Способ получения биомассы энтеробактерий используемой для адсорбций антител
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ДЛЯ. АДСОРБЦИИ АНТИТЕЛ, путем посева бактерий на плотную питательную среду, содержащую источники азота, углерода, минеральные сопи и стимулятор роста, с последующим инкубироваШ1ем и сбором полученной биомассы, о тличающийся тем, что, с цепью повышения выхода целевого продукта, посев осуществляют на среду, содержащую в качестве стимулятора роста натрий гипосульфит 4-6 г/л среды, натрий сернокислый кристаллический 8-12 г/п, экстракт кормовых дрожжей 4-6 г/л, глицерин 15-25 мл/л и анионообменную смолу АВ-17 4-1О г/л. СО
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
„„Я0„„1 008243 д(д) С 12 К 1/20
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н ABTOPCHOIVIV СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2 1 ) 3318241/28-13 (22 ) 16,07.81 (46) 30.03.83. Бкщ. ¹ 12 (72) B. К. Голшмид, Л. Н. Богословская, Н. М. Ландсман, Т. Н. Токинова и Ю. А. Ратинер (7 1 ) М ос ковский научно-исследова тель ° ский институт вакцин и сывороток им.
И. И. Мечникова (53 ) 576.8,093 (088.8) (56) . 1. Смирнов В. В. и др. Научные основы производства диагностических препаратов, Киев. Наукова Думка
1 960.
2. Терентьев Л. И. и др, — В кн.: Материалы 1 Всесоюзного рабочего со» вешания. Махачкала, 1975, с. 73-76 (прототип). (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ, ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ДЛЯ AllCOPEUHH АНТИТЕЛ, путем посева бактерий на плотную питательную среду, содержащую источники азота, углерода, минеральные соли и стимулятор роста, с последующим инкубированием и сбором полученной биомассы,о тл н ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, посев осушествляют на среду, содержащую в качестве стимулятора роста натрий гипосульфит 4-6 г/л среды, натрий сернокислый кристаллический 8-12 гlл, экстракт кормовых дрожжей 4-6 г/л, глицерин 15-25 мл/л и анионообменную смопу АВ-17 4-10 г/л.
1 1008243 2 ится к микробиоло- личными комбинациями добавок. Среда попьзовано при про- приготовлена на основе триптического чееких антнтельных гидролизата сгустков крови лабораторных. животных и содержит 170 мг% амннного получения биомассы к азота и 3% агара. Расплауленную среду ьэуемой для адсорб- как без добавок, так и с добавками разыращивания бакте- ливают в матрацы и стерилизуют автоельной среде, содер- клавированием (112ОС, 30 мин). Матраеиновую основу, или цы с горячей простерилиэованной средой . ходов производства 19 оставляют в горизонтальном положении а лощади, сгустков при комнатной температуре для застываких свинок и т.n.) (1). получения биомассы В качестве добавок используют глицеьэуемоя» для адсорб рин (15-25 мЛ), или экстракт кормовых осева бактерий на . 3$ дрожжей (4-6 г), или натрий гипосульсреду, содержащую фит (4-6 г), натрий сернокислый (8— ерода, минеральные 12 г), глицерин 15-25 мл}, аминообменна основе гндроли- ную смолу АВ»17 (4-10 г) или натрий изводства с добавле- гипосульфит (4-6 г), натрий сериокислый иэата Хоттингера и 20 (8-12 r), экстракт кормовых дрожжей аиде натрия сернокис. (4-6 r), глицерин (15-25 мл) и анионоинкубированием и обменную смсду AB-17 (4-10 r). Колиомассы $2). чества добавок указаны иэ расчета на способы не обеспе .. один литр среды. Все вешества, кроме ода биомассы, по- 2> анионообменной смолы АВ-17, вносят в ммы реагируют на среду до разлива в матрацы. Смолу вноемых стимуляторов сят отдельно в каждый матрац до стери хода биомассы. лиэации, — повышение выхода Поверхность застывших сред засева30 ют различными сероварами эшерихий (по достигается тем, 20 мл бульонной культуры). Выращивания биомассы энтеро- ние проводят при 37 С в течение 18ой для адсорбции 20 ч. Выросшую культуру смывают растбактерий на плот- вором натрия хлорида (100 мл раствора у, содержащую ис- З> на 1 матрац). Полученные суспензии бакода, минеральные со терий одного серовара сливают из разных а, с последующим матрацев вместе перемешивают и опреором полученной био- деляют объем и густоту суспенэии по твляют на среду, со- оптической плотности на ФЭК-М в сравстимулятора роста ненни со стандартами (см. табл. 1).
Изобретение относ гни и может быть.ис изводстве диагности препаратов.
Известен способ энтеробвктерий, испол ции антител, путем в рий на плотной питат жащей мясную и каз приготовленной иэ от (эритроцитов, фибрин крови кроликов, морс
Известен способ энтеробактерий, испол ции антител, путем п плотную питательную источники азота, yrn
c:îëè, приготовленную эатов иэ отходов про нием мясного гидрол стимулятора роста в лого, с последукзцим сбором rëëó÷eííîé би
Однако известные чивают высокого вых скольку не все шта присутствие использу роста увеличением вь
Бель изобретения целевого продукта.
Поставленная цель что в способе получе бактерий, испопьэуем антител, путем посева ную питательную сред точники азота, углер ли и стимулятор рост инкубированием и сб массы, посев осущес держащую в качестве
40 натрий гипосульфит 4-6 г/л среды, натрий сернокислый кристаллический 812 г/л, экстракт кормовых дрожжей 46 г/л, глицерин 15-25 мл/л и анионообменную смолу AB-17 4-10 г/л.
Пример 1, Испытывают воротную питательную среду без добавок и с разПолученные бактериальные суспензии используют для адсорбции гетерологичес . ких антител иэ сывороток и рассчктывают расход питательных сред для получения бактериальной массы, достаточной для адсорбции одного литра сыворотки.
1008243
0Q с9 л4 с )
+ + о о сч л сО
Я сч
Р» о с с9 о о
Р3
cu O о
1-1 о
tQ . с 3 о
t сО сО л1 о а iC д C
e л
3 у 2
Я с .о ф
Ж f» в g
g.
Д О
Q,а а ь о
Ф (Б.аа уя
6 р
Бщ е Ц
g p
Ю Ц и
А р
О р
Е о со- и» л с Г л1 о со»
Ч л Я сО сО сО сО сО
m o, Г О) л л сО О О сч" - л л о о со
cD сч ч л
О-О» сО с» л л ас»Л е, о
o., т4 ев lQ с ф» о ®5а3
Ф»
gJ о .. -мсЧ с о о о" фаа..
"И ©й0 3
5 1008243 4
Как видно из табл 1, плотность попу- си на среде с добавкой экстракта кормочениых взвесей эшерихий всех испытан- вых дрожжей 5,9 млрд/мл. иых рм новидностей наибольшая при на- Пример 2. Испытывают плотную личии в среде всех пяти добавок. питательную среду на основе мясных гидS ролизатов Хоттингера и ту же среду с доТак, например, прирост плотности ВаВе бавками. Состав добавок и методика носи штамма 0144 на среде с четырьмя до- лучения адсорбента аналогичны примеру 1. бавками, но без ЭДК (по сравнению со сре- В табл.2 приведены данные интенсивносдой без добавки), составляет 8,6 млрд/мл, ти эшерихий на мясной среде Хоттингера и а прирост пложости бактериальной взве- 14 влияния на этот показатель различных добавок.
Табли ца 2
Интенсивность роста эшерихий (млрд/мл) на мясной среде
Хоттингера с 3%-ным агаром
Мясная среда Хоттингера
17,4
18,6
18,1
19,2
Мясная среда Хоттингера + 0,5%-ная ЭКД+
0,5%-ный гипосульфит+ 1%-ный натрий сернокислый + 2%-ный глицери н+ О, 5%-ная смола
34,3
31,0
35,1
33,0 равного объема сыворотки необходимое количество адсорбента получают с меньшего числа матрацев.
Составитель П, Бонарцев
Редактор Е, Кинив Техред Т.Маточка Корректор О. Билак
Заказ 2272/35 Тираж 521 Подписное
В11ИИГП1 Государственного комитета СССР по лелям изобретений и открытИй
1130, 35, Москва, Ж-35, Раушская наб„д. 4/5
Филиал 1И111 "11яте т, r, Ужгород, ул. Проектная, 1
Из -таблицы видно, что добавление рекомендованной совокупности стимуляторов роста обеспечивает увеличение концентрации бактерий на этой среде в 1,5-2,0 раза.
Приведенные примеры показывают пре имушество предлагаемого способа, обеспечиваемое повышением, выхода бактериальной биомассы, что сопровождается экономией питательных сред, расходуемых для изготовления адсорбента.
Экономический эффект применения изоб-, ретения обуславливается не только умень-. шением расхода питательных сред, но и снижением затрат труда, рабочего времени и посуды, так как для обработки
11омимо этого, высокий выход биомассы на средах с питательной основой, изготовленной из отходов производства диаг. ностических препаратов, может значительно сократить использование в производстве пишевых продуктов (мясо или Высокосортный казеин) для приготовления питательных сред, а в случае использования сред на основе пишевого сырья — экономию этих продуктов. Эффект достигается и частичной утилизацией отходов, загрязняюших окружаюшую среду.
