Способ отбора форм озимой ржи, устойчивых к предуборочному прорастанию
Изобретение относится к биотехнологии и касается биохимического анализа белков растений. Возможно применение в сельском хозяйстве при селекции на повышение качества зерна. Целью изобретения является повышение точности анализа и ускорение отбора. Способ состоит в том, что анализируют спектр ингибиторов протеаз, полученный в результате диск-электрофореза белков ржи, при этом отбирают формы, содержащие компоненты с максимальной выраженностью, шириной и минимальной подвижностью для данной популяции. 1 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (sl)s А 01 Н 1/04
ГОСУДАР СТВ Е ННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
)> (21)4400339/13 (22)30.03.88 (46)23,05.91..Бюл. М 19 (71)Белорусский научно-исследовательский институт земледелия (72) Г.А. В асилевская, В.А,ла в руко вич и
И.Я.Щеглов (53)631.522:58.083.5(088) (56)Конарев В.Г, Белки пшениц — M., Колос, 1980. (54)СПОСОБ ОТБОРА ФОРМ ОЗИМОЙ
РЖИ, УСТОЙЧИВЫХ К ПРЕДУБОРОЧНОМУ ПРОРАСТАНИЮ
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к биохимическим анализам белков растений, и может быть использовано в селекции на повышение качества зерна, Рожь обладает наибольшей из всех зерновых культур склонностью к предуборочному прорастанию на корню. Прорастание зерна в колесе снижает не только технологические, но и посевные и урожайные свойства, приводя в отдельные годы в 50 -ной потере урожая озимой ржи, Цель изобретения — повышение точности анализа и ускорение отбора.
Способ состоит в том, что отбор ведут, оценивая активность ингибиторов протеаэ, участвующих в инактивировании группы амилазного комплекса, т.е. оценивая степень ингибирования "амилаэы прорастания", что позволяет вести целенаправленный отбор высокоустойчи„, Я „„1650049 А1 (57)Изобретение относится к биотехнологии и касается биохимического анализа белков растений. Возможно применение в сельском хозяйстве при селекции на повышение качества зерна. Целью изобретения является повышение точности анализа и ускорение отбора, Способ состоит в том, что анализируют спектр ингибиторов протеаз, полученный в результате диск-электрофореза белков ржи, при этом отбирают формы, содержащие компоненты с максимальной выраженностью, шириной и минимальной подвижностью для данной популяции. 1 табл. вых форм с генетически обусловленной устойчивостью к предуборочному прорастанию.
Способ включает экстракцию белков, их диск-электрофорез с получением белкового спектра, последующий анализ на содержание ингибиторов протеаз, оценку компонентов, участвующих в ингибировании амилаз прорастания и отбор форм, содержащих компоненты с максимальной выраженностью, шириной и минимальной подвижностью для данной популяции.
Пример 1, Зерновки каждого образца по 50 шт раздавливают, заливают трис-глициновым буфером рН 8,3, оставляют на холоде на 3 ч„ перед электрофореэом добавляют сахарозу до 40 -ной концентрации, электрофореэ проводят в пластинах
0AAI 8,5%, 1,5-2 ч, Белки окрашивают амидошварцем в смеси с кумаси голубым.
Приготовление реактивов геля:
Ащ рН 8,9
1650049
1h.ÍO 48 мл трис 36,6 г тэмэд 0,23 мл
Вода димирализованная До 200 мл
Бщ
Акзог
МБА 0,8 r
Вода димирализованная До 200 мл Вщ
ПСА 0,56 г .Вода До 100 мл
HCI 48 мл трис 6 г тэмэд 0,46 мл
Вода P,о 100 мл
Дщ
АК10г
МБА 2,5 r
Вода До 100 мл
Ещ
Сахароза 40 г
Вода До 100 мл
Рф
Рибофлавин 4 мг
Вода До 100 мл
Нижний гель: 2 объема Ащ, 4 объема
Бщ, 1 объем Вщ, Верхний гель: 1 объем Гщ, 3 объема,Дщ, 1 объем Ещ, 1 объем Рф,.
Отбирают образцы с преобладанием генотипов с достаточной выраженностью, шириной и низкой подвижностью фракций верхней части спектра.
Изучены 32 образца озимой ржи по подвижности компонентов в верхней части спектра, их выраженности и ширины, Отобраны 2 образца (Ганна и Жодино) с подвижностью 14, 13, выраженностью 5 баллов, шириной 5 мм и высеяны в поле.
Проведен трехкратный пересев и оценка потомства в сравнении с неотобранными образцами, данные приведены в таблице.
Из таблицы видно, что образцы, выделенные по оценке показателей по предлагаемому способу, в провокационных условиях на
8-е сут проращивания не имеют проросших зерен (1985-1986 г) либо имеют самый низкий процент таких зерен (1987 г). При оцен5 ке образцов по известным способам точность недостаточная: активность компонентов амилазы прорастания непостоянная по годам или отсутствует, например у образца Таловская в 1985 г 5мм, в 1986 r 3 мм, в f0 t987 r отсутствует, Пример 2. Берут семьи сорта озимой пшеницы ржи Крупнозерная по 15 зерен каждой семьи. Электрофорез полученного материала и анализ электрофореграмм про15 водят аналогично примеру 1. Отобраны семьи с преобладанием генотипов с достаточной выраженностью, шириной и низкой подвижностью фракций ингибиторов протеаэ в верхней части спектра.
20 Предлагаемый способ отбора форм озимой ржи устойчивых к предуборочному прорастанию, позволяет вести определение потенциальной устойчивости к предуборочному прорастанию свежеубранного и поко25 ящегося зерна, целенаправленно отбирать высокоустойчивые к предуборочному прорастанию генотипов, повышает точность анализа, позволяет отбирать формы с генетически обусловленной устойчивостью.
Формула изобретения
Способ отбора форм озимой ржи, устойчивых к предуборочному прорастанию, включающий экстракцию белков зерна с по35 следующим диск-электрофорезом и отбор устойчивых форм на основании полученного белкового спектра, отличающийся тем, что, с целью повышеч ия точности анализа и ускорения отбора, в полученном бел40 ковом спектре анализируют компоненты, легкорастворимых белков в зоне, соответствующей амилазам прорастания, и отбор устойчивых форм проводят по максимальной выраженности, ширине и минимальной по45 движности анализируемых компонентов.
1650049
Базовый способ
Образец
Прототип
Активность компонентов амилазы прорастания, мм
Количество зерен. проросших на 8-е сут проращивания в
fl Овока ионных ловиях, 1985
1986
°
1987
1985
1986
1987
4
П р и м е ч а н и е. " -" обозначает отсутствие указанного признака.
Составитель В, Демкин
Техред М,Моргентал Корректор С. Черни
Редактор А. Мотыль
Заказ 1558 Тираж 371 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101
Плуто
Таиовская белорусская 23
ВОСХОД 1
Чулпан
Темпо
Купалинка
МуРО
Ганна
Жо ино
26
39
18
38
28
76
26
52.9
46
21
42
2
2,5 5
2
1
2,5
4
3
2,5
2
2
0,1
0,4 движость мпонтов ныб
17
22
18
16
13