Способ получения производного гуанидина

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (1% (11) 1 б .l

c t

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н tlATEHTY

К> 3

К)

CO 3 3

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3412101/23-04 (22) 17. 03. 82 (31) 8132680 (32) 29. 10. 81 (33) GB (46) 23,11,86, Бюл. Я- 43 (71) Империал Кемикал Индастриз, ПЛС (GB) (72) Деррик Флит Джоунс и Кейт Олдхэм (GB) (53) 547.773.407(088,8) (56) Somerville А. R, Adenosine

3 :5 -©clic monophosphate and affective Disorders, — Biochem, Soc, Special Publication, 1973, 1, р, 127, Патент Великобритании

В 2052478А, кл. С 07 D 277/38, опублик, 1981, Патент Великобритании .Ф 2055800А, кл, С 07 D 277/38, опублик, 1981.

4 С 07 С 129/00, А 61 К 31/155, С 07 D 231/37 А (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНОГО ГУАНИДИНА формулы с=я x— - (сн 1 - с отличающийся тем,что производное гуанидина формулы

СГ СН2ЖН

C=N — (СН ) -С» н,к вводят во взаимодействие с ацетгидразидом в метаноле при комнатной температуре.

1 2729

25 — 30

Изобретение относится к способу получения производного гуанидина

N-ацетамино-5-j3 — (2-(2,2,2-трифторэ тип) гуанидино 1пир азол- ) -ил валерамидина — нового биологически активного соединения, которое может найти применение н биологии и медицине, Цель изобретения — получение нового производного гуанидина — малотоксичного соединения, обладаюшего более высокой активностью в качестве антагониста гистамина Н-2 и более высокой способностью ингибировать выделение желудочного сока, Пример, N — Ацетамино-5-(3-(2-(2 > 2, 2-трифторэ тил) гуанидино) пир азол-1-ил .валерамидин, раствор 5-(3- р-(2, 2,2-трифторэтил) гуанидино)пиразол-1-ил j налеронитрила (0,94 г) в 10 мл хлороформа о, и 10 мл метанола при 0 С насьицают газообразным хлористым водородом, По о лученную смесь выдерживают при 5 С в течение 24 ч, затем летучую часть выпаривают в вакууме при 40 С, Полученный сиропообразный продукт охлаждают на льду, обрабатывают охлажденным на льду водным раствором карбона та калия (50 мп, 10 мас,7/об,). Полу ченный маслянистый остаток экстрагируют хлороформом, сушат над сульфатом магния и упаривают в вакууме до получения имино-эфира н виде масла, 0,5 г имино-эфира растворяют в 50 мл метанола и добавляют 0,173 г ацетгидразида, Полученный раствор выдерживают при 20 С в течение 48 ч, затем летучую часть упаривают в вакууме до получения сиропообразного продукта, который кристаллизуют при растирании со смесью эфир/Ft 0Н (9:1 об/об) до получения Ы-ацетамино-5 3-(2-(2,2,2-трифторэтил) гуанидино) пиразол-1-ил) валерамидина, . т. пл, 142-144 С.

Исходный материал можно получить следуюшим образом, Пасту гидрида натрия 6,16 г (61 мас.Х, суспензия в жидком парафине) добавляют порциями за 30 мин к раствору 17,4 r 3-нитропиразола н 150 мл сухого диметилформамида и за счет наружного охлаждения льдом температуру поддерживают при 20

30 С ° Полученную смесь перемешивают н течение 45 мин и к,почти прозрачному раствору добавляют 25 г 5-бром77 2 налеронитрила за )О мин, полученную смесь перемешивают н течение 4 ч, Добавляют 450 мл воды н 450 мл этилацетата и верхний слой отделяют, су- шат над сульфатом магния и упаривают в вакууме до масла, которое представляет собой смесь 5-(3-нитропиразол-1-ил)валеронитрила и 5-(5-нитропиразол-l-ил)валеронитрила, Это масло делят на дне порции по 15 г, которые фракционируют на колонке с двуокисью кремния (3,5 см диаметром, 100 см длиной), элюируя при давлении

2 атм смесью этилацетата и петролейного эфира 60 — 80 С (3:7 об/об), Изомер-1,5 элюируют вначале, а за— тем 1,3-изомер ° T. пл ° 5-(3-нитропиразол-1-ил)налеронитрила 32 — 33 С.

К раствору 9,16 г 5-(3-нитропиразол-1-ил)валеронитрила в 200 мл сухого тетрагидрофурана добавляют

1,8 г палладия на угле (5 мас.7./мас.) .

Полученную смесь перемешивают при о

20 С в атмосфере водорода, За 4 ч по. глощае тся 3,? r водорода, Катализ атор отфильтровывают и полученный фильтрат упаринают в вакууме до получения 5- (3-аминопиразол-1-ил) валеронитрила в виде масла.

К раствору 7,0 r 5-(3-аминопиразол-1-ил)валеронитрила в 25 мл ацетонитрила добавляют 2,2,2-трифторэтилизотиоцианат 6,02 r ° Через

15 мин растворитель упаривают в вакууме до получения 5- {З-г3-(2,2,2-трифторэтил) тиуреидо пиразол-1-ил 1 валеронитрила н виде белого кристаллического вешества с т, пл, 96 — 98 С, l2,5 г указанной тиомочевины растворяют н 120 мл 8 М аммиака в спирте ° Добавляют 12,8 r окиси ртути (2) и полученную смесь перемешивают при

20 С в течение 30 мин, Полученную смесь отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме до получения 5- 3— i2-(2,2,2-трифторэтил) гуанидино) пиразол-)-ил)налеронитрила в виде масла ° Образец этого масла растноряют в ацетонитриле и добавляют 5 молярных эквивалентов малеиновой кислоты, К полученному прозрачному раствору добавляют эфир до получения кристаллического малеата, т ° пл ° 123

)25 "С, Проводят биологические испытания предлагаемого соединения, Активность как антагониста гистамина Н-2 демонстрируют на стандарт1? 72

1О

Составитель В ° Волкова

Техред Л.Сердюкова Корректор И. Муска

Редактор Н, Гунько

Заказ 6352/58 Тираж 379 Подписное

ВНИИПИ !"осударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 1 3035 ° Москва, Ж-35, Раушская наб ° ° д ° 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная,4 ном тесте — по его способности ингибировать вызванный гистаминам захват аминопирина в кислой среде париэтальных клеток °

Тест с аминопирином проводят следующим способом, Желудочную мукозу новозеландских бельtx кроликов выделяют из подлежащей мышцы и промывают в буфере 1, содержащем в 1 л, г: NaC1 8,007;

КС1 0,201; На НРО 0,113; КН РО

0,204; СаС1 2Н 0 0,132; MgC1 0,101;

2 2 глюкоза 1, причем рН устанавливают

7,4, посредством NaOH. Ткань мелко измельчают, суспендируют в буфере 1 и трижды в нем промывают, Затем ткань суспендируют в дисперсной среде: коллагеназа (Сигма Кемикал Ко, тип U)

100 мг и альбумин бычьей сыворотки (Майлз Лабораториз Лтд, фракция V) 2p

100 мг в буфере 1 ; 50 мл на 10 г чистого веса ткани и инкубиа руют при 30 С и рН 7, 4 (поддерживают при непрерывном регулировании) при перемешивании в атмосфере кислорода. 2S

Через 30 мин ткани дают осесть и надосадочную жидкость удаляют. Добавляют свежую дисперсную среду (50 мл на 10 г чистого веса ткани) и инкубирование продолжают, причем ткань широко диспергируют в железистые и полные клетки через 40 — 60 мин.

Все оставшиеся крупные кусочки ткани удаляют фильтрованием через нейлоно— вую сетку, Смесь железистых клеток и

35 клеток собирают центрифугированием при 200 x g и суспендируют в буфере

1, содержащем I 7. альбумина бычьей сыворотки (Майлз Лабораториз Лтд, фракция U) Далее клетки и железис40 тые клетки промывают трижды буфером 1 и суспендируют в буфере 2, содержащем среду Игла (500 мл), апротинин (Сигма Кемикал КО, 10 мг), HEPES (2-(4-(2-оксиэтил)пиперазин45 — 1-ил) этансульфокислоту, 150 мм, 977 4

20 мл), установленное рН 7,4 посредством NaOH; 150 мл на IO г чистого веса ткани. Тканевую суспенэию перемешивают в атмосфере кислорода при 32оС по крайней мере в течение

1 ч перед употреблением, Тканевую суспензию инкубируют с тестовым соединением и аминопирином (1О мкМ), 14 меченым С по диме тил амина группе (О,! мкК/мл) в течение 20 мин, Затем стимулируют захват аминопирина добавлением гистамина и ингибитора фосфодиэстераэы (ICI 63197) до ко-7 нечных концентраций 10 и 5 х 10 M соответственно, Через 18 мин клетки/ железы выделяют.из инкубационной среды фильтрованием суспензии через стеклянные микроволокнистые фильтры, Смесь клетки/железы быстро (менее 10 с) трижды промывают буфером

1, охлажденным льдом, С помощью сцинтилляционного счетчика определяют С, аминопирин, удержанный

14 тканью, степень ингибирования поглощения за счет тестового соединения рассчитывают по контрольному образцу, Концентрацию тестового соединения, которая дает 50Х-ное ингибирование, рассчитывают затем графически из серии тестов при различных концентрациях.

Для сравнения используют известное соединение — рецептор гистамина Н

2- гу ани дино-4-! 2- (2-ци ано-3-ме тилгуанидино) э тилтиометил) тиазол (соединение А) .

Полученные результаты показывают, что Соединение, полученное предлагаемым способом, дает 50Х-ное ингибирование в концентрации 0,0027 мМ, соединение А (сравнительное) — в концентрации 0,057 мМ.

При проведении испытаний на животных не замечают ни явной токсичности, ни побочных эффектов.