Питательная среда для культивирования балантидий

 

Изобретение относится к биологии, а именно к рецептурам питательных сред, и может быть использовано для культивирования паразитических инфузорий . Целью изобретения является улучшение свойств среды. Для получения среды взвешивают 6,5-8,5 г натрия хлористого, 0,35-0,68 г диаммония фосфата или 1,0-2,0 г натрия фосфорно-кислого двузамещенного и 0,3-0,7 г калия фосфорно-кислого однозамещенного или калия хлористого. Навески растворяют в 1000 мл дистиллированной воды. Раствор стерилизуют. Затем добавляют рисовый крахмал. Хранят среду в бытовом холодильнике до 50 дней. Перед посевом балантидий в среду добавляют биогенный стимулятор ФиБС в количестве 80-150 г/л. Размножение простейших на среде наблвдают уже на 12-м часу после посева . Максимум роста достигает к 72- 120 часам. Плотность паразитов 7,8- 9,0 тысяч в 1 мл средьЛ Переживаемость балантидий в предлагаемой среде достигает 14 суток. Среду используют в диагностических целях и для накопления биомассы возбудителя. 1 табл. с (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (51)4 С 12 N 1 10

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ/ " :

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4156918/30-! 3; 4180433/30-13 (22) 05.12.86 (46) 30.06.88. Бнет, № - 24 (71) Украинский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии (72) А.Ф.Манжос, Л. К.Лиховоз и В.С.Сумцов (53) 616.993. 1(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

¹ 1017727, кл. С 12 N 1/10, 1981, (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАЛАНТИДИЙ (57) Изобретение относится к биологии, а именно к рецептурам питательных сред, и может быть использовано для культивирования паразитических инфузорий. Целью изобретения является ул учше ни е с в ой с т в с р еды. Для п олуч ения среды взвешивают 6,5-8,5 г натрия хлористого, 0,35-0,68 г диаммония

„„SU„, 1406154 А1 фосфата или 1,0-2,0 г натрия фосфорно-кислого двуэамещенного и 0,3-0,7 r калия фосфорно-кислого одноэамещенного или калия хлористого. Навески растворяют в 1000 мл дистиллированной воды. Раствор стерилизуют. Затем добавляют рисовый крахмал. Хранят среду в бытовом холодильнике до

50 дней. Перед посевом балантидий в среду добавляют биогенный стимулятор ФиБС в количестве 80-150 r/ë.

Размножение простейших на среде наблюдают уже на 12-м часу после посева. Максимум роста достигает к 72120 часам. Плотность паразитов 7,89,0 тысяч в 1 мл среды". Переживае. мость балантидий в предлагаемой среде достигает 14 суток. Среду используют в диагностических целях и для накопления биомассы возбудителя.

1 табл.

1406 154

Количество трофозоитов балантидий в 1 мл среды, тыс.

Время после посева, ч

Пр едлагаемая

Известная

12

1,8

1,5

2,0-2,5

2,2-3, 1

Изобретение относится к биологии, а именно к рецептурам. питательных сред, и может быть использовано для культивирования инфузорий.

Целью изобретения является улучшение свойств среды.

Среда позволяет без пересевов длительно культивировать балантидий свиней и получать интенсивное накопление10 биомассы простейших.

Питательную среду приготавливают следующим образом, Пример J Взвешивают оптимальные количества компонентов: 6,8 r15 хлористого натрия, 1,2 r фосфорнокислого двузамещенного натрия, 0,5 r хлористого калия и растворяют их в

1000 мл дистиллированной воды. В течение 5 мин раствор стерилизируют ки-20 пячением. После стерилизации солевой раствор двукратно фильтруют через фильтровальную бумагу и доводят объем дистиллированной водой до первоначального. Измеряют рН среды и тит- 25 руют ее до 7,2 — 8,0, Среду разливают в пробирки по 9 мл и стерилизуют в автоклаве. После остывания в каждую пробирку со средой добавляют на кончике скальпеля рисовый крахмал и оставляют ее до полного просветления. Хранят среду в бытовом холодильнике до 45 дней.

Перед посевом балантидий в каждую пробирку добавляют ФиБС по 1 мл.

В полученную питательную среду ,высевают испытуемый материал, содержащий трофозоиты балантидий в количестве 300 — 900 экземпляров в 1 r фекальных масс. В качестве контроля используют известную среду. Результа40 ты представлены в таблице.

Продолжение таблицы

Количество трофоэоитов балантидий в 1 мл среды, . тыс.

Время после

nocesa, ч

Известная

Предлагаемая

3,0-5,0

3,0-5 0

3,0-5,0

2,5-4,0

2,0-2,5

1,5 — 2,0

1,0-1,5

1,0-1,5

0,5-1,0

0, 5-1,0

3,8-5,4

7, 0-7,8

7, 1-7,8

6,4-7,6

72

120

3,3-3,9

144

1,8-2, 3

1, 3-1,9

1,0-1,8

1,0-1,2

0,7-1,1

168

192

216

240

264

0,5

0,9

288

0,3

0,5

312

0,3

336

0,5

360

384

Размножение простейших на предлагаемой среде наблюдается уже к 18-му часу после посева. Плотность паразитов достигает 1800 в 1 мл, а на известной среде — 1500.

Пример 2, Взвешивают оптимальные количества компонентов: 6,6 r хлористого натрия, 0,6 r диаммония фосфата, 0,5 r фосфорно-кислого однозамещенного калия и растворяют их в

1000 мл дистиллированной воды. Раствор стерилизуют кипячением в течение

5 мин. После стерилизации солевой раствор двукратно фильтруют через фильтровальную бумагу и доводят объем дистиллированной водой до 1 л. Измеряют рН среды и титруют его po 7,28,0. Среду разливают в пробирки по

1406154

Фор мула и э обретения

Хлористый натрий

Фосфорно-кислый

6,5-8,5

0,35-0,68 двуэамещенный аммоний или

Фосфорно-кислый двузамещенный натрий

1 0-2,0

Фосфорно-кислый однозамещенный калий или

Хлористый калий

0,3-0,7

Биогенный стимулятор

ФиБС

Крахмал

Дистиллир ова иная вода

80,0-100, 0

6,25-10,0

До!л

Составитель Г.Соболева

Редактор Н.Ывьщкая Техред А.Кравчук Корректор И.Эрдейи

Заказ 3157/23 Тираж 520 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

1 по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35Ä Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое йредприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

9 мп и стерилиэуют в автоклаве. После остывания в каждую пробирку со средой добавляют на кончике скальпеля рисовый крахмал и оставляют ее до полного

5 просветления. Хранят среду в бытовом холодильнике до 50 дней.

Перед посевом балантидий в каждую пробирку добавляют ФиБС по 1 мп.

В полученную питательную среду вы- 1п севают материал, содержащий трофозоиты балантидий в количестве 300 — 900 экземпляров в 1 r фекальных масс.

В качестве контроля используют известную среду. 15

Размножение простейших на предлагаемой среде отмечают уже к 12-му часу посл е пос ева. Плотность пара зитов достигает 2000 в 1 мп. Максимум роста наблюдается к 72-120 часам (до

9000 трофозоитов), в то время как на контрольной среде было максимально

5000 инфузорий в 1 мп.

Первый пересев производят через

24 ч. Последующие пересевы осуществ- 25 ляют через каждые 120 ч. При этом из одинакового количества питательной среды получают биомассы простейших почти в 2 раза больше, чем в конт- роле. Переживаемость балантидий Hà gp полученной среде достигает 336 ч.

Среда пригодна как для выделения балантидий иэ фекалий, так и для дальнейшего их пассирования и накопления.

Питательная среда для культивирования балантидий, содержащая минеральную добавку, биогенный стимулятор ФиБС, крахмал и дистиллированную воду,отличающаяся тем, что, с целью улучшения свойств среды, в качестве минеральной добавки содержит хлористый натрий, фосфорно-кислый двузамещенный натрий или фосфорнокислый двуэамещенный аммоний, хлористый калий или фосфорно-кислый однозамещенный калий при следующем количе=-. ственном соотношении компонентов, г/л: