Состав для хранения эмбрионов

 

СОСТАВ ДЛЯ ХРАНЕНИЯ ЭМБРИОНОВ , содержащий среду 199, отличающийся тем, что, с целью повышения защитных свойств при хранении бластоцист, он дополнительно содержит сыворотку крови, глюкозу, бычий пролактин при активности 5м.ед. в 1 мг и поливинилпирролидон при следзтощем соотношении, компонентов, мае.%: 20-25 Сыворотка крови 0,07-0,12 . Глюкоза Бычий пролактин при активности 5 м.ед, 0,008-0,012 в 1 мг Поливинилпирроли0 ,4-0,8 дон Среда 199До 100 (Л с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ

Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

0,008-0 012

0,4-0,8

До 100

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 2842156/30-15 (22) 15.08.79 (46) 23.07.85. Бюл. ¹ 27 (72) З.А. Руткис и Б.И. Протасов (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт разведения и генетики сельскохозяйственных животных (53) 591.39(088.8) (56) "Science", 1950, 111, р. 544545. Джон Пол. Культура клеток ткани, Медгиз, 1962. (54)(57) СОСТАВ ДЛЯ ХРАНЕНИЯ ЭМБРИОНОВ, содержащий среду 199, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью

„„Я0„„1168175 А повышения защитных свойств при хранении бластоцист, он дополнительно содержит сыворотку крови, глюкозу, бычий пролактин при активности 5м.ед. в 1 мг и поливинилпирролидон при следующем соотношении, компонентов, мас.Е:

Сыворотка крови 20-25 . Глюкоза 0,07-0, 12

Бычий пролактин при активности 5 м,ед. в1 мг

Поливинилпирролидон

Среда 199

1168175

20-25 40

0,07-0, 12

Сыворотка крови

Глюкоза

Количество ингредиента, мас., в составе з

Ингредиент

20,0

25,0

23,0

Сыворотка крови

0,12

0,07

O 1O

Глюкоза

Бычий пролактин при активности 5 м.ед» в 1 мг.

О, 012

0,8

0,010

О, 008

0,6

0,4

ПВП

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к трансплантации эмбрионов и хранению их преимущественно на стадии бластоцисты.

Известно хранение эмбрионов (без 5 замораживания) B средах Кребс-Рингера, Хэма Ф-10, ТС-199, в инактивированной сыворотке крови, позволявшие эмбрионам сохранять жизнеспособность в течение 24-48 ч. Эмбрионы кролика на стадии бластоцисты удается хранить при +10 С в этих средах только 24 ч и выживают при этом только 18»8 эмбрионов 1 ).

Наиболее близким к изобретению 15 является состав для хранения эмбрионов, содержащий среду 199, которая имеет 46 компонентов (в их числе полный набор аминокислот), а также водорастворимые витамины и АТФ как 20 источник энергии. Готовится среда

199 на сбалансированном солевом растворе Хэнкса (2 J.

Однако среда 199 недостаточно адекватна для культивирования эмбри- 25 онов и еще менее адекватна она для хранения их. Результаты культивирования н хранения эмбрионов в этой среде крайне низки.

Цель изобретения - повышение защитных свойств состава при хранении бластоцист

Цель достигается тем, что состав дополнительно содержит сыворотку крови, глюкозу» бычий пролактин lIpH активности 5 м.ед. в 1 мг и поливинилпирролидон при следующем соотношении, мас. :

Бычий пролактин при активности

5 м.ед. в 1 мг О, 008-0, 012

Поливинилпирролидон 0,4-0,8

Среда 199 До 100

Пример. После получения бластоцисты промывают составом, содер жащим среду 199, сыворотку крови, глюкозу и бычий пролактин в указанных соотношениях, и затем этот состав помещают в холодильник с температурой 1-16ОС на 5 мин.

Введение поливинилпирролидона (ПВП) осуществляют в холодильнике, вводя по 1/4 всего количества с ин, тервалами в 5,10 и 20 мин. После хранения в течение 24-96 ч бластоцисты в предлагаемом составе переносят в бокс и ступенчато разбавляют предлагаемым составом без ПВП, промывают и ставят на культивирование в таком же составе (без ПВП) для оценки жизнеспособности при дальнейшем развитии или трансплантируют реципиентам.

При эксперименте используют различ" ные соотношения ингредиентов (см. таблицу) °

Как видно из таблицы, наиболее адекватным для культивирования н хранения эмбрионов является состав 2» который позволяет на 25-30 повысить сохранность эмбрионов в течение 4 сут без необходимости их глубокого замораживания.

Предлагаемый состав снижает затраты труда при кратковременном хранении эмбрионов и повышает эффективность использования доноров эмбриI онов.

1168175

Продолжение таблицы

Ингредиент

До 100

До 100

До 100

Среда 199

100, 0

98,5

94,3Составитель И. Тареева

Техред С.Мигунова

Редактор Н. Бобкова

Корректор В. Синицкая

Тираж 743

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 .

Заказ 4529/4

Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Процент развивающихся бластоцист кролика после хранения и культивирования

Количество ингредиента, мас.7, в составе г з