Способ выявления белков

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (n)951121!

-., ч

//

Р(61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 29.10.80 (2!.) 3229035/28-13 (51} М Кп 3

G 01 N 33/48 с присоединением заявки ¹

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 15.08.82. Бюллетень ¹ 30

153}УДК 616.07 (088.8,) Дата опубликования описания 15.08.82 (72) Авторы изобретения

T.Ï.ÕîëHöÿ, Г.Ф.Касымова, Н.И.Корякина, В.К.Буриченко, A.Х.Алиходжаев и N.Þñóïoâ (} (Институт химии им. В.И.Никитийа::.

1 (71) Заявитель (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКОВ

На)8 н

=«Llw o, (1)

3%3S

30

Изобретение относится к медицине, а именно к способам аналитической биохимии,для обнаружения белков в полиакриламидных гелях и прн анализу белков. . Известен способ выявления белков путем электрофоретического разделения их в полиакриламидном геле с пос= ледующим окрашиванием красителем Г1).

Однако известный способ требует длительного процесса окрашивания бел.— ковых эон в полиакриламидных гелях (IIIIAI ), длительного процесса отмывания избытка красителя " ПААГ, длительного процесса отмывания гелей ведет 15 к вымыванию минорных фракций белков, что снижает качество анализа белков, многократной смены растворителя и в связи с этим большой расход уксусной кислоты и сложного удаления фона красителя, что затрудняет денситометрирование белков.

Цель изобретения — ускорение способа. .Цель достигается тем, что при осуществлении способа выявления белков путем электрофоретического разделения их в полпакриламидном геле с последующим окрлн:мнением красителем, в качестве кра;ит=.лн используют 1-(5-нитро-2-тиаэолилазо)-2-нафтол-3,6-дисульфокислоту.

Способ реализуется следующим образом.

Белки выявляют с помощью электрофоретичесыого разделения их в полиакриламидном геле, после чего проводят окрашивание красителем, при этом в качестве красителя применяют 1-(5-нитро-2-тиазолилаэо)-2-нафто -3,6-дисульфокислоту

Пример . Электрофореэ белков (алибумина, рибонуклеазы, гистона) в полиамидных гелях проводили .по методу Панима и Чолкли в трубках диаметром 5 мм и высотой 100 мм, а также в блоках ПААГ размером (1к150 150).

После электрофореэа гели окрашивали

0,2Ъ-ным раствором 1-(5-нитро-2-тяаэолилаэо)-2-нафтол-3,6-дисульфокислоты. в смеси метанол-вода-уксусная кислота (5:5:1). Параллельно для

9511?1

Формула изобретения

Составитель Ю.Алмазов

Редактор Н. Воловик Техред Ж.Кастелевич Корректор "- Король

Заказ 5933/46 Тираж 387 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП "Патент", r.Óæroðîä, ул.Проектная, 4 сравнения окрашивались гели 0,2Ъ-ными растворами амидо черного 10 Б и кумасси голубого R-250. Применение красителя для обнаружения белков в полиакриламидных гелях позволяет определять белки при концентрации

10 -10-"ОМ. После 6 мин окрашивания уже четко видны окрашенные белковые зоны в блоке ПААГ, окрашиваемом красителем, без отмывания избытка красителя с геля.

Предложенный способ позволяет сократить время выявления белков до

6 мин, в то время как при использовании известного способа требуется

30-60 мин и 15 ч для отмывания фона красителя, предложенный способ исключает, процесс отмывания, снижает расход растворителя и повьпиает производительность.

Способ выявления белков путем электрофоретического разделения их в полиакриламидном геле с последующимокрашиванием красителем, о т л и ч а10 ю шийся тем, что, с целью ускорения способа, в качестве красителя используют 1(-5-нитро-2-тиазолилазо)-2-нафтол-3,6-дисульфокислоту.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Маурер Г. Диск-электрофорез.

М., "Мир", 1971, с. 90.