Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза
Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к диагностике туберкулеза. Цель изобретения - повышение выхода биомассы микобактерий. Для приготовления среды в 100 мл дистилированной воды подогревают до 50°С и последовательно растворяют железоаммиачные квасцы 0,004 - 0,006 г, сернокислый магний 0,04 - 0,06 г, лимоннокислый однозамещенный натрий или натрий гидроцитрат 1,5-водный 0,08 - 0,15 г, фосфорнокислый однозамещенный калий 0,4 - 0,9 г. Полученный раствор подогревают до 90°С, растворяют 2-аминоглютаровую кислоту 0,4 - 1 г, встряхивают, добавляют глицерин 2 - 3,5 г. После охлаждения раствора до комнатной температуры проводят коррекцию PH среды путем добавления 5%-ного раствора едкого натрия до PH 7, затем добавляют адениловую кислоту 0,006 - 0,05 г. Среду автоклавируют при 0,5 атм 30 мин. Среду используют как основу для приготовления специальных сред. Она повышает выход сухой биомассы микобактерий в 1,8 - 2,2 раза по сравнению со средой Школьниковой.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПИГИ ЛИН
„„SU„„1555358 (51)5 С 12 N l/20//(С 12 N 1/20, С 12 R 1:32) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н А ВТОРСНОЬУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
flO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР! (21) 4439199/30-13 (22) 13.06.88 (46) 07,04.90. Бюл. Ф 1.3 (71) Молдавский научно-исследовательский институт туберкулеза (72) Т.Т.Попеску (53) 576.8.093(088.8) (56) Методические указания по технике и методике бактериологической диагностики туберкулеза. — Якутск, 1987, с. 13. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к. диагностике туберкулеза,.Цель изобретения — повьппение выхода биомассы микобактерий. Для приготовления среды в 100 мл дистиллированной воды по-. о догревают до SO С и последовательИзобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к диагностике туберкулеза, Цель изобретения — повьппение выхода биомассы микобактерий, Среду готовят следующим образом, Дистиллированную воду подогревают до 50 С н последовательно растворяо ют: железоаммиачные квасцы, магний сернокислый, натрий лимоннокислый одноэамещенный или натрий гидроцитрат
1,5-водный, калий фосфорнокислый однозамещенный. Полученный раствор по;. догревают до 90 С, растворяют 2-амио ноглютаровую кислоту (глютаминовую . кислоту) встряхивают, добавляют гли
2 но растворяют железоаммиачные квасцы
0,004-0,006 r сернокислый магний
0,04-0,06 г, лимоннокислый одноэамещенный натрий или натрий гидроцитрат 1,5-водный 0,08-0,15 г, фосфорнокислый однозамещенный калий 0,4-0,9 r.
Полученный раствор подогревают до
90 С, растворяют 2-аминоглютаровую кислоту 0,4-1 г, встряхивают, добавляют глицерин 2-3 ° 5 г. После охлаждения раствора до комнатной температуры проводят коррекцию рН среды путем добавления 5%-ного раствора едкого натрия до рН 7, затем дооавляют адениловую кислоту 0,006-0,05 г.
Среду автоклавируют при 0,5 атм
30 мин. Среду используют как основу для приготовления специальных сред.
Она повьппает выход сухой биомассы микобактерий в 1 8-2,2 раза по сравнению со средой Школьниковой. церин, После охлаждения раствора до ру комнатной температуры производят С4 коррекцию рН среды путем добавления р
5%-ного раствора едкого .натрия до рН 7,0, после чего добавляют адениловую кислоту (MAII), Среду автоклавируют при 0 5"атм в течение 30 мин, Приготовленную среду используют в микробиологической диагностике туберкулеза, используют как основу для приготовления специальных сред для выявленияформ микобактерий туберкулеза, а также для получения большой биомассы микроорганизмов при производстве вакций
БЦЖ и туберкулина.
1555358
Пример 1, Готовят следующие навески компонентов, мас.Ж:
Железоаммиачные
0,004
0,08
0,4
2 0
0,006
0 ° 1
0,9 квасцы
Магний сернокислый 0,04
Натрий лимоннокис- . лый однозамещенный или натрий гидроцитрат 1,5-водный
Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,4.
2-Аминоглютаровая кислота
Глицерин
Адениловая кислота Вода дистиллированная Остальное
Выход биомассы при выращивании на среде данного состава: штамм Н-37
РУ-253 мг, штамм БЦЖ 191 мг ° дикого штамма 221. иг.
Пример 2. Готовят навески компонентов, мас. Й:
Железоаммиачные квасцы 0 005
Магний сернокислый 0,05
Натрий лимоннокислый однозамещенный или натрий гидроцитрат
1,5-водный
Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,6
2-Аминоглютаровая кислота 0,7
Глицерин 3 0
Адениловая кислота 0,01
Вода Дистиллированная Остальное
Выход биомассы при выращивании на среде данного состава: штамм Н37 РУ
288 мг, штамм БЦЖ 208 мг, дикого штамма — 232 мг (по сухой массе).
Пример 3. Готовят навески компонентов, мас.7.:
Железоаммиачные квасцы 0,006
Магний сернокислый 0 06
Натрий лимоннокислый однозамещенный или натрий гидроцитрат 1;5-водный 0,15
Калий фосфорнокислый однозамещенный
0,004-0,006
0,04-0,06 . квасцы
Магний сернокислый
Натрий лимоннокислый однозамещенный или натрий гидроцитрат 1,5водный
Калий фосфорнокислый однозамещенный
2-Аминоглютаровая кислота
Глицерин
Адениловая кислота
Вода дистиллированная
0,08-0,15
0,4-0,9
0,4-1,0
2,0-3,5
0,006-0 05
Остальное
2-Аминоглютаровая кислота !,0
Глицерин 3,5
Адениловая кислота 0,05
Вода дистиллированная Остальное
Выход биомассы при выращивании на среде данного состава: штамм Н-37
РУ 269 мг, штамм БЦЖ 198 мг, дикого штамма 218 мг (по сухой массе).
Среда повышает выход сухой биомассы микобактерий в 1,8-2,2 раза по сравнению со средой Школьниковой, на которой выход биомассы штамма Н-37
РУ 158 мг, штамма БЦЖ 131 мм, дикого штамма 143 м.
Формула изобретения
Питательная среда для культивирования мнкобактерий туберкулеза, содержащая магний сернокислый, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий лимоннокислый, соль железа, стимулятор роста, глицерин и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выхода биомассы, в качестве натрия лимоннокислого она содержит натрий лимонно30 кислый однозамещенный или натрий гидроцитрат 1,5-водный, н качестве соли железа она содержит железоаммиачные квасцы, а в качестве стимулятора роста — 2-аминоглютаровую кислоту и адениловую кислоту,при следующем .количественном соотношении компонентов, мас.X:
Железоаммиачные
