Способ выявления иммунных комплексов в биологической жидкости

 

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для исследования патогенетической роли иммунных комплексов в грудном молоке Целью изобретения является упрощение выявления иммунных комплексов у женщин в период лактации. Цель достигается тем, что в качестве биологической жидкости используют грудное молоко, которое центрифугируют, затем обрабатывают 2%-ной уксусной кислотой, что дает возможность удалить жиры и казеин, существенно влияющие на светорассеивание при фотоколориметрировании, а также за счет последующей преципитации иммунных комплексов в 2%-ном растворе ПЭГ-6000. Предлагаемый способ достаточно информативен , обладает высокой чувствительностью , прост в реализации с/ с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИ4ЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)з 6 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ "::"

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4618423/14 (22) 09.12.88 (46) 30,09,91. Бюл, М 36 (71) Ленинградский педиатрический медицинский институт (72) В.В.Туркин, T.Â. Tîëìàçîâà, С.B.Êà÷àíîва и А.М.Яковлев (53) 615,475 (088.8) (56) Барановский П.В. и Данилишина В.С.

Определение циркулирующих иммунных комплексов методом преципитации в полизтиленгликоле у больных сахарным диабетом.— Лабораторное дело, 1983, М 5, с.

62-63, (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ИММУННЫХ

КОМПЛЕКСОВ В БИОЛОГИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для исследования патогенетической роли иммунных комплексов в грудном молоке.

Целью изобретения является упрощение выявления иммунных комлексов у женщин в период лактации за счет использования в качестве биологической жидкости грудного молока.

Изобретение осуществляется следующим образом.

Грудное молоко предварительно центрифугируют в течение 30 мин при 6000 об/мин, а затем обрабатывают 2%-ной уксусной кислотой с последующей инкубацией смеси 2 ч при температуре 37 С (можно на ночь).. Ы 1681261 Al (57) Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для исследования патогенетической роли иммунных комплексов в грудном молоке. Целью изобретения является упрощение выявления иммунных комплексов у женщин в период лактации. Цель достигается тем, что s качестве биологической жидкости используют грудное молоко, которое центрифугируют, затем обрабатывают 2 -ной уксусной кислотой, что дает возможность удалить жиры и казеин, существенно влияющие на светорассеивание при фотоколориметрировании, а также за счет последующей преципитации иммунных комплексов в 2 -ном растворе ПЭГ-6000.

Предлагаемый способ достаточна информативен, обладает высокой чувствительностью, прост в реализации.

Выпавший осадок удаляют центрифуги- 0 рованием в течение часа при 8000 об/мин, . р

Иммунные комплексы определяют в надосадочной жидкости методом преципитации в растворе ПЭГ-6000, Пример, Больная Г. 33 года. Диагноз: в анамнезе выкидыш, ОРВИ в 22 недели с высокой температурой. У ребенка внутриутробная инфекция.

Грудное молоко (1,5 — 2,0 мл) центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 мин, удаляют жировую пленку и к 1,0 мл надосадочной жидкости добавляют 2%-ный раствор уксусной кислоты в соотношении 1:1.

Полученную смесь выдерживают 2 ч при

37 С, а затем центрифугируют при

8000 об/мин в течение 1 ч. К 0,5 мл надосадочной жидкости добавляют равное ко1681261

Составитель P. Гуменюк

Редактор Т. Пилипенко Техред М,Моргентал Корректор Н. Король

Заказ 3310 Тираж 388 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 л ичество 2 $-ного раствора ПЭ Г (мол.м, 6000). B качестве контроля используют пробы с добавлением в них 0,5 мл 0,87 -ного раствора хлорида натрия. После перемешивания пробы инкубируют при температуре

4 С в течение 2 ч (можно на ночь) и центрифугируют при 6000 об/мин в течение 30 мин, Фотоколометрирование производят на спектрофотометре (СФ-26) при длине волны 380 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см; Полученный результат выражают в условных единицах экстинкции (разница исследуемой и контрольной проб, умноженная на 100). В данном случае он был равен

10 условным единицам.

Предложенным способом было исследовано 49 проб грудного молока. В исследованных пробах содержание иммунных комплексов колебалось в пределах от 0 до

13 условных единиц.

Способ достаточно информативен, обладает высокой чувствительностью и может быть использован для диагностики иммунологических нарушений при различных пато5 логических процессах. Способ не является трудоемким, прост в реализации.

Формула изобретения

Способ выявления иммунных комплексов в биологической жидкости, включающий

10 преципитацию их полиэтиленгликолем и определение с помощью спектрофотометрии, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа у женщин в период лактации, в качестве биологической жидкости

15 используют грудное молоко, при этом перед преципитацией его центрифугируют 30 мин при 6000 o6/мин, добавляют к молочной плазме 2 (,-ный раствор уксусной кислоты в соотношении 1:1, инкубируют 2 ч при 37 С

20 и повторно центрифугируют 1 ч при 8000 об/мин.