Способ прогнозирования развития ангионефропатии при сахарном диабете у детей

 

Изобретение относится к медецине , в частности, к эндокринологии и может быть использовано для прогнозирования ангионефротических осложнений при сахарном диабете у детей. Целью изобретения являются повышение точности способа. Для этого в суточной моче больного определяют содержание белка, а в крови - фибронектин. В пробу мочи 1,25 мл добавляют 3,75 мл 3%-ной сульфасалициловой кислоты, параллельно ставят контроль с 1,25 мл дистиллированной воды. После экспозиции содержание белка определяют по показаниям фотоэлектроколориметра / α = 590, свет-оранжевый/ с использованием калибровочной кривой. Для получения плазмы кровь смешивают с 3,5%-ным трехзамещенным цитратом натрия в соотношении 9:1. Заливают стеклянную пластинку раствором агарозы, добавляют 3%-ный раствор антисыворотки к фибронектину. Когда агар подсыхает, пробойником выполняют лунки диаметром 2,5 мм и вносят гамильтоновским шприцом 6 мкл плазмы. Одновременно осуществлют контроль образцов плазмы в разведениях 1:2, 1:4, 1:8. Концентрация фибронектина в образце 300 мкг/мл. Электрофорез ведут в агаровом геле, содержащим моноспецифицескую антисыворотку. Растворы вносят в лунки, через 12 ч окрашивают. Идентификацию фибронектина проводят по образованию преципитационного пика в форме ракеты. После этого рассчитывают отношение содержания белка в моче к содержанию фибронектина в крови и при его значении 0,2-0,8 усл.ед.прогнозируют развитие ангионефропатии в течение 6-12 мес при сахарном диабете у детей. Точность прогнозирования составляет 100%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ.

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (51) 4 G 01 N 33/48

C L

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ гГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

f10 ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4256ф29/28-14 (22) 02.06.87 (46) 15.08.89. Бюл. Р 30 (71) Ростовский-на-Дону научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии (72) В. А. Попова и В. К. Подгородниченко (53) 616.07(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

N - 1214092, кл. А 61 В 1О/00, 1986. (54) СПОСОБ ПРОП1ОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ

АНГИОНЕФРОПАТИИ ПРИ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ

У ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и может быть использовано дпя прогнозирования ангионефротических осложнений при сахарном диабете у детей. Целью изобретения является повьппение точности способа. Для этого в суточной моче больного опрецеляют содержание белка, а в крови — фибронектин, В пробу мочи 1,.25 мп добавляют 3,75 мл 3%-ной сульфасалицилоной кислоты, параллельно ставят контроль с 1,25 мл дистиллированной воды. После экспозиции содержание белка определяют по показаниИзобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и может быть использовано для прогнозирования ангионефропатических осложнений при сахарном диабете у детей.

Целью изобретения является повышение точности способа.

ÄÄSUÄÄ 15()()938 А1

2 ям фотоэлектроколориметра (= 590, свет — оранжевый) с использованием калибровочной кривой. Для получения плазмы кровь смешивают с 3,5%-ным трехзамещенным цитратом натрия в соотношении 9:1. Заливают стеклянную пластинку раствором агарозы, добавляют

3%»ный раствор антисыворотки к фибронектину. Когда агар подсыхает, пробойником выполняют лунки диаметром

2,5 мм и вносят гамильтоновским шприцем 6 мкл плазмы. Одновременно осуществляют контроль образцов плазмы в разведениях 1:2; 1:4; 1:8. Концентрация фибронектина в образце 300 мкг/мл.

Электрофорез ведут в агаровом геле, а

Ю содержащим моноспецифическую антисыворотку. Растворы вносят в лунки, через

12 ч окрашивают. Индентификацию фибронектина проводят по образованию преципитационного пика в форме ракеты.

После этого рассчитывают соотношение содержания белка в моче к содержанию фибронектина в крови и при его значении 0,2-0,8 усл.ед. прогнозируют развитие ангионефропатии в течение

12 мес. при сахарном диабете у детей.

Точность прогнозирования 100%.

Способ осуществляется следующим об- 3 ® раз ом. Зь

Для своевременного и эффективного лечения возможных осложнений со стороны почек — ангионефропатии, резко утяжеляющей течение основного заболевания, отбирают детей с сахарным диа1500938 бетом, у которых в общем анализе мочи обнаружены следы белка.

У детей собирают суточную мочу однократно, на следующий день утром из вены отбирают 1 мл крови. Определение в моче белка и фибронектина в крови проводят следующим образом: 1,25 мл отцентрифугированной и профильтрованной мочи соединявт с 3,75 мл З -ной 1О сульфасалициловой кислоты, параллель.но ставят контроль с 1,25 мл дистиллированной воды. После 5-минутной экспозиции количество белка определяют по показаниям фотоэлектрокалориметра 15 (с = 590, свет — оранжевый) е использованием калибровочной кривой, где в качестве стандарта используют бычий сывороточный альбумин в различных разведениях. В норме у детей суточная 20 протенурия составляет 50-100 мг в сутки. Для получения плазмы кровь смешивают с 3,57.-ным трехзамещенным цитрато м нат рия в с оо тнош енин 9: 1 °

Заливают стеклянную пластинку IXным раствором агарозы, добавляют ЗЕный раствор антисыворотки к фибронектину. Когда агар подсыхает, пробойником выполняют лунки диаметром 2,5 мм и вносят гамильтоновским шприцом

6 мкл плазмы., Одновременно осуществляют контроль образцов плазмы в разведениях 1:2; 1:4; 1:8. Концентрация фиб- ронектина в образце 300 мкг/мл. Электрофорез ведут в агаровом геле, содержащим моноспецифическую антисыворотку.

Разбавленные растворы образцов, подлвкащие сравнению, вносят в лунки, расположенные в ряд. Через 12 ч плас- 40 тину окрашивают специально приготовленным раствором, содержащим 225 мл этанола, 225 и дистиллированной воды, 2,5 амидо черного, 50 мл уксусной кислоты. 45

Идентификации фибронектина производят по образованию преципитационно"

ro пика в форме ракеты, а количест-:. венное îпределение осуществляют по

50 высоте пика или по его. площади. Вычисляют отношение содержания белка в суточной моче к фибронектину в крови.

При наличии этого отношения 0,2.—

0,8 усл. ед. прогнозируют развитие осложнений со стороны почек у детей при сахарном диабете — ангионефропатив в течение 6-12 месяцев и назначают соответствующее лечение.

II р и м е р !. Больная Р., .12 лет, поступила в детское эндокринологическое отделение с жалобами на жажду, полиурив, повышенное содержание сахара в крови. Из анамнеза известно, что девочка болеет инсулинозависимым сахарным диабетом в течение года. Получает инсулин пролонгированного действия и аморфный инсулин—

4 ед.

Клиническое наблюдение за больной выявило наличие жажды, полиурии в объ-.еме около 2 л, сухость кожных покровов, гликемив 12-13 мм/л, глвкозурив

40,0 r в сутки, что позволило поставить диагноз: сахарный диабет, инсулинозависимый тип, длительность заболевания 1 год, декомпенсация 1 степени. В анализе мочи обнаружены следы белка.

Учитывая наличие следов белка в общем анализе мочи у девочки проведено исследование фибронектина плазмы крови и суточной потери белка с мочей.

Фибронектин плазмы крови — 600 iver/мл.

Суточная потеря белка с мочой

120 мкг/мл. Соотношение Gemma в моче к,фибронетину в крови — О, 2 усл.ед.

В этот период по заключению окулиста изменения на глазном дне, характерные для диабетической микроангиопатии, отсутствовали.

Девочка была обследована гинекологом, диагноз: здорова, В анализе мочи по Нечипоренко: эритроциты 1,0 10 ; лейкоциты 2,0 х х 10 в н/зр. Клиренс по эндогенному э креатинину — 154 мл/мин. На основании проведенных клинико-биохимических исследований первоначальный диагноз бып уточнен за счет дополнения его развитием осложнения сахарного диабета — ангионепропатии. Окончательный диагноз: сахарный диабет, инсулинозависимый тип, длительность заболевания

1 год, декомпенсация 1 стелени. Ангионефропатия 1 степени.

С учетом развития осложнения сахарного диабета в виде начальной стадии ангионефропатии назначено комплексное лечение, включающее диету, инсулин, витамины группы В, оротат калия, продек тип.

Пример 2. Больной .К., 14 лет поступил с жалобами на жажду, полну" рию, быструю утомляемость, повышение сахара в крови. Анамнез: болен инсулинозависимым сахарным диабетом в те1500938

Формула из обретения

Составитель Н. Валеева редактор Т. Парфенова Техред Л. Олийнык Корректор 3. Лончакова

Заказ 4859/39 .

Тираж 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина, 101 чение 2 с половиной лет. Получает ежедневно в инъекциях 28 ед. пролонгированного инсулина (ИЦС) и б ед. простого инсулина.

Клиническое наблюдение за больным, выявившее наличие жажды, полиурии (2 л в сутки), умеренную сухость кожных покровов, гликемию — 16 мм/л, суточную глюкозурию — 40,0 г позволило 10 поставить предварительный диагноз: сахарный диабет, инсулиноэависимый тип, длительность заболевания 2 года

6 мес. декомпенсация 1 степени. В об; щем анализе мочи от 15. 11. 1987 r. об- 15 наружены следы белка.

Анализ мочи по Каковскому-Аддису: эритраниты 1,0 -10 ; лейкоциты 2,0 х х 10 . На основании обнаружения сле6 дов белка в общем анализе мочи возни- 20 кло предположение о развитии ангионефропатии..  — микроглобулин в крови

1, 8 мг/л. Суточная потеря белка с мочой — 240 мкг/мл. Фибронектин плазмы крови — 300 мкг/мл. Соотношение белка 25 в моче к фибронектину в крови — 0,8.

Осмотр окулиста выявил диабетическую ангиопатию сетчатки.

На основании прове, ценных клинико- 30 биохимических исследований первоначальный диагноз был уточнен за счет дополнения его развитием осложнения сахарного диабета — ангионефропатии..

Окончательный диагноз: сахарный диабет, инсулипозависи N тип, длительность заболевания 2 года б мес., декомпенсация степени, диабетическая ангиопатия сетчатки. Ангионефропатия 1 степени.

Применение предлагаемого способа в медицинской практике позволяет повысить точность прогнозирования развития ангионефропатии при сахарном диабете у детей,цо 100!. Кроме того, способ не травматичен, легко осуществим и позволяет своевременно начать необходимое комплексное .лечение.

Способ прогнозирования развития ангионефропатии при сахарном диабете у детей путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в суточной моче определяют содержание белка, а в крови определяют уровень фибронектина, рассчитывают их соотношение и при величине этого показателя 0,2-0,8 усл.ед. прогнозируют развитие ангионефропатии при сахарном диабете у детей.