Способ оценки устойчивости сортов картофеля к бактериальной гнили erwinia саrотоvоrа var. атrоsертiса

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений. Цель изобретения ускорение и повышение точности оценки Для оценки устойчивости сортов картофеля к бактериальной гнили отбирают внешне здоровые клубни, дезинфицируют, разрезают пополам, делают лунки, в которые помещают 0 5 мл бактериальной суспензии 1-2 суточной культуры возбудителя болезни в концентрации 100 мл клеток в 1 мл Для инокуляции используют высоковирулентные штаммы Через 20 ч после инокуляции производят извлечение фитоалексинов четырехкратной экстракцией гексаном и подачей их суммарного количества Образцы, содержащие выше 50 мкг/мл фитоалексинов , относят к высокоустойчивым, 40- 50 мкг/мл - к восприимчивым, а среднеустойчивые сорта по данному показателю занимают промежуточное положение 1 з п. ф-лы, 1 табл. (Л С

. СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5П5 А 01 Н 1/04

ГОСУДАРСТВЕ ННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4453311/13 (22) 30.06.88 (46) 07.04.91. Бюл. М 13 (71) Белорусский научно-исследовательский институт защиты растений (72) О.В. Шуцкая, Л.Е, Загурская и Г.M. Середа (53) 631.52(088.8) (56) Методы оценки картофеля на устойчивость к клубневым гнилям, -- Минск, 1985. с.

9-12. (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ УСТОЙЧИВОСТИ

СОРТОВ КАРТОФЕЛЯ К БАКТЕРИАЛЬНОЙ

ГНИЛИ ERWINIA CAROTOVORA VAR.

ATROSЕ PTl СА (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений. Цель изобретения

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции растений.

Цель изобретения — ускорение и повышение точности оценки, Способ осуществляют следующим образом, Отбирают по пять внешне здоровых, средних по размеру клубней каждого образца, хорошо моют в проточной воде. Затем клубни стерилизуют любым из известных способов — бактерицидной лампой, обработкой спиртом и др. Анализ на содержание фитоалексинов производят известным способом. После дезинфекции клубни разрезают вдоль пополам.

Половинки пяти клубней размещают на дно кристаллиэатора. На свежераэрезан... Ж„„1639531 Al ускорение и повышение точности оценки.

Для оценки устойчивости сортов картофеля к бактериальной гнили отбирают внешне здоровые клубни, деэинфицируют, разрезают пополам, делают лунки, в которые помещают 0,5 мл бактериальной суспензии

1-2 суточной культуры возбудителя болезни в концентрации 100 мл клеток в 1 мл, Для инокуля ции используют высоковирулентные штаммы. Через 20 ч после инокуляции производят извлечение фитоалексинов четырехкратной экстракцией гексаном и подачей их суммарного количества. Образцы, содержащие выше 50 мкг/мл фитоалексинов, относят к высокоустойчивым, 4050 мкг/мл — к восприимчивым, а среднеустойчивые сорта по данному показателю занимают промежуточное положение. 1 з.п. ф-лы, 1 табл. ную поверхность одной половинки каждого клубня ложечкой, обычно используемой для индексации, с диаметром 12 мм вырезают по 2 лунки, На соответствующих других половинках клубней вырезают по 4 лунки на одинаковом расстоянии от перидермы и оставляют на эалечивание в открытом кристалиэаторе на

15 мин.

Таким же образом подготавливают лунки второго образца в другом кристаллизаторе, Через 15 мин в каждую лунку пипеткой вводят по 0,5 мл бактериальной суспензии

1 — 2 суточной культуры возбудителя болезни в концентрации 100 мл бактериальных клеток в 1 мл,.Для инокуляции используют высоковирулентный штамм микроорганизмов.

1639531

Соде жание, мкг/мл

Известный способ

Степень устойчивости сорта любимина

9-ти бал. шкала

5-бал. шка- ла сумма фитоалексинов ришитина

18,0

56,7

Орбита

Высокоустойчивый

Устойчивый

Среднеустойчив

29,2

24,4

45,6

38,5

17,3

16,7

11,6

10,6

30,3

28,8

24,1

22,6

13,0 t2,1

12,5

12,0

Пригожий

Ласунок

Темп

Лошицкий

Детскосельский

Белорусскйй ранний

Восприимчивый

19,1

8,3

7,0

Кристаллизатор накрывают стеклом с влажной стерильной фильтровальной бумагой (8 слоев) и оставляют при 23 — 25 C. Через 20 ч после инокуляции содержимое лунок выгребают шпателем в мерный стаканчик, замеряют обьем, который переносят в колбу с притертой пробкой, смывая остаток 2-3 мл дистиллированной воды, Образцы следует брать в той же последовательности, в какой шло заражение, и с тем же интервалом времени, т.е. через каждые 15 мин.

Для определения ришитина используют содержимое 10 лунок из половинок 5-ти клубней, для любимина — 20 лунок из других половинок. Фитоалексины извлекают 4кратной экстракцией гексаном.

Для ришитина первую экстракцию осуществляют 70 мл гексана, три последующие— по 35 мл, для любимина первая экстракция— по 140 мл, три остальные — по 70 мл, Гексановые экстракты выпаривают в чашках в вытяжном шкафу. Для определения ришитина в чашки добавляют 6 мл концентрированной серной кивлоты, после чего возникает красно-малиновое окрашивание, Оптическую плотность растворов измеряют на ФЗКе с фильтром М 5.

Для определения любимина к сухому остатку приливают 6 мл реактива Эрлиха, Через 90 мин пробы приобретают синезеленую окраску, оптическую плотность которой. измеряют на ФЭКе с фильтром N 8.

Количество фитоалексинов рассчитывают по калибровочным кривым, построенным по чистым ришитину и любимину.

Сорта с содержанием фитоалексинов более 50 мкг/мл относят к высокоустойчивым, от 40 до 50 мкгlмл, — к устойчивым, 20 мкг/мл и менее — к восприимчивым, а сред5 Ъеустойчивые сорта занимают промежуточное положение, Сравнительная оценка устойчивости районированных сортов картофеля к бактериальной гнили (штамм 662) по содержанию

10 фитоалексинов и известным способом приведена в таблице.

Способ позволяет повысить точность и ускорить процесс оценки картофеля, Формула изобретения

15 1, Способ оценки устойчивости сортов картофеля к бактериальной гнили ЕпММа

carotavora айаг. atroseptica, включающий создание лунок и искусственное заражение клубней высоковирулентным штаммом воз20 будителя инфекций в лунку, измерение биологического показателя, по значению которого оценивают устойчивость, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью ускорения и повышения точности оценки, в качестве би25 ологического показателя используют суммарное содержание фитоалексинов, измерение проводят, начиная с 20 ч после заражения, при этом сорта с суммарным содержанием фитоалексинов более 50 мкг/мл

30 относят к высокоустойчивым, 40 — 50 мкг/мл— к устойчивым, менее 20 мкг/мл — к восприимчивым, а среднеустойчивые сорта по данному показателю занимают промежуточное положение.

35 2. Способпоп.1,отличающийся тем, что заражение проводят через 15 мин после создания лунок.