Способ определения неэстерифицированных жирных кислот в плазме крови

 

Изобретение относится к биохимическим исследованиям крови на неэстерифицированные жирные кислоты (НЖК). Цель изобретения - упрощение способа, повьшение точности и обеспечение раздельного определения высших жирных кислот и суммарного содержания жирных кислот. Цель дос .тигается благодаря использованию при титровании ионселективного электрода с жидкостной мембраной. Берут нитрабензольный раствор солей кристаллического фиолетового и жирных кислот каприновой, лауриновой, пальмитиновой, стеариновой, олеиновой , линолевой, арахиновой, бегеновой при соотношении (2,85-3,15):(1,9 i2 ,l): (0,95-1,05):(17-19):(5,7-6,3)г

CQO3 СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТОВ ИЕСИИХ

РЕСПУБЛИК

15п 4 6 01 Н 33/48 (21) 3558517/28-14 (22) 02.03.83 (4б) 15.06.86, Бюл. Ф 22 (71) Научно-исследовательский институт химии при Горьковском ордена

Трудового Красного Знамени государс. твенном университете им. Н.И.Лобачевского (72) И.А.Гурьев и М.Я.Штаерман (53) 612.397.23; 661.732.9 (088.8) (56) Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф,, Меньшиков В.В. Биохимические методы исследования в клинике. Ленинград, Медицина, 1976, с ° 210 — 211. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НЕЭСТЕРИФИЦИРОВАННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ В ПЛАЗМЕ

КРОВИ (57) Изобретение относится к биохимическим исследованиям крови на неэстерифицированные жирные кислоты (НЖК). Цель изобретения — упрощение способа, повышение точности и обес.„Я0„„1237973 А 1 печение раздельного определения высших жирных кислот и суммарного содержания жирных кислот. Цель дос;тигается благодаря использованию прн титровании ионселективного электрода с жидкостной мембраной. .Берут нитробензольный раствор солей кристаллического фиолетового и жирных кислот каприновой, лауриновой, пальмитиновой, стеариновой, олеиновой, линолевой, арахиновой, бегеновой при соотношении (2,85-3,15):(1,9— 2,1): (0,95-1,05):(17-19):(5,7-6,3) Е (7,6-8,4):(1,9-2,1):(0,95:1,05).

Титрование проводят с использованием смеси хлороформа, ацетона и воды в обьемном соотношении 3:6:100. В качестве титранта используют кристаллический фиолетовый в концентрации (3-5) 10 " M. По кривой титрования рассчитывают концентрацию. жирных кислот.

1237973 где С

С„

По кривой титрования определяют

4 точку перегиба и рассчитывают общую концентрацию жирных кислот. Общая концентрация жирных кислот (высших и низших) 1,3 М, высших жирных кислот 9 10 ь M.

Хроматографический анализ дает те же результаты.

Время анализа составило ll мин.

Изобретение относится к биохимическим исследованиям, а именно к клиническому анализу крови на неэстерифицированные жирные кислоты (НЖК).

Цель изобретения — упрощение способа, повышение точности и обеспечение раздельного определения высших жирных кислот и суммарного содержания жирных кислот.

Пример I. Для приготовления жидкостной мембраны для ионселективного электрода (ИСЭ) берут 5 мл нитробензольного раствора смеси кислот, содержащей каприновую (225 мг/л), лауриновую (150 мг/л>, пальмитиновую (75 мг/л), стеариновую (1350 мг/л), олеиновую (450 мг/л), линолевую (600 мг/л), арахиновую (150 мг/л), бегеновую (75 мг/л), что соответствует массовому соотношеипю кислот

3:2:I:18:6:8:2:1 (копцентрация каждой кислоты взята с относительной точностью 57). Затем к полученному раствору добавляют 3 мл (3-5) " 10 M

-з

Модного раствора кристаллического фиолетового (КФ), 10 мл воды, 20 мл нитробензола. Добавлением 0,1 М раствора натровой щелочи, рН смеси доводят до 10,5 — 11. После неремешпва на делительной воронке отделяют орга30 ническую фазу от неорганической.

Электрод готовят путем нанесения этой органической фазы на пористую перегородку.

В качестве вспомогател»ного нодйого раствора жидкостного электрода используют 1 10 "молярпый раствор натровых солей тех же кислот при рН 10 — 10,5, Пипеткой отбирают 0,5 мл плазмы крови первого больного и помещают в ячейку для титрования. Туда добавляют 0,6 мл хлороформа, 1,2 мл ацетона и 20 мл воды (объемное соотношение 3:6:100). рН смеси доводят,цо

I0,5. Титрование проводят 3,88 10 М водным раствором кристиллического фиолетового на иономере универсальном ЭВ-74 с использованием ИСЭ с жидкой мембраной, приготовление которой описано вьш|е. Строят кривые и из кривой титрования видно, что точка перегиба достигается при добавлении 0,37 мл КФ.

Концентрацию НЖК в крови определяют по формуле

С С е 1 У 3 88:IО 0 37 — 2,87 IO M

2 — кбнцентрация НЖК крови, М1, — концентрация кристаллического фиолетового, М;

V — объем пробы плазмы крови, мл;

Ч„„ — объем кф, мл.

Таким образом, концентрация НЖК в плазме 2,87110 М, время ;определения 9 мин.

Контроль проводят хроматографическим методом. Концентрация НЖК крови, полученная двумя способами, совпадает с точностью до 5%.

Иэ вида кривой титрования можно заключить, что в пробе присутствуют в основном высшие жирные кислоты.

Концентрация высших жирных кислот

C„6 H e oc e o K 90# общей концентрации жирных кислот.

П р и и е р 2, Анализируют плазму крови второго больного. Объем пробы и условия определения такие же как в примере 1.

По кригой титрования определяют точку перегиба и рассчитывают общую кснцептрап:;to жирных кислот. Концентрация жирных кислот (высших и пизщих) 17 10 " M, высших жирных кислот

9 10 " 11, что соответствует 50/.

Хроматографический агализ подтверждает это количестнэ и дает ту же каественную картину. Время анализа

11 мин.

Пример 3. Анализируют плазму крови третьего больного. Объем пробы и условия определения такие же, как в примере 1.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я

Способ определения неэстерифицированных жирных кислот в плазме крови путем титрования, о т л и ч а юDT, и и с. я тем, что, с целью упрощения способа, повышения точности и обеспечения раздельного определения высших жирных кислот и суммарного содержания жирных кислот, для титрования используют ионселективный элект-

Составитель Н. Гуляева

Техред M.Õîäàíè÷

Редактор Н.Горват

Корректор А.Обручар

Заказ 3282/44

Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная,4 3 I .род с жидкостной мембраной, содержащей раствор в ни1робензоле солей кристаллического фиолетового и жирных кислот каприновой, лауриновой, пальмитиновой, стеариновой, олеино.вой, линолевой, арахиновой и бегеновой при массовом соотношении (2,85 †3,15):(1,9 — 2,1):(0,95—

237973 4

1 05): (1.7 — 19): (5,7 — 6,3): (7,6—

8,4):(1,9 — 2,1):(0,95 : 1,05), титрование проводят в двухфазной системе, содержащей смесЬ хлороформ ма ацетона и воды в объемном соотношении 3:6:100, а в качестве титранта используют кристаллический фйолетовый в концентрации (3-5) ° 10 M.