Способ определения чувствительности малярийных паразитов грызунов к хлорохину

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МАЛЯРИЙНЫХ ПАРАЗИТОВ ГРЫЗУНОВ К ХЛОРОХИНУ путем инкубации пораженных эритроцитов с хлорохииом, отличающийся тем, что с целью ускорения и упрощения способа, инкубацию проводят в течение 3-5 ч, далее эритроциты осазедают, а к супернатанту добавляют смесь бромтимояо вого синего, фенолового красного и дистиллированной воды, взятых в соотношении 0,5:0,5:1000, и при окрашивании пробы в красный или фиолетовый цвет определяют Чувствительность паразита к хлорохину.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU 11 745

4(51) G 01 N 33 48 р г„" кд г1 щ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H АВТОРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Ъ»

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3581606/28-13 (22) 23. 02. 83, (46) 23. 05. 85. Бюл. В 9 (72) Д. А. Нуштаев и ф, Ф. Сопрунов (71) Ордена Трудового Красного Знамени институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е. И. Марциновского (53) 616.07(088.8) (56) : Bieckmen К. et а1. 1.апсей, 1978, ч. I, И 8054, р. 22-23. (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МАЛЯРИЙНЫХ ПАРАЗИТОВ ГРЫЗУНОВ К ХЛОРОХИНУ путем инкубации пораженных эритроцитов с хлорохииом, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощении способа, инкубацию проводят в течение 3-5 ч, далее эритроциты осаждают, а к супернатанту добавляют смесь бромтимолового синего, феиолового красного и дистиллированной воды, взятых в соотношении 0,5:0,5:1000, и при окрашивании пробы в красный или фиолетовый цвет определяют чувствительность паразита к хлорохину.

57458

Составитель И. Емельяненко

Редактор Н. Тупица Техред Т.Маточка Корректор A. Тяско

Заказ 32И/43 Тираж 897 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

Москва !13035, Ж-35 ° Раушская наб., д. 4/S филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

l 11

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и в частности к действию антималярийных препаратов.

Цель изобретения - ускорение и упрощение способа.

Пример. Из орбитальной вены мыши, зараженной малярией, берут кровь, смешивают ее с изоосмотичес" ким солевым раствором s соотношении

I:10, центрифугируют 5 мин, супернатант отсасывают и к осадку прибавляют солевой раствор того же состава в таком объеме, чтобы. концентрация пораженных эритроцитов составляла около 50 тыс. в 1 мкл суспензии. Полученную суспенэию поровну разливают в пять пробирок с хлорохином в концентрации от 0,1 до 0,5 мг основания на 1 мл суспензии. В шестой пробиркесуспензия без препарата. Пробирки о ставят в термостат на 3-5 ч при +37 С. з Суспензии периодически перемешивают.

После инкубации эритроциты осаждают центрифугированием и к супернатанту прибавляют 2-3 капли индикатора рН следующего состава: бромтииоловый синий 5 мг, феноловый красный 5 мг дистиллированная вода. 10 мл.

В пробирках — 5 окраска индикатора меняется от темно-желтой до темнокрасной, в пробирке 6 — светло-желтая

15 окраска. По изменению окраски судят о действии хлорохина: чем ближе спектр к фиолетовой области, тем сильнее влияние хлорохина..