Способ прогнозирования ранних рецидивов рожи

 

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционной патологии. Цель - повышение точности прогнозирования рецидива рожи. Для этого осуществляют постановку реакции определения ингибирующей активности сыворотки на иммунологические реакции. Испытуемую сыворотку обрабатывают аллергеном гемолитического стрептококка и ее тестируют на аутологичных стимулированных нейтрофилах капиллярной крови, в качестве показателя функциональной активности которых используется стимулированный тест восстановления нитросинего тетразолия. Точность способа возрастает в 2,2 раза.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) 011

: . м и 1 f (5!)4 0 Ol N 33/53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPGHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (21) 4230822/28-14 (22) 14.04.87 (46) 07.07.89.Бюл. 11» 25 (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней (72) И.Г.Цой, К.М.Татаева и О.И.Крифукс (53) 615.373 (088.8) (56) Рычнев В.Е., Журавлева Н.В., ФрсЬов В.М. и др. Способ прогнозирования рецидивов рожистого воспаления. — Авторское свидетельство СССР

11» 1068125, кл. 0 01 N 33/53, 1984. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАННИХ

РЕЦИДИВОВ РОЖИ

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционной патологии человека, в частности у рожистого воспаления.

Цель изобретения — повышение точности определения иммуноингибирующей активности антител для прогнозирования ранних рецидивов рожи.

Способ осуществляют следующим образом.

В центрифужных пробирках смешивают равные объемы (по 50-100 мкл) испытуемой сыворотки больных рожей и аллергена гемолитического стрептококка (0,1-0,2 кожные дозы в 1 мл),разведенного на забуференном физиологическом растворе (рН 7,2-7,4). Смесь инкубнруют при 37 »С в течение 20—

30 мин.

На поверхность стерильного предметного стекла наносят по 10-20 мкл

2 (57) Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционной патологии. Цель — повышение точности прогнозирования рецидива рожи. Для этого осуществляют постановку реакции определения ингибирующей активности сыворотки на иммунологические реакции .

Испытуемую сыворотку обрабатывают аллергеном гемолитического стрептококка и ее тестируют на аутологичных стимулированных нейтрофилах капиллярной крови, в качестве показателя функциональной активности которых используется стимулированный тест восстановления нитросинего тетразолия. Точность способа возраста- ср

EO ет в 2,2 раза.

Ф гепаринизированной аутологич ной капиллярной крови больных и его сыноротки, обработанной аллергеном, и инкубируют 15-20 мин при 37"С во нлаж- ь»ай ной камере. Затем добавляют по 1О мл »ф »

0,27-ного нитросинего тетразолия и (g) стимулятора (пирогенал 10 МПД/мл или ) опсонизированные частицы эимозана).

Вновь инкубируют 15-20 мин при 37"С б во влажной камере. Из капли на этом же предметном стекле кончиком пастровской пипетки делают мазок, который после подсунивания фиксируют метанолом и окрашивают 0»17-ным водным раствором нейтрального красного, Микроскопирование проводят под светоным микроскопом (900 х) в им1ерсионной системе. Учитывают процент формазанполОжительных полиморфноядерных лейкоцитов (с темно-синими

1492284 отложениями глыбок Формаэана в цитоплаэме) на 200-300 клеток °

Контролем является постановка реакции беэ предварительной обработки капиллярной крови сывороткой, т.е.

5 общепринятая реакция стимулированного НСТ-теста.

Величина ингибирующего эфФекта обработанной аллергеном сыворотки больных выражается с помощью индекса ингибирования (ИИ), вычисляемого по

К-О формуле: †--" = ИИ где К вЂ” Х форк мазанположительных нейтрофилов в контроле; 0 - соответствующий показатель в опытной пробе. 3а достоверное ингибирование принимают значения ИИ r 0,20.

Время постановки реакции 90

110 мин, Мазки сохраняются неограниченное время.

Пример. Вольной Л, В. К., 40 лет,поступил с жалобами на отечность и покраснение кожи в области левой шеки и носа, головную боль, озноб, незначительное повышение тем пературы (37,8 С). Считает себя больным в течение двух лет, частота обострений 2-3 раза н год, чаше в зимне-осеннее время. Предыдущее обострение перенес в декабре 1984 г., рецидив протекал в Форме эритематозного воспаления. Настоящий рецидив связывает с наличием трещин в слизистой полости носа. Обьктинно: эритематоэное воспаление ко;ки н области левой щеки и носа, регионарный лимфоаденит подчелюстных узлов слева. Со стороны других органон и систем патологии не выявлено, По данным анализов крови — умеренный лейкоцитоз, относительный лимфоцитоз, в остром периоде ускоренная СОЭ, Диагноз: рецидинирующая рожа лица, эригематоэная форма, среднетяжелое течение.

Исследование сыворотки по предлагаемому способу показало, что ингибирующий эффект сыворотки при постут лении 0,59 (в контроле 43,57, н

50 опыте 17,5X), При повторном обследовании перед выпиской на Фоне полной инволюции местного очага поражения, отсутствия симптомов обшей интоксикации, нормальной СОЭ (3 мм/ч) 55 величина ингибирующего эффекта сьг воротки 0 ° 46 (контроль 28,5Ж,опыт

15,5X), т.е ° существенно пренышаст контрольные значения, Через месяц после выписки у больного развился новый рецидив рожи, который также протекал н эритематозной форме,Следовательно, у данного пациента, несмотря на клиническое выздоровле- ние, сохранился очаг стрептококковой инфекции, который выявил новое обострение (рецидин), о чем.свидетельствовали результаты предлагаемого способа.

С испольэонанием предлагаемого способа испытано 15 донорских сывороток и 38 сывороток от больных рожистым воспалением, находящихся в стадии ранней реконвалесценции, у

12 нз которых при последующем наблюдении н течение первых 3-5 месяцев развились ранние рецидивы заболевания.

Положительные результаты предлагаемого способа чаще всего отмечались н группе пациентов с развившимися в последующем ранними рецидивами рожи (н 83,3+!О,ЯУ. случаев), различие с другими группами обследованных по частоте статистически значимо. У этих .ке больных были достоверно более высокими значения индексон ингибиции (0,40+0,06), тогда как н других группах реднегрупповые значения не достигали положительных значений.

Повышение точности способа при условии предварительной обработки испытуемых сывороток аллергеном гемолитического стрептококка демонстрируется на примере исследований с сыворотками от 10 больных с развившимися ранними рецидивами рожи. В опытных пробах сыворотки предварительно обрабатынали аллергеном гемалнтического стрептококка, н контрольных тестировали беэ обработки, В опытной группе достоверный ингнбирующий эфФект регистрировался н Й из 10 случаев (80,0+!2,67), тогда как при тестировании этих же сывороток беэ предварительной ннкубации с аллергеном положительные результаты способа отмечены н 4 случаях (40,0+

+15 5X) различие по частоте статистически значимо (р 0,05). При этом предлагаемый способ позволяет н 2,2 раза снизить ошибку метода по сравнению с известным.

Положительные значения предлагаемого способа являются основанием для

1492284 проведения с больным повторного курса антибактериальной терапии со сменой препаратов и назначения в последующем длительной бициллинопроФилактики. отличающийся тем, что, с целью повьппения точности прогнозирования, сыворотку обрабаты вают аллергеном гемолитического стрептококка, добавляют стимулированные аутологичные нейтрофилы капиллярной крови, проводят НСТ-тест и определяют уровень ннгибирующих факторов по индексу ингибиции и при величине индекса ингибации вьаве 0,20 по сравнению с контролем прогнозируют ранний рецидив роми.

Формула изобретения

Способ прогнозирования ранних рецидивов porn путем исследования в сыворотке крови больного иммуноингибнрующих факторов, Составитель И. Башкаев

Техред Л.Олийнык Корректор В.Гирняк

Редактор И.Горная

Заказ 3871/47 Тирам 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Ужгород, ул. Гагарина, 1О1