Штамм вируса инфекционного бронхита кур для приготовления вакцинных препаратов

 

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой штамм вируса инфекционного бронхита кур, используемый для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур. Целью изобретения является повышение реакто-генности, безвредности и иммуногенности штамма. Вакцинный штамм AM получен методом последовательных пассажей на развивающихся куриных эмбрионах и в культуре клеток из эпизоотического штамма депонирован во ВГНКИ под Ms 65. Штамм AM обладает слабой остаточной вирулентностью, не вызывает клинических признаков заболевания инфекционным бронхитом у цыплят 1-30-ден8ного возраста при введении в дозе 10 -10^ ЭИД50/0,2 мл, в 50- 100 раз превышающей вакцинальную. При двукратном введении цыплятам 10-18- дневного возраста в разведении 1:25- 1:100 штамм AM создает прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур референтных штаммов серотипов Массачузетс, Коннектикут, Айова-97, Айова-609 и штаммов, выделенных в СССР.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (st)s С 12 N 7/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВЛДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4847703/13 (22) 30.05.90 (46) 30.01.92. Бюл. hh 4 (71) Всесоюзный научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства (72) А.Б.Терюханов и М.Г.Мазурина (53) 576,8.094,29(088.8) (56) ОаНа L, at al. Magyar Allatorvostok l apnea, 1986, 41,9. р.525 530.

Gdovfnova А., Folia veter. Koslce, 1978, а 19, р.220-221. (54) ШТАММ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО

БРОНХИТА КУР,ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ

ВАКЦИННЫХ ПРЕПАРАТОВ (57) Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой штамм вируса инфекционного бронхита кур, используемый для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур. Целью изобретения является повышение реактоИзобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой штамм вируса инфекционного бронхита кур, используемый для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур.

Для успешной борьбы с инфекционным бронхитом кур первостепенное значение имеет вакцинопрофилактика. Вакцинные штаммы вируса инфекционного бронхита должны иметь слабую реактогенность, быть безвредными, высокоиммуногенными и не обладать реверсибельностью при последовательных пассажах через организм прививаемых птиц.

Известны штаммы, применяемые для изготовления живой вакцины против инфекционного бронхита кур Н-120, Н-52. Необ.ЫЛ 1708839 А1 генности, безвредности и иммуногенности штамма. Вакцинный штамм АМ получен методом последовательных пассажей на развивающихся куриных эмбрионах и в культуре клеток иэ эпизоотического штамма депонирован во ВГНКИ под М 65. Штамм

AM обладает слабой остаточной вирулентностью, не вызывает клинических признаков заболевания инфекционным бронхитом у цыплят 1 — 30-денвного возраста при введении в дозе 10 — 10 ЭИД5о/0,2 мл, в 50100 раз превышающей вакцинальную, При двукратном введении цыплятам 10-18дневного возраста в разведении 1:25 — 1:100 штамм АМ создает прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур референтных штаммов серотипов Массачузетс, Коннектикут, Айова-97, Айова-609 и штаммов, выделенных в СССР. рон-1, Необрон-2, Бронховак-1 и Бронховак-2. Все перечисленные штаммы относятся к одному серотипу Массачузетс. Штаммы

Необрон-1, Необрон-2, Бронховак-1 и Бронховак-2 являются адаптированными штаммами Н-120 и Н-52, депонированными в

Чехословакии и Венгрии соответственно.

Штамм Н-52 прошел 52 пассажа на куриных эмбрионах и обладает высокой остаточной вирулентностью.

Штамм Н-120 прошел 120 пассажей на куриных эмбрионах и обладает меньшей па-. тогенностью, однако при интранаэальном его применении у 60 привитых SPF-цыплят наблюдают проявление клинических признаков поражения органов дыхания.

1708839

В отечественной ветеринарной практике нет штамма, пригодного для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур.

Цель изобретения — повышение реактогенности, безвредности и иммуногенности штамма, Полученный штамм вируса инфекционного бронхита кур — сом. Coronavlrldae род

Coronavlrus, вид avian депонирован во

ВГНКИ код М 65 имеет следующие биологические и физиологические характеристики.

У зараженных эмбрионов кур 9-дневной инкубации вакцинный вирус инфекционно. го бронхита штамма АМ вызывает скручива, ние эмбриона в шар, отставание его в росте вплоть до карликовости, уплотнение амниотической оболочки. Титр вируса в экстраэмбриональной жидкости достигает

107-10 Э ИДьо/0,2 мл.

Предлагаемый штамм обладает слабой остаточной вирупентностью и не вызывает клинических признаков заболевания инфекционным бронхитом у цыплят 1-ЗО-дневного возраста при введении интраназально или методом выпаивания в дозе iÎ вЂ” 10

ЭИДю в обьеме 0,2 мл. При этом указанная доза вируса в 50 — 100 раз превышает дозу, используемую при вакцинации. Поствакцинальная реакция отмечается у 8-10 g, привитых цыплят на 3 — 4 день после вакцинации, длится 7-10 дн и характеризуется слабым ринитом и чиханием.

Вирус инфекционного бронхита кур заявляемого штамма АМ с титром 10 — 10

ЭИДцо/0,2 мл при интраназальном двукратном введении цыплятам 10-18-дневного возраста в разведении 1:25 — 1:1000 создает у цыплят прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур, референтных штаммов серотипа Массачуэетс, Коннектикут, Айова-97 и Айова-609, а также штаммов, выделенных в СССР, При двукратном пероральном введении штамма

АМ, разведенного i:1000, в объеме 10 мл на цыпленка с интервалом 14 дней у цыплят также создается прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур, Пассирование предлагаемого штамма на цыплятах 1-13-,äíåâíîãî возраста на протяжении 13 последовательных пассажей без повышения вирулентности указывает на отсутствие у него реверсибепьности, Сохранение иммунобиологических свойств на протя>кении 20 последовательных пассажей на развивающихся куриных

ЗО

45 эмбрионах 9-10-дневного возраста свидетельствует о стабильности штамма AM.

Для получения штамма вируса инфекционного бронхита с указанными caoAGTBBMM были выделены в птицехозяйствах страны и исследованы полевые штаммы вируса. Из них был отобран один наиболее подходящий для дальнейшей работы по получению вакцинного штамма. В результате последовательных пассажей на развивающихся эмбрионах и в культурах клеток был создан штамм вируса инфекционного бронхита кур

АМ вЂ” сем.Parvoviridae, оод Parvovirus. вид

avian.

Пример, Аттенуированный штамм AM в экспериментальных условиях был сравнен по иммуногенности с тремя вакцинными штаммами подобного типа, полученными из-за рубежа;

Штамм Н-120 серотипа Массачузетс, полученный иэ Франции.

Штамм Необрон-1 серотипа Массачузетс, полученный из Чехословакии;

Штамм Бронховак-1 серотипа Массачузетс, полученный из Венгрии.

В результате проведенных исследований было установлено, что наименьшей реактогенностью обладал отечественный штамм AM. Большей реактогенностью обладали штаммы Необрон-1 и Бронховак-1, При этом серологические исследования показали, что более высокий титр вируснейтрализующих антител к вирусу инфекционного бронхита кур отмечался в сыворотке крови цыплят, иммунизированных вирусом предлагаемого штамма. При этом они были устойчивы к зара>кению вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур как штамма

Массачузетс, полученного из Канады, так и штаммов Пудость и Чапаевский, выделенных в СССР.

Наибольшей иммуногенностью против отечественных штаммов вируса инфекционного бронхита кур обладал аттенуированный штамм AM. Безвредность антигенная активность и иммуногенность указанного штамма в лабораторных условиях была испытана на 2887 цыплятах 10 — 15-дневного возраста.

Испытания вакцинныхштаммов Н-120и

AM вируса инфекционного бронхита кур показали, что 50 -ная иммунизирующая доза штамма Н-120 составила 2630 ЭИДио/0,2 мл, а штамма АМ вЂ” 1050 ЭИДво/0,2 мл, т.е. была в 2,5 раза ниже. что свидетельствует о том, что для получения иммунизирующей дозы

1708839

Составитель И.Тареева

Техред M.Mîðãåíòàë Корректор M.Øàðoøè

Редактор А.Долинич

Заказ 403 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва„Ж-35, Раушская, наб;, 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 штамма AM требуется в 2,5 раза меньше материальных затрат, чем для получения иммунизирующей дозы штамма-прототипа

Н-120, Формула изобретения

Штамм вируса инфекционного бронхита кур ВГНКИ М 65 для приготовления вакцин ных препаратов.