Штамм @ @ ( @ )1206 серовара 065,используемый для получения диагностической агглютинирующей моноварной сыворотки
Штамм Vibrio cholerae (Uag) КМ-6
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
„„SU„„1273391 др 4 С 12 N 1/00
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
° ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
llO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3906453/28-14 (22) 15.03.85 (46) 30.11,86. Бюл. Р 44 (» ) Всесоюзный ордена Трудового
Красного Знамени научно-исследоваII тельский противочумный институт Микроб и Туркменская противочумная станция (72) Н. M. Остроумова, В. М. Развых, В. П, Мороз, А. К. Адамов, Г. И. Коровкина и О. С, Трушева (53) 576.8.093.1(088.8) (56) Штамм новый, в патентной и научно-технической литературе не описан. (54) ШТАММ VIBRIO CHOLERAE (Nag) 1206
СЕРОВАРА 065, ИСПОЛЬЗУЕМЫИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ АГГЛИТИНИРУ10ЩЕЙ
МОНОВАРНОЙ СЫВОРОТКИ (57) Штамм Vibrio cholerae (Nag) КМ-6 (1206) серовара 065 (коллекция живых культур Всесоюзного ордена Трудового
Красного Знамени научно-исследовательского противочумного института
"Микроб" ), используемый для получения диагностической агглютинирующей моноварной сыворотки.
1273391
490 Подпис ное
Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, уд. Проектная, 4
Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к лабораторной диагностике патогенных виброионов.
11елью изобретения является новый штамм Vibrio cholerae (Nag) 1206 знтеропатогенньгх вибрионов, относящийся к 065 серовару и служащий специфическим антигеном для приготовления моноварной сыворотки для идентификации патогенных вибрионов °
111тамм Vibrio cholerae (Nag) 1206 серовара 065 хранится в коллекции музея живых культур Всесоюзного ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательского противочумного института 11икроб" под N - KM-315 (1206).
Штамм Vibrio cholerae (Nag) 1206 характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиологобиохимическими свойствами.
Культурально-морфологические признаки. Обладает всеми свойствами, характерными для вида V. cholerae рода
Vibrio.
Подвижные, слегка изогнутые палочки, с полярно расположенным жгутиком, отрицательные. Спор и капсул не образует. Образует равномерное помутнение и нежную пленку на поверхности при по посеве íà IX-ную пептонную воду. На щелочном агаре образует дисковидные, прозрачные колонии диаметром 2-3 мм.
Не растет на средах с содержанием 7I0X NaCl °
Физиолого-биохимические свойства.
Оксидазоотрицательный,глюкозу окисляет и ферментирует на среде
Хью-Лейфсона. Ферментирует до кислоты без газа маннозу, сахарозу, маннит. Не ферментирует арабинозу. Образует индол, декарбоксилазы лизина и орнитина. Не образует дигидролазу аргинина.
Не агглютинируется холерными диагностическими сыворотками О, Инаба, Огава, PO и моноварными вибрионными сыворотками НАГ=вибрионов 02-064 сероваров. Лизируется холерными и НАГактивными фагамиДДФ,ТЭПВ-I и ТЭПВ-2.
Антигенные свойства.
Обладает специфическим О-антигеном. При иммунизации животных вызывает образование специфических агглютининов. Полученная сыворотка агглюBHHHIIH Заказ 6389/20 Ти тинирует штаммы .вибрионов гомологичного 065 серовара и не агглютинирует
НАГ-вибрионы гетерологичных (02-064) сероваров.
Пример. Для приготовления моноварной диагностической сыворотки из.культуры штамма Vibrio Nag 1206 готовят антиген по следующей прописи.
Сохраняемую в лиофильном состоянии культуру штамма Vibrio Nag 1206 растворяют 1Х-ной пептоновой водой (рН 7,6) в количестве 1 мл, переносят в пробирку с 5 мл 1Х-ной пептонной воды (рН 7,6) и вырашивают 4 ч I5 при 37 С, затем пересевают петлей на о агар, приготовленный на основе перевара из сердечной мышцы (рН 7,6), Посевы инкубируют при 37 С в течение
18-20 ч. Полученную микробную массу смывают физиологическим раствором рН 7,2 и кипятят при 100 С в течение
2 ч на водяной бане. Затем дважды отмывают физиологическим раствором (рН 7,2) с применением центрифуги, 25 контролируют на стерильность и применяют для иммунизации кроликов.
Кроликов иммунизируют трехкратно с трехдневным интервалом по следующей схеме: первую и вторую инъекции делают подкожно по 20 млрд. микробных тел, третью делают внутривенно по 5 млрд. микробных тел. На седьмые сутки после третьей инъекции кроликов обескровливают, сыворотку инак35 тивируют мертиолатом натрия 1:10000.
Титр сыворотки 1:800. Она специфична, гетерологических антител не содержит. Титр сыворотки определяют объемным методом серийных двухкрат40 ных разведений, начиная с 1:50 до
1:1600.
В качестве антигена используют
1 млрд. микробных тел взвеси живой
18-часовой агаровой культуры НАГ-виб45 рионов 065 серовара, которую добавляют к каждому разведению сыворотки из расчета 1:1 по объему.
Учет результатов производят через о
2 ч инкубирования при 37 С и последу50 ющего выдерживания 18-20 ч при 1820 С.
Использование предлагаемого изобретения позволяет повысить качество лабораторной диагностики кишечных заболеваний, вызываемых энтеропатогенными вибрионами.
