Способ анализа пробы цельной крови

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Изобретение относится к медицине, а именно к способам анализа компонентов пробы цельной крови. Цель - повышение точности способа. В кровь (0,5 мл) помещают на 10 мин агарозный гель, содержащий витамин B<SB POS="POST">12</SB> и выполненный в виде палочки, затем палочки ополаскивают в PHOSPHATE FUFFERED SALINE, содержащем NA<SB POS="POST">2</SB>HPO<SB POS="POST">4</SB>, KH<SB POS="POST">2</SB>PO<SB POS="POST">4</SB>, NACL и NAN<SB POS="POST">3</SB>, PH 7, 3, определяют поглощение при 540 нм и рассчитывают изменение поглощения палочки до и после инкубации ее в крови. Затем по калибровочной кривой, настроенной с использованием, например, крови с известным гематокритом, определяют гематокрит исследуемого образца крови. Способ позволяет при включении в гель агарозы реагента на анализируемое вещество определять концентрацию его по цветной реакции, при этом концентрацию его корректируют с учетом измеренного гематокритного числа. 4 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК g 4 С 01 N 33/48

В(;ЕСОЯЗНМЯ

ПАТЕ.Ль ; „,, Åt,ÊÀß

Г Б.:.«Q, ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К llATEHTY

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

I (21) 2789701/28-14 (22) 10.07.79 (31) 936436 (32) 24.08 ° 78 ...(33) (46) 15.08.89. Бюл. У 30 (71) Текникон Инструментс Корпорейшн (VS) (72) Мартин Дж.Ли и Микаэль

Дж.Малин (US) (53) 6!2.015(088.8) (56) Заявка СНА М 922611, кл. G О1 N 33/48, 1978. (54) СПОСОБ. АНАЛИЗА ПРОБЫ ЦЕЛЬНОЙ

КРОВИ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к способам анализа компонентов пробы цельной крови.

Цель вЂ” повышение точности способа.

В кровь (О 5 мл) помещают на 10мин

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при компонентном анализе цельной крови. Цель изобретения вЂ” повышение точности способа.

На фиг. 1 дан график, показывающий диффузию витамина В, иэ агарозы в цельную кровь как функцию гематокрита; на фиг. 2 вЂ” график, показывающий диффузию витамина В, из агароэы как квадратный корень иэ функции времени согласно законам диффузии, на фиг. 3 вЂ” график, показывающий корреляцию между гематокритс м,SU„„1501929 А 3 агароэный гель, содержащий витамин

В, и выполненный в виде палочки, зы,хем палочки ополаскивают н phospha е bUffered saline, содержащем

Л,НР04 ° КН.РО4ь NaC1 и Маиз рН 7,3, определяют поглощение при

540 нм и рассчитывают изменение поглощения палочки до и после инкубации ее в крови. Затем по калибровочной кривой, настроенной с использованием, например, крови с известным гематокритом, определяют гематокрнт исследуемого образца крови. Способ позволяет при включении в гель агарозы реагента на анализируемое вещество определять концентрацию его по цветной реакции, при этом концентрацию его корректируют с учетом . измеренного гематокритного числа.

4 ил. (НсТ), определяемым диффузией и стандартными техническими методами центрифугирования, на фиг ° 4 вЂ” график, показывающий влияние гематокрита на анализ альбумина.

Способ осуществляется следующим образом.

Приготовление витамина В< в агарозном геле.

В 25 мл колбу Эрленмейера добавля-. ют О,1 г агара н 9,0 мл PBS (phoshate beffered sa1im), содержащий:

80 мл О, 1 М Na НРО; 20 мл О, 1 M КН РО .

8,5 г NaC1 и 0,2 г NaN>, pH = 7,3.

Колбу помещают в ванну с кипящей

3 150 водой на 5 мин для растворения агао розы. Остужяют смесь до 50 С, добавляют к ней 1,0 мл 1,07. витамина В, (в PBS) . Затем делают палочки из геля путем введения 2-3 капель теплой

I смеси в . колодцы и перекрытия их пластмассовым покрытием. Палочки могут храниться при комнатной температуре в увлажненном контейнере в течение нескольких месяцев. Красный цвет устойчив в течение этого срока.

Определение гематокрита крови с помощью диффузии витамина В, из геля наружу.

Для каждой палочки определяют первоначальное поглощение при 540 нм при чистом (без присадок) агарозном геле в качестве эталона. Затем палочки погружают на 10 мин в 1,5 мл цельной крови известного гематокрита (НсТ), определенного центрифугированием. Палочки быстро ополаскивают в двух стаканах с чистым PBS и вновь определяют поглощение при

540 нм. Затем определяется изменение поглощения при 540 нм.

A nep. A комечн °

Экспериментальные данные наносят на график, где А вЂ” ось ординат, НсТ вЂ” ось абсцисс (см. фиг. 1-3 данные по 49 пробам) °

Приготовление гелей для анализа на альбумин °

В 25 мл колбу Эрленмейера помещают 150 мг агарозы, 7,0 мл сукцинатного буфера, полученного растворением 8,85 r янтарной кислоты (75 мм) в 800 мл дистиллированной воды (рН устанавливают 4,4 добавлением

1929 4

i ранул ХаОН), затем добавляют S,О мп

"Br ij вЂ” 35", 307. поверхностно-активного раствора и 5,36 r NaC1. Объем смеси доводят до 1 л °

Анализ с использованием геля на альбумин.

Определяют первоначальное поглощение каждой палочки при 630 нм.

Помещают капли крови на поверхность геля на 30 с, быстро смывают пробу двумя промываниями чистым сукцинатным буфером. Повторно через 20 мин измеряют поглощение палочки при

630 нм.

Строят график А 4 как функцию гематокрита (НсТ) при фиксирован,ной концентрации альбумина плазмы, который иллюстрирует гематокритный эффект (фиг . 4 ) .

Формула изобретения

Способ анализа пробы цельной крови путем помещения ее на поверхность геля, отделения твердой и жидкой фаз с последующим анализом аналитов внутг ри жидкой фазы и внутри геля, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повьппения точности анализа, используют гель агарозы, содержащий инертный краситель, витамин В, и гель, содержащий реагент на анализируемое вещество, анализ проводят спектрофотометрически, при этом дополнительно определяют гематокритное число по количеству витамина В<, диффундирующего из геля, концентрацию аналита определяют по проДукту

его цветной реакции, концентрацию которого корректируют в соответствии с определяемым гематокритным числом.! 501929

Ю Ю 50 N

НсТ 5 6

448.1 й>4

1501929

Е0

Фив.

Составитель А.Агуреев

Техред М.Ходанич

Редактор О. Спесивых

Корректор Н.Борисова

Заказ 4896/59 Тирал 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Paymctcas наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

0 10 10 Ю Ч7 Я 60

СЕНТЬЕУВАС Нс7

Фиа3

0 Ю 20 30 % Я Ю

Нс7

Изобретение относится к медецине , в частности, к эндокринологии и может быть использовано для прогнозирования ангионефротических осложнений при сахарном диабете у детей

Способ определения карбарила в растительном материале // 1500937

Изобретение относится к биохимии растений и может быть использовано для определения карбарила (севина) в растительном материале

Способ диагностики реконвалесцентного бактерионосительства при дизентерии // 1500936

Изобретение относится к медицине , в частности, к инфекционным болезням

Способ дифференциальной диагностики гастродуоденита и язвенной болезни в период обострения // 1500935

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики язвенной болезни и гастродуоденита у детей

Дефлекторное устройство определения агрегационной способности клеток крови // 1499235

Изобретение относится к медицинской технике ,в частности, медицинскому приборостроению, и может быть использовано для анализа крови

Способ исследования взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов // 1499234

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гематологии

Способ цитологического определения активности клеток // 1499149

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии

Способ прогнозирования исхода лечения гнойных менингитов у детей // 1498454

Изобретение относится к неврологии и может быть использовано для прогнозирования исхода лечения гнойных менингитов у детей

Способ определения содержания тяжелых металлов в крови // 1497569

Изобретение относится к области медицины, а именно к методам определения тяжелых металлов в биологическом материале

Способ определения ориентировочных безопасных уровней воздействия химических веществ в воздухе рабочей зоны, метаболизируемых с помощью монооксигеназ печени // 1497568

Изобретение относится к области медицины

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750