Штамм дрожжей torulopsis apicola вкпм y-566-продуцент маннита

 

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается нового штамма дрожжей, активно продуцирующего маннит, который может быть использован в различных отраслях народного хозяйства. Целью изобретения является получение нового штамма, обладающего высокой синтезирующей активностью экстрацеллюлярного маннита за короткий период времени . Штамм ВКПМ Y-566 (БИМ В-25П) выделен из малины, перетертой с сахаром , и способен образовьшать до 79,7% маннита от использованного источника углерода. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТЬНЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (191 (И) А1

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTVM

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, ц:

К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

/ (21) 4040760/31-13 (22) 09 ° 12.85 (46) 23.07.87. Бюл. Ф 27 (71) Институт микробиологии АН БССР (72) М.В. Залашко, Г.А. Салохина, Н.Н. Федор и М.М. Грушенко (53) 663.15(088.8) (56) Патент США 9 3427224, кл. 19535, 1969.

Авторское свидетельство СССР

У 1033543, кл. С 12 Р 7/18. 1982..(54) ШТАММ ДРОЯОКЕЙ TORULOPSIS APICOLA ВКПИ Y-566 — ПРОДУЦЕНТ 11АННИТА (50 4 С 12 N 1/16, С 12 P 7/18//

//(С 12 N 1/16, С 12 R l 88) (57) Изобретение относится к микробиологической промьппленности и касается нового штамма дрожжей, активно продуцирующего маннит, который может быть использован в различных отраслях народного хозяйства. Целью изобретения является получение нового штамма, обладающего высокой синтезирующей активностью экстрацеллюлярного маннита эа короткий период времени. Штамм ВКПИ Y-566 (БИМ П-2511) выделен из малины, перетертой с сахаром, и способен образовывать до 79,7Х маннита от использованного источника углерода. 1 табл.

d-Глюцитол

Салицин

d, L-Молочная кислота (слабо)

Янтарная кислота

Лимонная кислота

Инозит

Эритрит

Раффиноэа

d-Маннит

d-Ксилоэа

3-Арабиноэа

d-Арабиноза

Глюкоза

Галактоэа ь -Сорбоэа

d-Рибоза -Рамноза

Этанол

Глицерин

Рибитол

Инулин

Сахароза

Мальтоэа

Целлобиоэа

Лактоза

Мелибиоза

Галактиол

Дополнительно проверяемые углерод- 50 ные соединения:

К лимонно-кислый одно замещенный

Са молочно-кислый (сла—

Na янтарно-кислый

Na лимонно-кислый трех замещенный

К лимонно-кислый двух замещенный бо) 1 13250

Изобретение относится к микробио- логической промышленности и касается нового штамма дрожжей, активно продуцирующего маннит, который может быть использован в различных отраслях народного хозяйства.

Целью изобретения является получение нового штамма дрожжей, обладающего высокой синтезирующей активностью экстрацеллюлярного маннита за 1Р более короткий период времени.

Штамм дрожжей BKIIM Y-566 (БИ"1

D-2511) выделяют из малины, перетертой с сахаром, следующим путем.

В колбы Эрленмейера объемом f5

250 мл с 100 мл среды следующего состана, 7.: глюкоза 5,0; КН РО 0,1

MgS0 0,5; СаС1 0,01; NaC1 0,01; дрожжевой автолизат 0,5, рН 5,0, вносят 10 мл малины, перетертой с саха- 2Р ром, и выдерживают на качалках при

28 С 6 сут. Начиная с третьих суток проводят высевы на чашки Петри с сусло-агаром (37 агара, рН=4,0). После многократных пересевов выделяют чистую культуру дрожжей. Выделенный штамм идентифицирован до вида. При индентификации дрожжей до рода используют руководство И.П. Бабьевой, а при определении до вида — руковод- 3Р ства Barnett u Ladder.

Полученный штамм обладает следующими морфолого-культуральными и физиолого-биохимическими признаками.

Морфолого-культуральные признаки. 35

Вегетативные клетки: в жидком сусле о при температуре культивирования 28 С

Рост на среде без витаминов слабый, без пиридоксина растет хорошо, без тиамина растет медленно. на третьи сутки клетки овальные или круглые. Размеры клеток варьируют в пределах (1,5-3,0) ° (3,0-6,5)„. Образует узкое кольцо, пленки не образует. В 30-суточной культуре — остатки узкого кольца, пленка не образуется.

Вегетативные споры: артроспоры и хламидоспоры не обнаружены. Баллистоспор не образует.

Рост на пластинках с кукурузным агаром: псевдомицелия не образует, истинного мицелия не образует. Наблюдения ведут аэробно и анаэробно.

Рост на сусло-агаре: у 3-суточного штриха культуры белый цвет, мягкий, блестящий и гладкий, а у 30-суточного штриха цвет от бледно-белого до кремового, блестящий или слегка матовый, гладкий или слегка сморщенный по краю. Гигантская колония (после 30 сут) 2 2 см почти круглая, поверхность матовая, гладкая, профиль колонии слегка изогнутый, цвет бледно-белый (до кремового оттенка). Гигантская колония (1 год) 4 ° 4 см круглая, поверхность матовая, профиль плоский, слегка бугристый в центре, цвет светло-коричневый.

Физиолого-биохимические признаки.

Оптимальная температура культивирова0 о ния 28 С, максимальная 37 С (при культивировании на среде с 107 глюкозы).

Осмотолерантность: культура хорошо растет на средах, содержащих 10, 20 и 307 глюкозы. На среде с 60Х глюкозы при 28 С рост не наблюдается.

Ассимиляция источников углерода:

При изучении ассимиляции источников углерода и роста культуры на среде без витаминов используют синтетиГлюкоза,г/л г/л

Время Условия культивиВыход маннита культивироварования

Х от использованной глю козы ния

67,47

79,50

I 2,30

1О,!О

96 Колбы на качалке

72 Лабораторный ферментер

50

12,50

65,19

79,70

96 Колбы на качапке

50 7,50

72 Лабораторный ферментер

100 15,63

60,70

96 Колбы на качалке

ВНИИПИ Заказ 3021/24 ТиРаж 499 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 13250 ческие среды, рекомендованные Бабьевой И.П. и Голубевым В.И.

Условия и состав сред для хранения штамма. Штамм хранится на агариэованном сусле (ЗХ агара, 6-7 Б) о

Э 1 рН 6,0, при 4-5 С.

Условия и состав среды для размножения штамма. Штамм культивируется на агаризованном сусле (37 агара, 6-7 Б), рН 5 0-6,0 при 28 С. 1О

Условия и состав среды для ферментации. Применяют среду следующего состава, Х: глюкоза 5 О; КН РО4 0,1;

MgSO< О 5; СаС1 0,01; NaCl 0,01; дрожжевой автолизат 0,05, рН 5,0 (6). 15

Пример 1. Штамм Torulopsis

apicola выращивают в глубинных условиях на качалке (200 об/мин) в колбах

Эрленмейера на 500 мл, содержание о среды 100 мл, при 28 С. Для выращи- 20 вания используют среду следующего состава, Х: глюкоза 3,0; КН2Р04 0,1;

MgSO< 0,5; СаС1 0,01; NaC1 0,01; дрожжевой автолиэат 5,0, рН 5,0.

Посевной материал выращивают 3 сут25 на качалке в 200 мл колбах Эрленмейера,содержащих 100 мл среды того же состава. Засев производят 3-суточной культурой дрожжей, выращенных на скошенном сусло-агаре. 30

Спустя 96 ч биомассу дрожжей отделяют центрифугированием. Фильтрат деионизируют на ионообменных смолах, 73 4 концектрируют под вакуумом до получения 25-ЗОХ-ного раствора маннита, добавляют 4-6-кратный объем подогретого этанола и оставляют кристаллизоваться на ходу. Выпавшие кристаллы отделяют центрифугированием или фильтрованием. Выход составляет

67,47Х от использованного источника углерода.

Пример 2. Условия культивирования, состав среды и извлечение маннита аналогичны примеру 1. Культивирование проводят в ферментере емкостью 3 л (объем среды 500 мл). Интенсивность.аэрации 4 об/л в I ч. Выход маннита составляет 79,7Х от использованного источника углерода. Время ферментации 72 ч.

П р е р 3. Условия культивированин, извлечение маннита аналогичны примеру 1. В качестве источника углерода используют мелассу 50 г/л. Выход маннита 67Х от использованного источника углерода. Время культивирования 96 ч.

Свойства штамма приведены в таблице.

Ф о р и у л а и з о б р е т е п и я

Штамм дрожжей Torulopsis apicola

ВКПБ У-566 — продуцент маннита.