Способ определения индивидуальной чувствительности больных ревматоидным артритом к иммунодепрессивным препаратам

 

Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии. Цель изобретения - повышение точности способа. Цель достигается тем, что перед назначением лечения исследуют в условиях культуры чувствительность лимфоцитов с Ла-подобными моноформными антигенами к исследуемому препарату и определяют чувствительность по степени наибольшего снижения уровня ИКО-1 положительных клеток. Способ существенно повышает эффективность лечения ревматоидного артрита и снижает число побочных осложнений.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

ВВ й.2 Ю З.Ю

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И О 1НРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4369446/38-14 (22) 28.01.88 (46) .15.10.90. Бюл..11 38 (71) Семипалатинский государственный медицинский институт (72) АД1. Сейсенбаев (53) 615.375 (088. 8) (56) Насонова В.А., Сигидин Я.А.

Патогеническая терапия ревматических заболеваний. - М.: Медицина, 1985.

Изобретение относится к медицине, в частности к ревматологии, и может быть использовано для лечения ревматоидного артрита.

Цель изобретения — повышение точ ности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Периферические лимфоциты больного выделяют на градиенте плотности фиколл-верографин, ресуспендируют в

2,0 мл среды 99 с 10% сыворотки КРС, помешают в центрифужные пробирки по

0,5 мп, затем в одну из пробирок добавляют 0,1 мл раствора Хенкса, „„SU„„1599776 А 1

2 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ БОЛЬНЫХ РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ К ИММУНОДЕПРЕССИВНЫМ

ПРЕПАРАТАМ (57) Изобретение относится к медици не,а именно к ревматологии.Цель иэоб1 ретения — повышение точности способа.

Цель достигается тем, что перед назначением лечения исследуют в условиях культуры чувствительность лимфоцитов с la-подобными моноформными антигенами к исследуемому препарату и определяют чувствительность по степени наибольшего снижения уровня ИКО-1 положительных клеток. Способ существенно повышает эффективность лечения ревматоидноф го артрита и снижает число побочных осложнений. Способ может быть использован в ревматологии.

С:, СГ в другие по 0,1 мп исследуемых препа- р ратов в разведении 0,005 мг/мп, инку- в) бируют при 37 С в течение 1 ч, однократно промывают средой 199, к осадку добавляют 50 мкл моноклональных антител ИК0-1, инкубируют 30 мин при 37 С> добавляют люминесцирующую сыворотку против мышиных глобулинов, инкубируют 30 мин при 4 С, клетки отмывают 3 раза средой 199, помещают, яа предметное стекло, отсасывают среду, консервируют 0%-ным глицерином на физиологическом растворе, закрывают клетки покровным стеклом, учитывают процент светящихся клеток на

3 1599776

4 флюоресцентном микроскоп пе при увелпч»нии объектива s.90 õ100, окуляра 2,5-10.

В препарате просматривают 200 клеток, i

Устанавливают индекс чувствительности для больного путем разделения

ИКО-1 положительных клеток в опыте на количество ИКО-1 положительных клеток в контроле. Выбирают для,лечения тот препарат, который определяет lp индекс чувствительности, равный 2 и более единицам.

Пример 1. Больная Д, 43 года.

Диагноз: ревматоидный агтрит, серопоэитивный, активность II-ЕЕЕ степени, стадия III НФС II. При поступлении жалобы на -сильные боли в суставах, выраженную скованность, непроходящую к вечеру, припухлость и ограничение в проксимальных межфапанговых, локте- 2р вых, плечевых, голеностопных суставах. Страдает ревматоидным артритом в течение 8 лет,лечилась нестероидны" .ми противоревматическими. средствами. В последний год принимала предниэолон 25 курсами, прекратила за 1,5 месяца до поступления в клинику. При поступлении получает 3 капсулы остофена.

У больной из периферической крови . выделены лимфоциты на градиенте плот- 3р ности фиколл-верографин, ресуспенди" рованы в 2,0 мл среды 199, перенесены в центрифужные пробирки по 0,5 мл затем в одну иэ пробирок добавлен

0,1 мл раствора Хенкса, в другую

0,1 мл метотрексата, в третью — 0,1 мл проспидина, в червертую — 0,1 мп циклофосфана в разведении 0,005 мг/мл), Пробирки инкубировали при 37 С в течение lч, обработанные клетки отмывали 4р однократно средой 199, к осадку добавляли 50 мкл моноклональных антител

ИК0-1, инкубировали 30 мин при 37 С добавляли,люминесцирующую сыворотку против мышиных глобулинов, отмывали

3 раза средой 199, клетки помещали на предметное стекло (20 мин), отсасывали среду, консервировали 50%-ным глицерином на физиологическом растворе, учитывали процент светящихся кле- 5О ток на флюоресцентном микроскопе при .увеличении объектива х 90х100, окуля"ра 2,5-10. В препарате просматрива- ли 200 клеток. Установлено, что в контроле количество клеток, содержа.щих 1а-подобные моноформные антигены составило 32%. .", опыте с метотрек0 сатом — 30%, в опыте с проспидином—

15%, в опыте с циклофосфаном — 27...

Индекс чувствительности к метотрексату, проспидину и циклофосфану соответственно l,l; 2,1; 1,2: Следовательно препаратом выбора у этой больной является просйидин,который и был назначен по 0,1 ежедневно, внутримышечно.

Клиническую эффективность препарата оценивали по стандартным критериям оценки противоревматических препаратов.

Через 7 дней после начала лече" ния состояние больного стало существенно улучшаться, уменьшились боли в суставах и утренняя скованность, больная стала активнее. Спустя 12 дней в связи с прогрессирующим улучшением инъекции стали делать через

3 дня, Всего на курс больная получила 1,8 г препарата. При выписке состояние больной вполне удовлетворительное. Параллельно происходило улучшение и лабораторных показателей.

Не отмечено угнетающего действия препарата на картину периферической крови. Расстройств со стороны желудочно-кишечного тракта, кожного покрова также не отмечалось.

Результаты слепого испытания способа, который состоял в том, что у

9 больных ревматоидным артритом определяли индекс чувствительности лимфоцитов с 1а-подобными антигенами на иммунодепрессивпые препараты, заключались в следующем. Иммунодепрессивные препараты назначали парентерально в определенном порядке (первому больному — метотрексат, второму — проспидин, третьему — циклофосфан, четвертому— метотрексат и т.д.). Через месяц сопоставляли результаты к препаратам.

Результаты лечения выражали в индексе эффективности препарата.

Установлено, что иэ 9 больных эффект отмечен у 5. Лимфоциты этих больных были чувствительны именно к тому препарату, который был назначен, В остальных 4 случаях эффект не выявлен.

У этих больных не отмечена чувствительность лимфоцитов с 1а-подобными моноформными антигенами к препарату, которую они получали.

Таким образом, предложенный способ пригоден для индивидуального под; бора иммунодепрессивного препарата в лечении ревматоидного артрита и позволяет снизить вероятность возникно" вения побочных действий препарата. рату.

Составитель П. Бонарцев

Редактор Л. Пчолинская Техред, М. Ходанич Корректор О.Ципле

Заказ 3140 Тираж 508 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r Ужгород, ул. Гагарина,101

5 l55

Формула изобретения

Способ определения индивидуальной чувствительности больных ревматоидным артритом к иммунодепрессивным препаратам путем исследования лимфоцитов периферической крови, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью

9776 повьппения точности пособа, лим@оциты культивируют в присутствии иммуно депрессантов и определяют количест5 во ИКО-1 положительных клеток и при снижении их количества по сравнению с контролем без иммунодепрессантов определяют чувствительность к препа