Способ прогнозирования развития хронического гепатита в

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s G 01 N 33!535

ГОСУДАР СТВЕ ННЫ Й КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЬГГИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

)1 gg g rl

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4800506/14 (22) 11.03.90 (46) 30.07.92.Бюл, N. 28 (71) Нижегородский медицинский институт им, С.M.Кирова (72) А.Б.Жал яускас (56) Глушкова Е.С. Клинико-иммунологическая характеристика вирусного гепатита В с учетом динамики антигенемии, Автореф. канд. дис., JlÄ 1989. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА В

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, и может быть использовано для своевременного прогнозирования угрозы хронизации гвпатита B.

Целью изобретения является повышение точности прогнозирования и упрощение способа, Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

При поступлении больного в стационар, но не позже 2-й недели желтухи, в сыворотке венозной крови определяют иммуноферментным методом содержание иммуноглобулинов (Ig) анти-HBS IgM u lgG.

Используют наборы реактивов производства Института органического синтеза АЙ

Латв. CCP. Ход анализа модифицирован для обеспечения прямого определения энтиHBs IgG и количественной оценки обоих классов анти-HBs.

Для определения анти-НВ» !9М в плЬскодонный планшет для иммунологических

„„5U„„1751680 А1 (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогнозирования развития хронического гепатита.

Цель изобретения —. повышение точности и упрощение способа, У больного производят забор крови, выделяют из нее сыворотку, оп редел я ют содержание вирусспецифических иммуноглобулинов А и G, рассчитывают соотношение между ними и при величине соотношения, равном 1,2 и выше, прогнозируют развитие хроническото гепатита В, По сравнению с прототипом достигают увеличения точности на 24,3% при одновременном упрощении способа, исследЬвэний с сорбированными антителами к р-цепям иммуноглобулинов человека вносят испытуемые "сьТворотки; разведенные трис-НС1-белками буфером в 100 раз, в количестве 0,1 мл, стандартные сыворотки с известным титром анти-HBs IgM и отрицательный контроль также по 0,1 мл в разведении 1:10д. Планшет с сыворотками инкубируют при 37 С в течение 1 — 1,5 ч, после чего промывают дистиллированной водой 6 раз, На следующем этапе проводят инкубацию планшета с внесенным по 0,1 мл рабочим растворов HBs Ag (из набора реактивов) при 37 С в течение 1 — 1,5 ч с последующей промывной дистиллированной водой

6 раз, Затем в планшет вносят рабочий раствор конъюгата анти-НВз!с пероксидазой хрена и инкубируют 1 ч при 37 С. После

6-кратной промывки дистиллированной водой планшет "проявляют" субстратом на основе ортофенилдиамина s течение 10 — 20 мин при комнатной температуре. Реакцию останавливают 1 N раствором серной кисло1751680

Составитель В,Литовченко

Техред М. Морге нтал Корректор Т. Вашкович

Редактор А,Лежнина

Заказ 2688 Тираж Подписное . ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

ПроизвОдственно-издательский комбинат "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

3 ты и проводят учет результатов нв спектрофотометре или фотоэлектроколориметре на волне 492 нм. По результатам тестирования стандартных сывороток строят калибровочную кислоту, в сопоставлении с которой on- 5 ределяют содержание анти-HBsl IgM в исследуемых сыворотках, Для определения анти-НВя IgG сыворотки (испытуемые и контрольные) в разведении 1;100 на трис-HCI-белковом буфере 10 вносят по 0,1 мл в планшет с сорбированным HBs Ag и инкубируют 1 ч при 37 С, После 6-кратной промывки дистиллированной водой в лунки планшета вносят рабочий раствор коньюгата А-белка с пероксидаэой 15 хрена по 0,1 мл и инкубируют при 4 С 45 мин. Учет результатов реакции проводят аналогично таковому при определении анти HBs IgM.

После определения содержания анти- 20 .HBs обоих классов арифметически рассчитывают коэффициент K(G/М). При значении

К (G/Ì) менее 1,2 прогнозируют выздоровление в исходе острого процесса; а при

K(G M) 1,2 и более — угрозу формрования 25 .хронического гепатита В, Пример 1. Выписка из истории болезни М 1004. Больной С-в, 25 лет. Клинический диагноз: острый гепатит В, легкая желтуш. ная форма затяжного течения, При первич- 30 ном исследовании(14 день желтухи) HBs Ag положительный, АлАТ 4,8 ммоль/ч-л, общий билирубин 31 мкмоль/л, анти-HBs 1 М 5,6, анти-Н Bs IgG 4,2, K(G/M) 0,75. Прогноз благоприятный. НВз Ag элиминировался к 75- 35 му дню от появления. желтухи, уровень АлАТ стойко нормализовался на 7 мес после начала болезни. Снят с учета через 1 год от начала болезни по выздоровлению, П р и мер 2. Выписка из истории болез- 40 ни М 3676. Больной П-в, 57 лет. Клиническйй диагноз: острый гепатит В, легкая желтушная форма. При первичном исследовании (4 день желтухи) HBs Ag в титре

1/512, АлАТ 3,7 ммоль/ч л, общий билирубин 122 мкмоль/л, анти-HBsllgM 5,5, антиHBslgG 6,6, K(G/М) 1,2, Прогноз в плане хронизации неблагоприятный, При динамическом наблюдении в конце первого года после острого гепатита В диагностирован хронической персистирующий гепатит В.

Диагноз выставлен на основании многократного выявления HBs Ag на фоне 2-3кратного повышения АлАТ, умеренной гепатомегалии, Предлагаемый способ прогнозирования угрозы формирования хронйческого гепатита В был применен у 135 больных, При этом у 115 больных прогнозировался благоприятный исход болезни, прогноз оказался верным у всех пациентов, У 20 человек прогнозировалась угроза хронизации НВ-инфекции, Из них у 11 сформировался хронический гепатит В. точность прогноза составила 55%,. В целом точность прогноза (благоприятных и неблагоприятных исходов) 93,3%, По сравнению с и рототипом, где точность прогноза была 69%, точность прогноза увеличилась на 24,4% с одновременным упрощением способа.

Формула изобретения

Способ прогнозирования развития хронического гепатита В, включающий забор крови, выделение сыворотки с последующим ее исследованием в иммуноферментном анализе, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа, в сыворотке определяют содержание вирусспецифических иммуноглобулинов А и G, рассчитывают соотношение между ними и при величине соотношения, равном 1,2 или выше, прогнозируют развитие хронического гепатита В.