Способ определения тетрациклина

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕТРАЦИКЛИНА путем обработки анализируемой пробы раствором гидроксида натрия при рН 9,5-10 с последующим фотометрированиём полученного раствора , отличающийся тем, что, с целью повышения селективности способа, полученный после обработки анализируемой пробы гидрокСИДСФ4 натрия раствор предварительно выдерживают до появления красного цвета. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

Ц

РЕСПУБЛИК

3 Р G 01. N 21/78

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTMA

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ,ггг г (21) 34824.56/23-04 .(22) 02 08.82 (46) 23.03.84. Бюл. В 11 (72) О.П.Соболева (71) Дальневосточный государственный университет (53) 543.432,(088.8). (56) 1. Гров Д.С. и др. Руководство по лабораторным методам исследова;ния антибиотиков. М., "Медицина", .1958, с. 78

2. Соловей H.Н., Сааведра Н.Ф.

Фотометрическое.определение тет рациклина гидрохлорида. - "Фарма:ция", 1974 23, Р 4, с. 72

3. Полюдек-Фабинй Р. и др. Органик ческий анализ..Л.; "Химия", 1981, с. 474 (прототип).

„.SU„„1487 А (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕТРАЦИКЛИНА путем обработки анализируемой пробы раствором гидроксида натрия при рН 9,510 с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повыщения селективности способа, полученный после обработки анализируемой пробы гидроксидом натрия раствор предварительно выдерживают до появления красного цвета.

1081487

Hp и м е р 2. Точную навеску препарата (0,0125 г) растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе на 25 мл. Берут приготовленного раствора 0,25, 0,5,,2,5 мл в мерные., колбы на 25 мл и доводят до мет" ки раствором едкого натра, рН которого 10,5 мл и далее поступают, как в примере 1. Предел обнаружения

0,08 мг/мл.

10 Пример 3. Точную навеску, препарата (0,0125 r) растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе на 25 мл. Берут приготовленного раствора 0,25, 05,...2,5 мл в мерные колбы по 25 мл и доводят раствором едкого натра, рН которого 10,0, далее поступают, как в примере 1. Предел обнаружения

0,005 мг/мл.

П р и м,е р 4. Точную навеску препарата (0,0125 r ) растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе на 25 мл. Берут приготовленного раствора 0 25, 0,5,...2,5 мл в мерные колбы на 25 мл и доводят до метки раствором едкого натра, рН которого 9,5, далее поступают как в примере 1. Предел обнаружения 0,005 мг/Мл

Пример 5. Точную навескупрепарата (0,0125 г) растворяют в

30 дистиллированной воде s мерной колбе на 25 мл. Берут приготовленного раствора 0,25,0,5,...2,5 мл в колбы на 25 мл для трех серий, доводят до метки раствором едкого натра, рН

i35 которого 9,5-10,0; выдерживают пер. вую серию 45 мин, вторую — бО мин, третью - 75 мин. Пределы обнаружения для трех серий соответственно

0,001 мг/мл, 0005 мг/мл и 0,003 мг/мл.

40 Пример б. Приготовление калибровочного графика для количествен-. ных определений тетрациклина щелочью., Точную навеску препарата (0,0125 г ) растворяют в дистиллиро-.." ванной воде в.мерной колбе на 25 мл

45 Берут приготовленного раствора

0,25,0,5,...2,5 мл в мерные колбы на 25 мл, доводят до метки раство.ром едкого натра, рН которого 9,510,0, и далее поступают как в приме50 ре 1.

55 аблица 1 бе на 25 мл. Берут приготовленного раствора 0,25, 0,5,...2,5 мл в мерные колбы на 25 мл и доводят до мет- 60 ки раствором едкого натра, рН которого 8,5. Оптическую плотность измеряют через час на ФЭК-56 при светофильтре М б в кювете с толщиной слоя

2 см. Предел обнаружения О, 010 мг/мл i

Содержание, мг/мл

Оптическая плотность A

0,05

0,090

О, 010

0,185 Изобретение относится к аналитической химии, а именно к методам количественного определения тетрациклина, и может найти применение при анализе лекарственных препаратов и биологических объектов.

Известен способ количественного определения тетрациклина, заключающийся в том, что точную навеску пре-. парата растворяют в воде, обрабатывают раствором соляной кислоты и хлорного железа. Полученный окрашенный раствор фотометрируют (;1 J, Недостатком способа является низкая чувствительность (0,05 мг/мл ) и неселективность, так как невозможно проводить определение в окрашенных растворах и в присутствии других антибиотиков.

Известен также фотометрический способ определения тетрациклина путем обработки анализируемой пробы раствором хлорамина с последующим фотоколориметрированием полученного раствора (2 g.

Недостатком данного способа также являются малая чувствительность (0,05 мг/мл !и недостаточная селективность, Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ фотометрического определения тетрациклина, основанный на обработке анализируемой пробы раствором гидроксида натрия при рН 9,5-10 с последующим фотоколориметрированием полученного окрашенного раствора через 5 мин P3 j

Недостатком известного способа является его низкая селективность, так как в этих же условиях другие лекарственные вещества (окситетрациклин, .новокаин, олеандомицин, витамины) окрашивают раствор также в желто-зеленый цвет.

Целью изобретения является повышение селективности способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу, заключающемуся в обработке анализируемой пробы раствором гидроксида натрия при рН 9,5-10 с последующим фотометрированием его, полученный после обработки анализируемой пробы гидрокси дом натрия раствор предварительно вы держивают до появления красного цвета.

Пример 1. Точную навеску препарата (0,0125 r ) растворяют в дистиллированной воде в мерной кол"

Раствор продукта реакции подчиняется основному закону светопоглощения в пределах концентраций 5 10 —

-5 .10 2 мг/мл.

Калибровочный график для количественных определений тетрациклина щелочью приведен в табл. 1.

1081487

Продолжение табл.

Содержание, мг/мл

Оптическая плотность А

0,275

0,315

0,450

0,540

0 625

0 720

Результат определения тетрацикли, на в смеси с окситетрациклином приведен в табл. 2.

О, 805

0,900

Таблица 2

Метрологические характеристики ° и 10, а = 0,96, С 2,2

Найдено препарата

» » ††-Й» »» а (Мг/мл) в навеске, мг

Опыт

М 100,5

S = 2,56

Ч = 1,6

0,0195

0,0203

0,0203 .

0,0200

0,363

0,370

0,370

0,365

98,5

101 5

101 5

100,0 .

3.

0,0204

0 201

0,0197

100,5 + 1,1

7.

0,0201

Оу0204

0 0195

10.

98,5

lI p и м е р 8. КоличественнОе оП- 200 мп, далее поступают, как в приределение тетрациклина в смеси с но- . мере 6 и расчеты ведут по формуле(1} вокаином. 55

Точную навеску тетрациклина Результат определения тетрацик(0,1000 г )и новокаина (10 г) раст- лина в смеси с новокаином приведен воряют в воде в мерной колбе на .в табл. 3, 0,015

0,020

0,025

0,030

0,035

0,040

0,045

0,050

0 373

О, 368

0,365

0,368

0,374

0,362

1 Пример 7. Количественное определение тетрациклина в смеси с окситетрациклином.

Точные навески 0,1000 r тетрациклина и 0,5000 г окситетрациклина растворяют.в воде в мерной колбе на

200 мл. В мерную колбу на 25 мл переносят 1 мл раствора и далее поступают, как описано в примере 6. Расчет

10 содержания,тетрациклина в навеске s мг проводят по формуле

O 25 200, (1!

45 где В » содержание тетрациклина, мг/мп.

102,0

100,5

100,0

100,5

102,0

1081487 Г а б л и ц а 3

Найдено препарата, Метрологические характеристики: и 10, 4 0 95, f+ 2,2

Опыт а(мг/мл) в навеске, мг

% = 100,4

$ z z0I81 98,5

101,5

101,5

100,0

Ч 0,9

3. Ч „. 0 9 92 2 О, 6 фй

5.

7.

9 °

98,5

Пример 9. Количественное оп-, ределение тетрациклина в смеси с. олеандомицином.

Точную навеску.Тетрациклина (0,1000 r ) и олеандомицина (0,0500 r) растворяют в воде в мерной колбе

Таблица 4 т

« I

Найдено препарата Метрологические ха- рактеристики/

В навеске, n = 10, aL O,95, мг f 2,2

Опыт а(мг/мл) Х * 100,45

$ 1,23

V - 1,11

98,5

99,5

101,5

101,5

3. ф Ч 1 11 2У2 20 77 ф

4 °

0,368

0,364

0,370

100 45 + 0,77

7.

0,368

0,366

Oi371

10

0,363

0,370

0,370

0,365

0,373

0,368

0,365

0,368

0,374

0,362

0,363

0,364

0,370

0,371

0,0195

0,0203

0,0203

0,0200

0,0204

0,0201

0,0197

0,0201

0,0204

0,0195

0,0195, 0,0198

0,0202

0,0202

0,0201

0,0198

0,0202

0,0201

0,0200

0,0202

102,0

100,5

100,0

100,5

102,0

1 на 200 мл, далее поступают как в примере 6 и расчеты ведут по Формуле (1).

Результаты определения тетрациклина в смеси с олеандомицином при, ве& ены в табл.. 4.

100,5

99,5

101,5

100,5

1OO,0

101,5

1081487 в и

Составитель В..Шкилъкова

Редактор В. gasxo Техред:К.Кузьма Корректор M. шароо,и

Заказ 1537/36 Тираж 823 Подписное

BHHHIIH Государственного комитета СССР по делам .изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

° °

Филиал 1Н1П "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

В аналогичных условиях при опре- делении тетрациклина известным спо- собом фотометрированне проводят череЗ 5 мин пОсле обработки аналчзируемой пробы. В течение этого времени раствор приобретает светлый желто-зе- 5

Леный цвет. В анализируемой пробе тетрациклина с другими препаратами, например окситетрациклином, олеандомйцином, новокаином, в растворах про исходит наложение цветов и фотомет-" рируется смесь веществ. Следовательно, определить тетрациклин в присутствии других лекарственных препаратов известным способом невозможно.

Таким образом, предлагаеьый способ имеет высокув,чувствительность (0,005 мг/мл) и селективность, так каК позволяет определить тетрациклин в присутствии других лекарственных препаратов.