которому добавляют 330 я1л смеси p313HDIx Ооъемов этилового и изопропилового спиртов. Водноорганический раствор фильтруют, охлаждают до

2"С и при перемешивании добавляют уксусную кислоту до нейтральной реакции. Выпавший кристаллический циклосерин отфильтровывают, промывают этиловым спиртом и сушат над пятиокисью фосфора. Получают

4,93 г кристаллического d-циклосерина с активностью 980 у/мг (98% чистоты), что составляет 43,6% от содержания в нативном расТ0 творе и 36,8% от содержания в культуральной жидкости.

Предмет изобретения

1. Способ получения д-циклосерина из куль15 туральной жидкости путем ионообменной сорбции, отличающийся тем, ITO с целью повышения выхода и улучшения качества целевого продукта, культуральную жидкость попеременно обрабатывают гидратом окиси

20 кальция и фосфорной кислотой .при рН около

8,5 — 9,5, а затем осаждают ионы кальция при рН примерно 7,8 — 8,5 тринатрийфосфатом.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ионообменпую сорбцию антибиотика из на25 тпвного раствора проводят при конечном значении рН 4,2 — 4,0 сильносшитым сульфокатио. питом в водородной форме,