Способ определения токсичности воды

 

Использование: биологическая индикация , определение токсичности воды. Сущность изобретения: для оценки токсичности воды проводят реакцию термогемолиза эритроцитов и определяют относительную токсичность по формуле: ЕТ 50 опыт S где S - относительЕТ 50 контроль ная токсичность исследуемой пробы, ЕТ50 контроль - время гемолиза половины эритроцитов в контрольной пробе. ЕТ50 опыт - время гемолиза половины эритроцитов в исследуемой пробе воды 2 табл

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (st)s G 01 N 33/18

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ч Ю

,(лЭ Ы

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4728000/13 (22) 29,05.89 (46) 15,09.92. Бюл. N. 34 (71) Экспериментальная лаборатория медико-биологических проблем (72) С.Г. Сергеев и А. Е, Кравчук (56) Корнейчук Е,П. и др, Определение токсичности биологически активных химических веществ. Гигиена и санитария, 1988, N.9,,с,38.

Blondin G.À. Mammalian mitochondria an

in vitro monitors of water quality, Bull, Environ.

Contam. Toxicol., 1987, 38, р, 467 — 474.

Изобретение относится к биологической индикации, в частности к определению токсичности воды.

Известен способ определения токсичности воды с использованием культуры микроорганизмов.

Наиболее близким тест-объектом для оценки токсичности воды являются митохондрии млекопитающих.

Цель изобретения — повышение достоверности определения токсичности. Для этого в качестве тест-объекта используются эритроциты крови.

Примеры приготовления тест-объекта.

Используют готовый препарат эритроцитарной массы.

5 — l0 мл свежей крови наливают в небольшую емкость и в течение 10 — 15 мин перемешивают плавными круговыми движениями с помощью стеклянных шариков.

Затем отделяют полученную эритроцитарную массу со сгустков однослойным марле. Ж 1762232 Al (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ ВОДЫ (57) Использование: биологическая индикация, определение токсичности воды. Сущность изобретения; для оценки токсичности воды проводят реакцию термогемолиза эритроцитов и определяют относительную токсичность по формуле:

ET 50 опыт

ЕТ 50, где S — относительЕТ 50 контроль ная токсичность исследуемой пробы, ЕТ50 контроль — время гемолиза половины эритроцитов в контрольной пробе, ЕТ50 опыт— время гемолиза половины эритроцитов в исследуемой пробе воды. 2 табл. вым фильтром, К полученной эритроцитарной взвеси добавляют 1 — 2 мл чистого физиологического раствора.

Способ осуществляется следующим образом.

Приготавливают физ. раствор из исследуемой пробы воды, которую предварительно фильтруют. Затем к 5 мл подготовленной пробы добавляют эритроцитарную массу в количестве, обеспечивающем концентрацию 200 — 250 клеток на 1 мкл (10 мкл эритроцитарной массы на 1 мл пробы), Для контрольной пробы берут 5 мл чистого физиологического раствора и добавляют то же количество эритроцитарной массы, Пробирки со взвесью эритроцитов в растворах проб помещают в термастат на

30 мин при 37 С.

После термостатирования пробы центрифугируют при 5 G в течение 10 мин для осаждения эритроцитов, надосадочную

1762232

30

Таблица 1

Таблица 2

Содержание токсикантов

10,9

8,3

1,3

2,6

3,0

3,1

1,2

2,9

1,5

2,0

0,9 жидкость удаляют и добавляют чистый физ. раствор до прежнего объема.

1 мл исследуемой пробы помещают в кювету спектрофотометра и проводят реакцию термогемолиза при 58 С.

Аналогичную реакцию проводят с контрольной пробой, Регистрируют зависимость величины пропускания Т луча света при длине волны 670 нм от времени термического воздействия на эритроциты.

Определяют ЕТ50 — время, в течение которого происходит термогемолиз половины всех эритроцитов в растворе.

Относительную токсичность определяют по формуле

ЕТ 50 опыт

ЕТ 50 контроль

В табл, 1 приведены результаты определения некоторых веществ предложенным способом и прототипом, С помощью предлагаемого способа была оценена токсичность проб речной воды.

Содержание загрязнителей выражено в предельно допустимых концентрациях.

5 Данные представлены в табл, 2, Формула изобретения

Способ определения токсичности воды, включающий инкубацию пробы с тест-объектом с последующим определением, о т л

10 ичающийся тем,что,сцельюповышения достоверности определения токсичности, в качестве тест-объекта используют эритроциты крови, определение токсичности проводят по реакции

15 термогемолиза на спектрофотометре при длине волны 670 нм и оценкой по

ЕТ50опыт формуле Б—

ЕТ50контроль где S — относительная токсичность;

20 ЕТ50 опыт — время гемолиза половины эритроцитов в исследуемой пробе;

ЕТ50 контроль — то же, в контрольной пробе.