4-йодфениллаурат,меченный радиоизотопами йода,в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности липазы в организме и промежуточный продукт для его получения

 

Изобретение касается арилпроизводных лауриновой кислоты, в частности 4-йодфениллаурата, меченного радиоизотопами йода (ФЛ), который может быть использован в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности липазы в организме , и немеченного 4-йодфениллаурата (НФЛ) - промежуточного продукта для синтеза ФЛ. Для выявления соединений , обеспечивающих точность определения ферментативной активности липазы , были получены новые ФЛ и НФЛ. Последний получают реакцией йодфенола с лауроилхлоридом при 50-60 С в среде бензола в присутствии пиридина. ФЛ получают радиоизотопным обменом радиоактивного йодида натрия с НФЛ. Выход НФЛ 70%, т.пл. 43-44 0. Радиохимический выход ФЛ 80-82%, чистота 96-98%. ФЛ дает возможность с высокой точностью оценить внешнесекреторную функцию поджелудочной железы (активность липазы) по измерению радиоактивности мочи. В сравнении с известным 4-нитрофениллауратом активность липазы снижается в 3-4 раза с ФЛ против снижения активности в 2 раза. . с.п. ф-лы, 3 табл. & (Л со о оэ от со оо

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3829763/23-04 (22) 25,12.84 (46) 15. 04. 87. Бюл. У 14 (72) И. Н. Кендьпп, В.A. Братцев и А.И. Климова (53) 547,295.72(088.8) (56) Borrowman J.À., Eorgstrom.

Gastroentегоlogy, 1968, v. 55, У 5, р. 601-605.

Gyr К. — Gastroentегоlogy, 1975, v.á8, У 3, р. 488-494.

Jsaksson 3. — Acta physiol, Scand, 1983, v. 117, У 2, р. 281-286. (54) 4-ЙОДФЕНИЛЛАУРАТ, МЕЧЕННЫЙ РАДИОИЗОТОПАМИ ЙОДА, В КАЧЕСТВЕ РАДИОАКТИВНОГО СРЕДСТВА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ЛИПАЗЫ В ОРГАНИЗМЕ И ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ ДЛЯ ЕГО

ПОЛУЧЕНИЯ. (5?) Изобретение касается арилпроизводных лауриновой кислоты, в частности 4-йодфениллаурата, меченного радиоизотопами йода (ФЛ), который мо„„SU„„1303598 - А1 (д 4 С 07 С 69/017, А 61 К 49/02, С 07 В 59/00 жет быть использован в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности липазы в организме, и немеченного 4-йодфениллаурата (НФЛ) — промежуточного продукта для синтеза ФЛ. Для выявления соединений, обеспечивающих точность определения ферментативной активности липазы, были получены новые ФЛ и НФЛ. Последний получают реакцией йодфенола о с лауроилхлоридом при 50-60 С в среде бензола в присутствии пиридина, ФЛ получают радиоизотопным обменом радиоактивного йодида натрия с НФЛ.

Выход НФЛ 70Х, т.пл. 43-44 С. Радиохимический выход ФЛ 80-827., чистота а

96-98Х. ФЛ дает воэможность с высокой точностью оценить внешнесекреторную функцию поджелудочной железы (активность липазы) по измерению радиоактивности мочи. В сравнении с известным 4-нитрофениллауратом активность липазы снижается в 3-4 раза с

ФЛ против снижения активности в 2 раза. 2 с.п. ф-лы, 3 табл. CD

Изобретение относится к органической химии, конкретно к новым химическим соединениям: 4-иодфениллаурату, меченному радиоизотопами иода, формулы

" J -©-Осо(сн,)„сн, (1) и промежуточному продукту для его получения, 4-иодфениллаурату, формулы II -©-осо(сн,)„сн, Меченое соединение может найти применение как средство определения ферментативной активности липазы в организме.

Цель изобретения — выявление соединений, обладающих повышенной точ- 20 ностью при определении ферментативной активности липазы в организме, а также выявление соединений, позволяющих получить соединение формулы I с высоким выходом.

Синтез целевого продукта проводят по следующей схеме. 4-Иодфениллаурат получают взаимодействием 4-иодфенола с лауроилхлоридом в молярном соотношении 1:1,5 в бензольном растворе в присутствии пиридина с последующим. нагреванием реакционной смеси при 50о

60 С и выделением кристаллического продукта П ° 4-Иодфениллаурат, меченный радиоизотопами иода, получают 35 реакцией изотопного обмена радиоиодида натрия с 4-иодфениллауратом в этиловом спирте в присутствии одновалент. ной меди при рН 6-7.

Поскольку липаза секретируется поджелудочной железой и гидролизует субстраты в двенадцатиперстной кишке введенный перорально (внутрижелудочно)

4-иодфениллаурат, меченный радиоизо- 45 топами иода, может быть использован для исследования внешнесекреторной функции поджелудочной железы как в физиологических, так и патологических условиях. Метод позволяет прижизненные исследования с помощью наружной регистрации гамма-излучения радиоизотопов иода стандартной аппаратурой, применяемой в медицине и биоло ии Методика исследования заключа- 55 ется в сравнительном измерении раДиоактивности в моче и в эталоне и можетс быть выполнена с помощью простейшего радиометрического прибора. Кроме то98 2 го, предполагаемое соединение может найти применение в исследованиях на человеке, так как оно содержит радиоизотопы иода, разрешенные к исследованию в практической медицине.

Пример 1. 4-Иодфениллаурат.

К раствору 11,0 r (0,05 М) 4-иодфенола в 50 мл абс.бензола прибавляют 6,0 мл (0,075 М) пиридина и затем

16,4 г (0,075 М) хлорангидрида лауриновой кислоты. Реакционную смесь нагревают час при 55-60 С при перемешивании, охлаждают до комнатной температуры, выливают в ледяную воду, выпавший осадок отфильтровывают, сушат. Полученный 4-иодфениллаурат перекристаллизовывают из гексана,т.пл.

43-44 С. Выход 7,0 г (70X от теор.).

Найдено,X: С 53,21, Н 6,58, J 31,67.

Вычислено для С„ H 7J0, 7: С 53,73, Н 6,71, J 31,59.

Пример 2 ° 4-Иодфениллаурат, меченный радиоизотопами иода.

В одногорлую колбу емкостью 1015 мл помещают 50 мг 4-иодфениллаурата, 3 мл этилового спирта, 2 мг однохлористой меди и 0,2 мл раствора иодида натрия (J или .1) без носителя общей активностью 20 мКи, Реакционную смесь доводят уксусной кислотой до рН 6-7, нагревают с обратным холодильником 3 ч при 80-90 С, фильо труют, разбавляют 20 мл воды. Выпавший продукт отфильтровывают, прбмы- вают холодной дистиллированной водой и растворяют в эфире. Эфир испаряют досуха и целевой меченый продукт растворяют в подсолнечном масле, доводя до нужной радиоактивной концентрации.

В табл. 1 приведены условия получения, радиохимический выход и радиохимическая чистота 4-иодфениллаурата, меченного радиоизотопами иода °

Идентификацию меченного радиоизотопами иода целевого продукта и определение его радиохимической чистоты проводили методом бумажной хроматографии в системе бутанол:аммиак: вода — 45: 1: 15.

Пример 3. С целью прекращения выделения липазы в кишечник крысам производят операцию перевязки протока поджелудочной железы. Контролем служат интактные,(нормальные) крысы. Крысам обеих групп внутрижелудочно вводят с помощью зонда 4-иодфениллаурат, меченный иодом - 125, 3 1 3035 в рас

ac:Tsoðå подсолнечного масла в о6ъеме О, 2 мл и s дозе 10 мкФ по радиоактивности. Животных заб1!вают через

1-24 ч после введения вещества, отбирают мочу и пробы органов и подвергают их прямой радиометрии сравнительно с эталоном, содержащим равное введенному количество радиоактивности.

Данные выражают в по отношению к введенному количеству вещества. 10

В табл. 2 приведена динамика радиоак активности в моче и щитовидной железе после введения 4-иодфениллаурата, м меченного иодом-125, нормальным крысам и крысам с перевязанным про- 15 током поджелудочной железы. Средние величины из 1.0-11 крыс на точку;

Л11наЗЫ, IP TV а - Ката-:ip PP !иi-;11 Ы1лаа тP EI и нывал!1тся с мочой.

Биохимические !е(алы с и ел ..-pl!I!1ÿ активности :!ппаэы вна «О;;1ппэм;1 таебуют инку б11пкк субс pclT;I 11 ферм(н а в искусственной сре;11 .! эмул1,гпранания cубс тра . л, Пам11ма,)!l л» противо показаний пля зондираяа!И1я, качес TIEo этих методов да настоя!цега вpe»e!111 неудовлетворительное, чта мешаеT широкому их применению и сказываются

Л Р! i I l 1 П П 1 1 л1. I Ь Н а т метал к".зан ак рас1цепленпе ф113 110:10 Гl I IЕ С на истинности резул!.та нкмает несколько 1ааав цпальной аппаратуры и менение предлагаемого нового субстрата лкшас ных недостатков, так к субстрата праисхаппт в тав анл 1пз за тp:6; ет спеааагентаг.Hpll— в качестве промежуточного продукта получения 4-иодфениллаурата, меченного радиоизотопами иода. следует что опе ких условиях к точна отражает уразень рация препятствует ерм

-ет ферментативному 20 активностк к Pe!Pe!I!I! . -шпазы в по;вке— гидролизу испытуемого в туемого вещества и на- лудочна:1 EI;P:iP3P, Вре.!Я авали а тивной метки в моче Та!.Им ааразом, о!!ах!1 коплению радиоактивной мическая апекватность, простота, быи щитовидной железе. строта, доступность, точность .11 отПример 4. Для исключения утствие протк гаказа .1й влияния неспецифического опер ц двергачи перевяз- ненни этого соединения делают возможного стресса крыс подвергали перев очной жечезы или ным массовые скрпнкн1овые исследова ке протоков поджелудочной железы ил ния. ложной операции (лапоротомии). 4,— ченный иодом-125 Диагностическая точность и эффек39 тивность метода определения активвволили внутрижелудочно, животных

1 ть е истрировали ности липазы с применение - т 4забивали, активность регист и ов едения метки. Эти иодфениллаурата существенно выше по сравнению с прототипом. Так, при опматериалы представлены в та л, ределении с помощью извес-,íàãî соедиоперация не влияет на гидролиз меченно- 35 нения в аналогичных модельных услого соединения и накопление метки в моче, виях (перевязка протоков поджелудочтогда как истинная операция резко ной желе . р . лезы к ыс и безбелковь!!! рацимоче на он у обезьян) активность панкреатиснижает накопление метки в моче н протяжении 5 сут после операции. ческой липазы оценивается сниженной

Изучение острой токсичности на мыи на мы- 40 вдвое тогда как активность предлаэ шах показало, что внутриж трижелудочное гаемого фермента уменьшена в 3-4 раза (l введение максимально возможнои дозы ( (табл. 1 и 2 примеры 3 и 4...

Э

4-иодфенйллаурата (500 мг/кг), в Формула и з о б р е т е н и я

143000 раз превышающей потенциальную максимальную клиническую дозу, не 45 1. 4-Иодфениллаурат, меченный равызывает признаков токсического пора- диоизотопами иода, формулы

° ллллили з илии,лил илилиии лли -©-ОСО(СН, !, Н, (11 ной и истин!1ай операции на накопле! (5 в качестве радиоактивного средства ние метки .J-4-иодфениллаурата в определения ферментативной активномоче, Средние данные из 5 крыс на сти липазы в организме. точку.

2, 4-Иодфениллаурат формулы IT.

Таким образом, представленные маО ОС О(С лаурат, меченный иодом-125, при внут- 2 1о 3 (ц) рижелудочном введении подвергается ферментативному расщеплению в тонком кишечнике как специфический субстрат

1303598

Т аб лица

Радиохимическая чистота

АктивУсловия реакции

Изотоп иода

Катализатор

РадиоГ!р имер ность, мКи химичесвремя, кий выч ход,7 рН целевого продукта,7.

СиС1

Г 50

"З 50

6,0

96

7,0

СиС1

98

7,0

3 82

Таблица 2

Время после введения, ч

Радиоактивность, 7, от введенной

Опыт (операция) моча щитовидная железа моча щитовидная железа

36,00+2,50

0,55+0,05

53, 00+3, 10

1,00+0,10

62,00+3,50

1,25+0,10.

75,00+3,00

2,00+0, 15

0,001

Таблица 3

Радиоактивность мочи, 7., от введенной

Время после

Контроль

Перевязка протоков

Ложная операция операции, сут

О, 001

0,00.1

0%001

О, 001

1,0021,20

10, 14 1,00

9,40+1,00

12,00+1,20

35, 00+1, 60

40, 104-2, 50

30, 00+2, 10

32, 40+2,00

СиС1 J 50

31, 00+2, 10 О, 05

36, 0012,00 О, 05

28,20+2, 15 0,05

30,00+2,50 0,05

10,20+i 00

О, 001

15 20+1,60

0,001

22, 50+1, 75

О, 001

62,00+2,00

0,10+0,01

0,001

0,15 О 01

О, 001

О, 15+0, 01

0,001

О, 10+0, 01

О, 001