Устройство для определения каталазной активности биологических объектов

 

Изобретение относится к анализу ферментных систем биологических объектов, к устройствам для определения каталазной активности преимущественно растений. Цель изобретения - повышение точности и чувствительности анализа Устройство содержит емкость 1, разделенную выступами 5 и 6 на сообщающиеся отсеки для образца 7, для субстрата 8 и для ингибитора 9. градуированную пипетку 3 со столбиком 4 окрашенной жидкости для измерения объема выделившегося кислорода. После размещения в емкости в отсеках 7-9 образца и реакционных компонентов изменяют положение устройства, соединяют таким образом компоненты и после этого замеряют объем кислорода по перемещению столбика 4. Устройство позволяет определять катзлазную активность при малых объемах проб и малом содержании каталэзы в исследуемых объектах 1 ил. сл С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОсудАРстВенныЙ комитет пО изОБРетениям и ОткРытиям

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (Л

Ф

4 ф

Ф (21) 4668673/13 (22) 09.01.89 (46) 07.06.91. Бюл. М 21 (71) Специальная научно-исследовательская лаборатори, по усвоению атмосферного азота живыми организмами при Горьковском государственном университете им. Н.И.Лобачевского (72) С.В.Рунков и Н.А.Козловская (53) 543.866 (088.8) (56) Ермаков А,И. и др. Методы биохимичеcKoI 0 исследования расТеН А. Л.: 1972, с. 44-47, рис. 8. (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОПРЕДЕЛ Е НИЯ КАТАЛАЗНОЙ АКТИВНОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ (57) Изобретение относится к анализу ферментных систем биологических объектов, к

„„ЯХ„„1654744 А1 (я>5 G 01 N 33/48, C 12 М 1/00 устройствам для определения каталазной активности преимущественно растений.

Цель изобретения — повышение точности и чувствительности анализа. Устройство содержит емкость 1, разделенную выступами

5 и б на сообщающиеся отсеки для образца

7, для субстрата 8 и для ингибитора 9, градуированную пипетку 3 со столбиком 4 окрашенной жидкости для.измерения объема выделившегося кислорода. После размещения в емкости в отсеках 7 — 9 образца и реакционных компонентов изменяют положение устройства, соединяют таким образом компоненты и после этого замеряют объем кислорода по перемещению столбика 4. Устройство позволяет определять каталазную активность при малых объемах проб и малом содержании каталазы в исследуемых, объектах, 1 ил.

1654744

Изобретение относится к анализу ферментативных систем биологических объектов, к устройствам для определения их каталаэной активности и может быть использовано при исследовании микроорганизмов, животных тканей, клеток и экстрактов растений.

Целью изобретения является повышение точности и чувствительности анализа.

На чертеже изображено устройство, вид сбоку.

Устройство для определения каталазнои активности биологических объектов, преимущественно растений, содержит цилиндрическую емкость 1 с горловиной 2 для загрузки исследуемого образца, реакционных компонентов и выхода газа и сообщенную с емкостью градуированную пипетку 3 с размещенным в ней столбиком 4 окрашенной жидкости и служащую для замера объема выделевшегося из, образца кислорода.

Емкость 1 имеет в своей стенке выступы 5 и

6. Выступ 5 имеет форму кольца в продольном сечении, а выступ б — форму полукруга.

Выступы 5 и 6 разделяют емкость 1 на три сообщающихся отсека 7, 8 и 9, первый из которых (7) служит для размещения исслдуемого образца, второй (8) — для размещения субстрата и третий (9) — для размещения ингибитора каталазы. Отсеки 7 — 9 обеспечивают также смешивание всех указанных компонентов при изменении положения емкости 1. Пиаетка 3 укреплена на горловине

2 посредством шлифового соединения 10.по оси емкости 1. Кроме того, в шлифе 10 пипетки 3 расположен каплеуловитель 11, а в горловине 2 и шлифе 10 выполнены соосные отверстия 12 для сообщения внутреннего обьема емкости 1 с внешней средой, Устройство работает следующим образом.

Перед началом работы емкость 1 размещают горизонтально и в пипетку 3 набирают каплю окрашенной жидкости, Затем емкость 1 со снятой пипеткой 3 устанавливают вертикальна и на ее дно, в отсек 7 помещают исследуемый образец (например, вытяжку из растения) и буферный раствор. После этого емкость 1 переводят в горизонтальное положение и размещают так, что полукруглый выступ б находится внизу, а затем в отсек 8 вносят субстрат (раствор пероксида водорода). В отсек 9 заливают раствор цианида калия, служащий ингибитором каталазы.

При сохранении горизонтального положения емкости 1 на горловине 2 укрепляют пипетку 3 с размещенным в ней столбиком

4 окрашенной жидкости. Если столбик 4 смещается к острому концу пипетки 3, то

55 совмещают отверстия 12 и приводят его в исходное положение как можно ближе к шлифу 10 небольшим наклоном всего устройства, После всех этих операций устройство готово для проведения анализа. Определение каталазной активности производят следующим образом. Записывают показания положения столбика 4 в пипетке 3 и поворотом последней перекрывают отверстия 12, Затем помещают устройство. горизонтально в держатель ротора. На роторе можно разместить несколько устройств и тем самым осуществить одновременный анализ нескольких повтЬрных проб или анализ различных биообьектов. Включают ротор и при скорости 9-10 об/мин вращают устройство в течение 1 — 5 мин, при этом исследуемый ебразец и субстрат смешиваются и происходит ферментативная реакция. В процессе реакции происходит выделение кислорода, давление которого перемещает столбик 4 в пипетке 3. По истечении указанного времени устройство переводят в вертикальное положение, при этом ингибитор из отсека 9 переливается в отсек 7 и реакция прекращается.

После этого считывают показания положения столбика 4 в пипетке 3 и, вычитая иэ них исходные показания, вычисляют. объем выделившегося кислорода, на основе которого рассчитывают активность каталазы, Конструктивные особенности устройства, а именно наличие в одной емкости 1 всех отсеков 7 — 9 для размещения реагентов, жесткое крепление измерительной пипетки 3. а также обеспечивающиеся этими особенностями возможности быстрого проведения остановки реакции при малых объемах образца и реагентов позволяют повысить точность определения активности каталаэы и чувствител ьность — нижнего и редела оп ределения активности, Формула изобретения

Устройство для определения каталазной активности биологических обьектов, преимущественно растений, содержащее цилиндрическую емкость с горловиной для загрузки исследуемого образца. субстрата и ингибитора и выхода газа и сообщенную с емкостью градуированную пипетку для замера объема выделившегося из образца кислорода, о т л и ч а ю щ е е с я тем; что, с целью повышения точности и чувствительности анализа, стенка емкости имеет выступы для разделения емкости на три сообщающихся отсека, первый из которых, ближний к горловине, служит для размещения ингибитора каталазы, второй за ним—

1654744

Составитель Н.Осипов

Техред М.Моргентал . Корректор М,Шароши

Редактор И.Дербак

Заказ 1948 Тираж 418 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 для субстрата, и третий — для исследуемого образца, при этом пипетка укреплена на горловине посредством шлифового соединения по оси емкости,