Способ окрашивания органов мочевыделительной системы при гистотопографических исследованиях

 

СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ ОРГАНОВ МОЧЕВЫДЕЛИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ГИСТОТОПОГРАФИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ,включающий обработку растворами фуксина и пикриновой кислоты, отличающийся тем, что, с целью дифференцированного выявления мышечной и соединительной ткани, органы перед обработкой выдерживают в 0,2-0,3%ном спиртовом растворе карболовой кислоты , а фуксин берут в виде 0,3%ного раствора на фосфатном или цитратном буфере при рН 7,2-8,0, обработку пикриновой кислотой ведут в присутствии глицерина в соотношении 1:1.

СООЗ СОВЕТСКИХ

ШИЛ%

РЕСПУБЛИК ((9) SU ((() .ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

И ОТНРЬГГИЙ (21) 3431954/28-13 (22) 29.04.82 (46) 15.02.85. Бюл. Л"- 6 (72) Н.Л.Кернесюк (53) 616-008 (088. 8) (56) 1. Ромейс Б. Микроскопическая техника. M., 1954, с. 399-405.

2. Лилли P. Патогистологическая техника и практическая гистохимия.M., 1969, с. 498-503. (54)(57) СПОСОБ ОКРАИИВАНИЯ ОРГАНОВ

МОЧЕВЬДЕЛИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ГИСТОТОПОГРАФИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ, вклю4(5ц С 01 N 1/28, А 61 В 10/00 чающий обработку растворами фуксина и пикриновой кислоты, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью дифференцированного выявления мышечной и соединительной ткани, органы перед обработкой выдерживают в 0,2-0,37.— ном спиртовом растворе карболовой кислоты, а фуксин берут в виде 0,3Жного раствора на фосфатном или цитратном буфере при рН 7,2-8,0, обработку пикриновой кислотой ведут в присутствии глицерина в соотношении

1:1.

1139704

Изобретение относится к способам дифференциальной окраски тканей, а именно мышечной и соединительной, и может быть использовано при макромикроскопическом препарировании и 5 фотографировании мышечных структур органов в анатомии, гистологии и топографической анатомии.

Известен способ окраски мышечных и соединительнотканных структур различными минеральными и органическими красителями, в растворах которых проводят окраску тонких (до 10 микрон) срезов органов и тканей 1 13.

Наиболее близким к предлагаемому 15 является способ окраски мьппечной и соединительной ткани по Ван-Гизону насьпценным раствором пикриновой кислоты и 1 -ным раствором фуксина, состоящий в том, что небольшие ку- 20 сочки фиксированных в растворе формалина органов подвергают обезвоживанию, заключают в парафин или целлоидин, затем на микротоме готовят тонкие гистологические срезы, депарафинируют их в хлороформе и окрашивают ядра гематоксилином Вейгерта, мышечную ткань — раствором пикриновой кислоты, соединительную ткань — раствором фуксина. Окрашенные срезы 30 просветляют в карболксилоле и заключают в канадский бальзам или другие прозрачные среды между предметным и покровным стеклами (2 1.

Известные способы позволяют дифференцировать мышечные и соединительно-тканные элементы нормальных и патологически измененных органов и тканей при гистологических исследованиях, т.е. на тонких срезах, по- 40 лученных из небольших кусочков органов, однако непригодны для оценки структуры мьппечных слоев целых органов методом препаровки.

Цель изобретения — дифференцированное выявление мышечной и соединительной ткани.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу окрашивания мочевьщелительной системы при гистотопографических исследованиях, вклю- . чающему обработку растворами фуксина и пикриновой кислоты, органы перед обработкой выдерживают в 0,2-0,3 ном спиртовом растворе карболовой кислоты, а фуксин берут в виде 0,3 .ного раствора на фосфатном или цитратном буфере при рН 7,2-8,0, обработку ю пикриновой кислотой ведут в присутствии глицерина в соотношении 1:1.

Мышечная ткань при нанесении крат сителей на орган в щелочной среде окрашивается в золотисто-желтый цвет, а соединительная — в красный. При использовании более концентрированного

0,5-1Х-ного раствора карболовой кислоты окрашивается соединительная ткань органов мочевыделения, но не дифференцируется мьппечная ткань (она как и соединительная окрашивается в красный цвет). При фиксации органов в 40-50 градусном спирте или спиртовом растворе карболовой кислоты в концентрации О, 1Х и ниже не окрашивается соединительная ткань, недостаточно окрашивается мышечная ткань

Четко дифференцируются соединительная и мышечная ткани мочевыделительных органов при обработке 0,2-0 3 ным спиртовым раствором карболовой кислоты.

Устойчивая цветовая дифференциация мышечной и соединительной ткани органов мочевыделительной системы при окраске их пикриновой кислотой и фуксином происходит в фосфатной или цитратной буферной среде при рН 7,28,0, При подкислении среды не дифференцируется мышечная ткань, а при рН среды более 8 снижается устойчивость окраски, т.е. ткань быстро

"выцветает". Кроме того, среда мутнеет, что затрудняет фотографирование объекта.

Пример, Орган или комплекс органов мочевьщелительной системы промывают в проточной воде в течение

3-4 ч, затем фиксируют их в течение

1-3 дн. 0,2 -ным спиртовым (40-50 ) ) раствором карболовой кислоты. Окраску мышечной и соединительной тканей производят во время гистотопографического исследования и препарирования под микроскопом MBC-1 при увеличении от 4-6 до 50 раз. Для этого органы помещают в фосфатный или цитратный буфферный раствор рН

7,2-8. Насыщенный раствор пикриновой кислоты смешивают в равных частях с безводным глицерином. На препарируемый орган тампоном поочередно наносят 1 -ный раствор фуксина и насыщенный раствор пикриновой кислоты с глицерином. Соединительная ткань

Составитель 3.Вальковская

Редактор С.Лисина Техред О.Неце Корректор С.Шекмар

Заказ 214/17, Тирах 462 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП"Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 окрашивается в розовый или красный цвет, а мышечная — в золотисто-желтый цвет. Окраска сохраняется в течение.нескольких часов и мокет быть усилена или возобновлена повторным нанесением красителей.

1139704 4

1. Предлагаемый способ позволяет препарировать, рассматривать и фотографировать структуры органа в отразкенном свете. Окраска мышечной и соединительной тканей четкая, что IlosBoJIB ет изучать структуру органа.