Средство для обездвиживания мирацидиев трематод

 

Изобретение касается биологических исследований и может быть использовано при изучении возбудителей паразитарных болезней. Целью изобретения является расширение арсенала средств, обеспечивающих быстрое и полное обездвиживание мирацидиев трематод при длительном сохранении их морфологии. В качестве средства для обездвиживания трематод используют ацетилсалициловую кислоту концентрацией раствора 0,5-0,05%, при которой обездвиживание трематод наступает мгновенно с сохранностью свойственной им морфологии до 24 ч.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4496270/30-15 (22) 21 . ) О. 88 (46) 23.08,90. Бюл. 1! 31 (7 1) Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР (72) В.В. Горчаков (53) 6)9:616.995.!(088.8) (56) 1 .. Машковский Y..Ë. Лекарственные средства.-М.: Медицина, 1986, с.190.

2. Авторское свидетельство СССР

)I 377146, кл. А 01 Е 1/02, 1973. (54) СРЕДСТВО ДЛЯ ОБЕЗДВИЖИВАНИЯ

МИРАЦИДИЕВ ТРЕМАТОД

Изобретение относится к биологическим исследованиям и может быть использовано для изучения возбудителей параэитных болезней.

Известно применение в качестве средств для обездвиживания мирацидиев трематод антибиотиков, в частности бенэилпенициллина (калиевая соль) или стрептомицина сульфата (IJ и (2).

Однако известные средства не обеспечивают быстрого и полного обездвиживания при длительном сохранении морФологии мирацидиев трематод и не позволяют создавать зоны обездвиживания, что обусловлено быстрорастворимостью и оптическими свойствами.

Кель изобретения — расширение арсенала средств, обеспечивающих быстрое и полное обеэдвиживание ми" рацидиев трематод при длительном сохранении их морфологии.

„„SU„1586654 А 1 (gI)g А 01 N 1/02, A 61 В 10/00

2 (57) Изобретение касается биологич ских исследований и может быть ис пользовано при изучении возбудителей паразитарных болезней. Белью изобретения является расширение арсенала ,средств, обеспечивающих быстрое и полное обеэдвиживание мирацидиев трематод при длительном сохранении их морфологии. В качестве средства для обеэдвиживания трематод используют ацетилсалициловую кислОту концентрацией раствора 0,5-0,05K,ïðê кото рой обеэдвиживание трематод наступа. т мгновенно с сохранностью свойственной им морфологии до 24 ч.

Поставленная цель достигается применением в качестве средства для обеэдвиживания мирацидиев трематод ацетилсалициловой ки слоты.

Ацетилсалициловая кислота относится к группе производных салициловой кислоты, представляет собой белые мелкие игольчатые кристаллы или легкий кристаллический порошок. Мало растворяется в воде, легко — в спирте, растворах едких и углекислых щелочей. Раствор прозрачен и устой чив, не имеет запаха, нетоксичен и неядовит.

Ацетилсалициловая кислота широко применяется в качестве жаропонижаю- щего, болеутоляющего (головная боль}, противовоспалительного и противоревматического средства.

Пример I. Проводят испытание способа обездвиживания мирацидиев

15866 трематод, заключающегося в том, что с целью сохранения их морфологического строения, в среду,. содержашую мирапидии, вносят ацетилсалициловую 5 кислоту в виде 0,5-0,0057.-ного водного раствора в соотношении 1:1, причем используют чистую культуру мирацидиев трематод Fasciola hepatica u Fasciola

gigantica полученных путем культи- 10 вирования яиц соответствующих видов гельминтов, использовав в общем количестве около 6500 экземпляров личинок трематод обоих видов.

Мирацидиев в количестве 6-11 экз. в капле воды помещают на предметное стекло. Таких капель делают три. В ,каждой иэ двух капель воды с личин ками трематод добавляют одну каплю

1,0, 0 5, 0 05, 0 005 и 0,001 -ного 2О на дистиллированной воде раствора ацетилсалициловой кислоты. Третья капля с мирацидиями контрольная и к ней добавляют одну каплю только дистиллированной воды. Концентрации 1 и 0,001 -ного раствора препарата не дают желаемого эффекта вследствие изменения морфологии личинок (17) или продолжительного до 16 мин периоца ,времени, необходимого для обездвижи- ЗО ,вапия мирацидиев трематод (0,0017). !

:Полол;.ительные результаты получают

,при взаимодействии 0,5-0,057-ного

"раствора ацетилсалициловой кислоты— наряду с сохранением морфологии, ми- 35 рацидии трематод почти моментально теряют подвижность вследствие прекращения мерцания ресничек,, покрывающих тело мирацидия и обеспечивающих их передвижение. Под действием 0,0057- 40 ного раствора препарата обездвиживание происходит через 1 мин. В контрольной среде в течение срока наблюдения (до 30 мин) все мирацидии сохраняют свое движение. Опыт с каждым 45 видом личинок гельминтов проводят пятикратно и получают однозначные результаты. При добавлении 5-10 капель воды восстанавливается мерцание ресничек и передвижение мирацидиев. При 50 микроскопическом наблюдении отмечено, что в растворе ацетилсалициловой кислоты жизнеспособность мирацидиев трематод сохраняется до 30-45 мин.

В две чашки Петри помещают по 55

500 экз. мирациди=.в. В первую чашку

54 (опытную) вносят 5 капель 0,5% или

0 057-ного на дистиллированной воде растворе ацетилсалициловой кислоты, в контрольную — пять капель только дистиллированной воды. В местах внесения раствора ацетилсалициловой кислоты в среду с мирапидиями в последней создаются не распадавшиеся (в связи со,слабой растворимостью) в

; течение 15-25 мин зоны повышенной концентрации препарата. При наблюде нии под бинокулярным стереоскопическим микроскопом (М$ -130) отмечается, что при передвижении по чашке

Петри мирацидии попадают в такие места внесения препарата и почти мгновенно теряют подвижность и опускаются тут же на дно.

Испытания с различными видами личинок трематод повторяют дважды и во всех случаях в зонах внесения ацетилсалициловой кислоты наблюдается обездвиживание личинок трематод. В контрольных чашках Петри в течение срока наблюдения (3-4 ч) все мирацидии трематод сохраняют свое движение.

На основании микроскопических и гельминтолярвоскопических исследований отмечено, что под воздействием ацетилсалициловой кислоты при концентрации раствора 0,57 и ниже мирацидии трематод сохраняют свойственную им морфологию и при температурах 15о

20 С остаются вполне пригодными для

1 микроскопического изучения до 24 ч, а при температурах 3,0-4,5 С этот срок увеличивается до 48-72 ч.

Предлагаемый способ обладает выраженным обеэдвиживающим действием по отношению к миграциям трематод с сохранением на значительное время морфологии объекта, не опасен для исследователя, не требует дорогостоящих средств и аппаратуры, потому его можно рекомендова.ть для широкого применения в биологических исследованиях возбудителей паразитных болезней. формулаизобретения

Применение ацетилсалициловой кислоты в качестве средства дгя обездвиживания мирацидиев трематод.