Способ криоконсервирования тканевых препаратов почки

СО)ОЭ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

09) (11) (51) ф А 01 N 1/02

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЭОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ASTOPCHOIVIY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

4А . /

/ л Я (21) 2737943/28-14 (22) 19.03.79 (46) 15.02.86.Бюл. )1 - 6 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР (72) А.М.Белоус и Н.П.Суббота (53) 615.475(088.8) (56) Wlihk G.Т. Theres step. cooling а preservation mether for à olnef

red hlat cells J. Griobiol, 1977, N 14, s.409-417. (54)(57) СПОСОБ КРИОКОНСЕРВИРОВАНИЯ

TKAHEBblX ПРЕПАРАТОВ ПОЧКИ путем трехэтапного охлаждения в присутствии диметилсульфоксида с охлаждением о на третьем этапе до -196 С в жидком азоте, отличающийся тем, что, с целью увеличения срока хранения ткани почки, охааждение на первом этапе осуществляют от 37 до 4 С со скоростью 5-7 град/мин, на втором — со скоростью 1.

1,5 град/мин до 1-6) †(-8) С и на третьем этапе — со скоростью 300—

400 град/мин, затем ткань погружают в раствор, содержащий сукцинат натрия, глутамат натрия, аденозинтрифосфат, цитохром "С", версен, сахарозу и фосфат при следующем соотношении компонентов, моль:

Сукцинат натрия 0,03-0,04

Глутамат натрия 0,03-0,04

Аденозинтрифосфат

Цитохром "С"

Версен

Сахароза

Фосфат

1210763

Сост ав ит ель С. Малютина

Редактор М.Товтин Техред А.Бабинец Корректор А.Обручар

Заказ 564/5 Тираж 679 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и .открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул.Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, а именно криомедицине, и касается консервирования биологических объектов.

Цель изобретения — увеличение срока хранения ткани почки.

Способ осуществляют следующим образом.

Разнотканевые препараты почки измельчают ножницами в холодной среде выделения, помещают в раствор для консервирования, содержащий сукцинат натрия, глутамат натрия, аденоэинтрифосфат,. цитохром "С", версен, сахарозу, фосфат. Биоматериал охлаждают на первом этапе от 37 до

4 С со скоростью 5-7 град/мин, на втором — со скоростью 1-1,5 град/мин до 1-6) — (-8) С и на третьем этапе — со скоростью 300-400 град/мин с охлаждением до †1 в присутствии дю етилсульфоксида.

Пример, Образцы коры почки крысы толщиной 0,4-0,5 мл измельчают ножницами в холодной среде выделения помещают в раствор для консервирования, содержащий 107-ный диметилсульфоксид, 0,03 М сукцината натрия, 0,03 М глутамата натрия, 0,01 М аденозинтрифосфата, 30 10 M цитрохрома

"С" О, 1.10 М версена, 0,25 сахаро<0 зы 0,001 M фосфата, рН среды — 7,4.

Биоматериал помещают в полиэтиленовый контейнер и охлаждают от 37 до о

4 С со скоростью 5-7 град/мин, затем замораживают со скоростью l — .

15 1,5 град/мин до -8 С и погружают в о жидкий азот при -196 в присутствии диметилсульфоксида со скоростью 300400 град/мин и хранят необходимое время. Время хранения препарата может

20 быть до одного года. Предложенный способ позволяет увеличить срок хранения препаратов до двух лет по сравнению с известным (17 ч).