Штамм @ @ @ детоксикатор полихлорпинена
Штамм Serratia marcescens ВКМ В10Д (Всесоюзная коллекция микроорга .низмов при институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР) детоксикатор полихлорпинена.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
Ä SUÄÄ 1109431
З(Ю С 12 М 1/ОО
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ ИОТНРЫТИЙ (21) 3480246/30-15 (22) 15.06.82 (46) 23.08.84. Бюл. В 31 (72) A.Ô. Скурьят, А.П. Молчан и Е.M. Бунякина (71) Белорусский научно-исследовательский институт защиты растений (53) 632.95.024.11(088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР Р 647339, кл. С 12 К 1/00, 1978.
2. Моложанова E.Ã., Ремизова Л.Б.
Детоксикация хлорофоса почвенными микроорганизмами. — "Химия в, сельском хозяйстве", 1973, М- 10, с. 41-44. (54) ШТАММ SERRATIA MARCESCENS ВКИ В10Д-ДЕТОКСИКАТОР ПОЛИХЛОРПИНЕНА. (57) Штамм Serratia marcescens ВКМ В10Д (Всесоюзная коллекция микроорганизмов при институте биохимии и физи. ологии микроорганизмов АН СССР) детоксикатор полихлорпинена.
> (09431
Изобретение относится к сельско-хозяйственно(1! микробиолог.iii и может
obITb испо п(>зОванс для защ>(тbl Окружа(о.
IlIplI среды от загрязнения почвы по.и!в хлорпиненом.
Полихлорпипен (ПХП) С„о П С1,,— инсектицид кишечного и контактного деиствия q широко приме((5(e > ся д (я борьбы с обыкыо(зеннь(з(„восточны(! (3-. черным свекловичными дслгоносикамн на посевах сахарной свеклы, 5(((-(ь(нкамп и имаго колорадского жука, клубеньковыми долгоносиками на посевах зерно-бобовых культур
Препарат высокоэффективен в бo13b(3e 1 с вредителями сельскохозяйственных кул(> (yp > Одна(co тОксичен дз(я жи(зс (нь(х и человека ii длительно сохраняется в обьект((:< скружа(о(((е((среды„
Известен штамм Pseuc70monas ae! Li 2Q
gi.nosa 640 ic> облада(оший способностью к деградации ДЛТ, включаюшей полное дехлорирование и раскрытие одного из колец молекулы пест(гдида (1 J.
Известны штаммы бактерий, например 2;
Sarcina Г1аvа> Hacil mesenter„Bac.
sue t обладающие способное оь(о разлагать хлорофос (2 .
Цель изобретения — штамм микроорганизма, обладающий способностью к деградации полихлорпинена.
Поста(зленная цель достигается тем„ что в качестве детоксикатора поли-хлорпинена использу(от штам..i Яегп(с:(а
marcescens БКМ (3-10Д (Всесоюзная .3; коллекция микрооргапиз((стз при гп(ституте биохимии и физиолог>и! микроорганизмов АН СССР) .
Йта(((>! Serra (:з.а (((а((сеясе1(я БКМ В-10/7 имеет следующ((е характеристики. ,7((Морфологические и культуральные признаки штамма бактерии S. marcеяcens ИЛ В вЂ” 10Д.
Клетки мелкие, пало>(ко(зиднь(е 0,61,0х0,5, одиночные. илп соединены в короткие цело (к(! пс 3-6 клеток, подвижные имеют 4 и боз ее жгутко(з, перитрих > ра((От(зицате.г!»(>bie °
Колонн!и на агаро(зь х сред>(х,МП(!. и др.) и iia жеЛатипе небольшие,, г,-гадкие или зернистые, окрашены в те.-ьнои ярко-красный цвет с метал-«Ia< схим блеском. На карто (ельных гласт((нках, на бело;! хлебе пигмент кроваво-красный. Б глубине посева колонии бесцветнь(е. Пигмент продигиоз>ип раство.ряется в эфире, спирте: в щелочной среде жел алый, л кислой — фиолетовокрасный.
<оиз(30. Огические и биохимические.->ризнаки.
Xo73oiHo (3ac(e На }3cex обычных средах и на органических субстратах; не растет на синтетических срецах с l«(-.åðaiibíü((I азотом. Желатину раз;,((жает, молоко свертывает. На гл(окозе образует уксуснуlo, муравьиную, 5(нтарну(о .I .левсвращающую молочную кислоты, этиловый спирт, водород и лругие соединения; нитраты восстанавливает до нитритов. Факультативный о аэроб: оптиум температуры 25-30 С, о
iie растет при 37 С. Обнаруживается в воде, почве и на продуктах питания.
Пример 1. Б стеклянные сосу—,!I! 1000 г стериль(>ой почвы вносят
iio 10 I(3! суспензии клеток >сг. шагсеяс Dÿ, Вас, 11!es vulg. Бас. (((еяаter, что составпяет (0,935 10э) 10 к;(еток и 10 мг/кг 652-ной эмульсии (>олихлсрпинепа (6,5 мг/кг действуэзщего вещества), что в 2 раза превышает максимальную концентрацию пес(п(ида, определяемую в пахотном гор((зс(((е почвы. После обработки посевов картофеля протиь колорадского жука ((о>(ву тщательно перемешивают, доводят до 603 влажности стерильной водой и ставят в термастат на 30 дней
: из и 24-26 о (.
Через 10 и 30 дней методом тонко-! лойпсй хроматографии определяют остаточньк количества полихлорпинена в почве. Резуль(аты исследований, представленные в табл.1, показывают, что ((етоксикация полихлорпинена в варна:(та . с микроорганизмами Вас.
mesc»tcricus vulgatus (I Bac,llIegate.iuIï несколько быстрее, чем в контроI Ci °
Внесение в почву суспензии клеток штамма бактерии Serratia marceso.еп > Б&Х Б-10Ц (I течение первых
10 дней опь(та le вызывает существенного рази;ч;(я D детоксикации полиx opt(;. пена i0 сравнению с другими микроорган.:.(ямами. Однако через месяц.зызывает почти полную детоксикацию попик.(арпиiic.на, остатки инсектицида определ(потся в количестве 0,0
0,003 (г/1сг.
П р и м e I> 2. На картофельное поле 0,025 га после уборки урожая на ка;кдый 1 м- почвы вносят ручным ранцсвым опрыс :(((зателем марки ОПР-A.
3 г пс>лихлорпинена (расход жидкости
600 л/га) из расчета 70 мг/кг пахотного горизонта почвы (6,5 мг/кг
1109431 д.в.) 65Е-ной эмульсии полихлорпинена. Одновременно в почву опрыскивателем вносят на каждый 1 м 0,06 мл суспензии клеток штамма Serratia
marcescens ВКМ В-10Д, что соответствует 0,935 10 кл/мл по международному стандарту, Через 10 и 30 сут после закладки опыта отбирают пробы почвы пахотного горизонта 0-20 см и методом тонкослойной хроматографии определяют остаточные количества полихлорпинена. Результаты исследований, приведенные в табл.2, показыsaMT, wTo peTozcHKavxrs noJm opnHHeна в природных условиях (средняя
О температура воздуха 7,8 С, влажность
84Х, количество выпавших осадков
Содержание д. в ПХП, мг/кг почвы
Опыт через
i0 дней 1977 через 30 дней
1978 1979
1980
1,543
0,292
0,444
0,282
0,311
Стерильная почва
+ Вас.mesentericus
sulgatus
0,838
0,368
О, 156
0,113
Стерильная почва+
+ Bac. megaterium
О, 176
0,349
0,164
1, 188
9,0
0,008
Следы
Следы
Таблица 2
Опыт
Повторность
1,537
1,086
1,427
1,350
0,302
0,251
0,236
0,263
Среднее
Контроль (стерильная почва) Стерильная почва+
+Serrutia marcescens. 0,731
ПХП 10 мг/кг по препарату + Serratia
marcescens BKM В- IOl3
52 мм) В опыта ; с микроорганизмом
ВИ1 В-10Д в течение первых 10 сут идет несколько бьк трее, чем в контрс-. ле. Через 30 сут детоксикавия воз5 росла по отношению к контролю в 5 раз.
Таким образом, штамм бактерии Serratia marcescens В1С1 В-1ОД практически полностью разлагает стош<ий хлорорганический инсектицид полпхлорпинен в почве, в то время как Вас, mesentericus vulg и Вас.. megaterium разлагают его только астично. Serratia шагсезсепв BKN В-10Д эсЬфектпвный детоксикатор полпхлорппнена и может быть использован для защиты окружающей среды от загрязнений этим пестицидом.
Таблица 1
110943 1
Продолжение таблицы 2 ание д,в ПХП, мг/кг, за период после обработки сут
Повторность
Опыт
21.03.82
0.82
ПХП 10 мг/кг по препарату (контроль) i,627
1,293
1, 100
1,340
2,291
1, 758 623
1,891
Среднее
Составитель P. Куриленко
Редактор С. Патрушева Техред Т.Фанта Корректор О. Билак
Заказ 6003/18 Тираж 522 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4