Способ диагностики опиомании

ОП ИСАНИЕ

ИЗО6РЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик и 944545 (6I ) Дополнительное к авт. саид-ву„ (22) Заявлено 17.11.80 (21) 3005676/28-13 с присоединением заявки М(23) Приоритет (51)М. Кд.

А 61 В 10/00 евеударстеенный квинтет

CCCP

an делен нзебретеннй н втхрытнй

Опубликовано 23.07.82..Бюллетень М 27 (53) УДК613.83 (088.8) Дата опубликования описания 23.07.82

Т.В.Чернобровкина, И.Н.Пятницкая, Н.И и Н.Г.Найденова еЖйг,— В-.И; Иванов

Ь !. КЩ с, (72) Авторы изобретения техн:и"

МБЯФйицинский

2-ой Московский ордена Ленина государс институт им. Н.И. Пирого (71) Заявитель (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОПИОМАНИИ

Изобретение относится к медицине, а именно к наркологии.

Известен способ диагностики опиомании путем исследования сыворотки крови (1).

Однако известный способ не обеспечивает выявление хронической формы заболевания, так как исследование сыворотки крови не всегда позволяет выявить отклонения биохимических и других показателей от нормы.

Цель изобретения - выявление хронической формы заболеваний.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу диагностики опиомании путем исследования сыворотки крови в сыворотке крови определяют общую активность гамма-глу". тамилтрансферазы и ее изоферментный спектр и при отсутствии одной нор- . мальной изоферментной фракции и на" личин хотя бы одной из аномальных фракций на фоне нормальной общей активности фермента диагносцируют хроническую интоксикацию опиат ами.

Способ осуществляют следующим образом.

При осуществлении способа опре5 деляют в сыворотке крови общую активностьь гамма- глутамилтрансферазы (ГГТ7 любым иэ известных методов, а также изоферменты ГГТ методом электрофареза в полиакриламидном геле (ПААГ).

Материалом биохимического исследования служит негемолиэированная сы- воротка крови (5-10 мл), взятая из

ts локтевой вены натощак. После образования сгустка(путем инкубации при

37 С в течение 15 мин) сыворотку отделяют повторным центрифугированием при 3000 o6/мин в течение 10 мин. Определение общей активности ГГТ проводится спектрофотометрическим методом, активность рассчитывают по скорости образования паранитроанали45

55

3 94 на (длина волны 410 нм) и выражают в

HE HB л сыворот ки.

Определение изоферментов ГГТ в сыворотке крови проводят с помощью электрофореза в 7i-ном ПЯАГ, приготовленном на 0,09 М трисборатном буфере, рН=8,6. Этот буфер применяют в качестве электродного, Для

we кт рофоре за используют верти кал ьную пластмассовую камеру (2х10х80 мм) с плоскими прямоугольными ячейками, удобными для денси геометрии. На столбик геля наносят 0,1 мл сыворотки, плотность ко1орой увеличивают предварительным добавлением к образцу

10 мг сахарозы. Электрофорез проводят при температуре тающего льда, при силе тока 2 mA на каждый гелевый столбик в первые 25 мин и 5 mAв последующие 1,5 ч. Электрофорез прекращают через 30 мин после выхода маркерного красителя бромфенолового синего, наносимого одновременно с сыворотками на контрольную гелевую дорожку для Фиксирования подвижности ионного фронта, в нижнюю камеру с буфером. По окончании электрофореза гели скеннируют при 410 нм .и полученные скеннограммы (без выявления областей ГГТ) служат контролем на присутствие билирубина и других примесей, поглощающих в этой области спектра. Для выявления изоферментов

ГГТ в гелях проводят ферментную реакцию. Инкубационная смесь при этом содержит субстрат гамма- глутамилпа ранитроанилид (4,4 мМ) и акцептор глицил- глициловый буфер (0,55 N, рН 8,3). Через 60 мин инкубации гелевых .полосок в указанной смеси при

37 С развивается желтое окрашивао ние отдельных участков геля, свидетельствующее о локализации в них продукта реакции - паранитроанилина.

После этого гелевые полоски повторНо скеннируют при 410 HM и для выявления белковых Фракций сыворотки полоски окраиивают 0,2i-ным раствором амидового черного в течение 20 мин.

Отмытые в 7 ;-ной уксусной кислоте гели скеннируют при 650 нм. Локализацию каждой изоферментной зоны

Г(Т для данного образца сыворотки on ределяют и обозначают соотг ветственно расположению белковых фракций того же образца сыворотки. Максималь ,ное количество фракций ГГТ вЂ” пясть.

1 Относительные величины активности каждой из них рассчитывают по соот4545 ф ветствующим площадям под кривыми на скеннограммах, Полученные результаты сравнительного обследования 71 пациента сведены в таблицу. Образцы изоферментного профиля ГГТ в сыворотке 9 больных опиоманией сопоставлялись с образцами 30 нормальных, практически здоровых лиц аналогичной возрастной

)0 группы и 32 больных хроническим алко. голизмом. Диагностика опиомании основывается на выявлении определенного сочетания признаков, а именно наличие нормальной общей активности

ГГТ (?0,2+1,6 Ед/л, обязательного отсутствия (Р<О,OU1) нормальной изо,. ферментной Фракции 3. и обязательно-. го присутствия хотя бы одной из.изоферментных Фракций J<, 4, . не присутствующих в нор, Пример 1. Больной А-в, 32 года, задержан в аптеке при попытке приобрести ампулы с морфием по поддельным .рецептам. На следствии отрицал употреблением опиатов, утверждая, что выполнял просьбу малознакомого человека получить ему какое-то лекарство. Осмотр психиатра не привел к определенному суждению. Больной был направлен на стационарную экспертизу. Исследования крови испытуемого обнаружило: общая активность ГГТ - 34,8 Ед/л, отсутствие 3у. и присутствием изоферментных фракций

, Л и jE.<, что позволяет диагностировать опиоманию. Узнав о результатах исследования крови, указывающих на злоупотребление опиатами, больной дал исчерпывающие сведения о своей наркотизации.

Пример 2. Больной Н-й, 27 лет, направлен на экспертизу в связи с аварией, совервенной в состоянии опьянения неясного происхождения.

При обследовании обнаружены следы недавних инъекций, облитерация вен.

Наблюдение a,ñòàöèoíàðå не выявило бесспорных признаков хронической интоксикации наркотиками (абстинентный синдром, влечение и др.).Обсле" дуемый категорически отрицал употребление наркотических средств, а поражение вен объяснял как следствие продолжительного самолечения витамина. Исследование крови (общая активность ГГТ - 20,2 Ед/л, отсутствие изоферментных фракций ).а и Л, и присутствие фракций P, Лq и 3- )и в этом случае подт вердило предположе5 9445 ние психиатров с хронической наркотиэации препаратами опия.

Пример 3. Больной Б-н, 37 влет, на экспертизу поступил гю собственной инциативе, требуя пересмотреть ранее выставленный диагноз

"морфинизм". В первую неделю наблюдения наркологами признаков зависимости выявить не удавалось, хотя картина крови (общая активность ГГТ - 10 23,0 Ед/л, отсутствие иэоферментных фракций, и jig и присутствие

Фракций 1. и Л ) указывала на наличие хронической интоксикации опийны" ,ми препаратами. В дальнейием выяснилось, что, поступая в стационар, больной заранее обеспечил себя омнопоном, который хранился у его друзейнаркоманов, находящихся в отделении.

Более строгая изоляция больного привела к развитию остного расстройства здоровья (астинентный синдром), что обьяснило наличие в крови больного характерных для опиомании изменений. 25

Пример 4. Больной С-в, 18 лет, направлен на экспертизу Военкоматом. так как при очередном вы ве заявил, что он наркоман, эад о том, что на протяжении регулярно "колется", демон ровал следы инъекций и т.

Исследование крови (общая акт . ГГТ - 16,0 Ед/л, отсутствие и мен™ х Фракций ) + и 5 сутствие Фракций 1„„и Л ) и исключить употреблейие препар опия. эор расска- Таким образом, предлагаемый спо2 лет 30 соб существенно повынает достоверстри- ность диагноза опиомании, выполне" и. — нии в амбулаторных условиях не треивность буст госпитализации больного, моэофер- жет быть использован в качестве наи при" дежного теста на скрываемое элоупот35 оэволяет ребление опиатами и гюзволяет выя-. атов вить опиоманию в начале формирования заболевания.

Больные хроническим алкоголизмом и 32

Больные опиоманией п=9

Доноры

î-30

Фермент

50, 1+6,4

19,1

26, 34:3,2

10,8

c 0,001 с0,!

ГГТ

Иэоферментная Фракция Р +

)1 (0,О5

<О 5 с0,001

Изоферментные фракции

Л-1, i 4,Ë5 с 0,001

<0,001

P с0,005

Общая, Ифп 20, 2+1, 6 акти вност ь 9,6

45 б

fl р и и е р 5. Больной И-в, 15 лет, доставлен в больницу в состоянии наркотического опьянения. Лабораторное обследование в стационаре не обнаружило хронической интоксикации опиатами (общая активность

ГГТ - 18,5 Ед/л), присутствие изоФерментной фракции и отсутствие всех других фракций) . Клинические данные и опрос близких подтвердил разовый прием больным наркотических средств, хотя сам больной давал сведения о имеввем -место длительном употреблении опийных препаратов.

Дальнейшее наблюдение психиатров дало основание для гюстановки диаг" ноэа "аизофрения".

Приведенные примеры иллюстрируют то, как сложны для распознавания клиническими методами случаи опиомании и симуляции наркотизации могут быть диагностированы или, соответственно, опровергнуты с помощью предлагаемо. го способа в амбулаторных условиях без необходимости не только содер- жать больного, но и отрывать его от . работы.

944 45

Формула изобретения

Составитель JI.Ñðëîâlåâ

Техред. И. Рейвес Корректор И.Куска

Редактор Г. Волкова

Заказ 5183/2 тираж 714 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, N-35, Раушская наб., д.4/5.филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная,4

Способ диагностики опиомании путем исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что, с целью выявления хронической формы,заболевания, в сыворотке крови определяют общую активность гаммаглутамилтрансферазы и ее изоферментный спектр и при отсутствии одной

8 нормальнои изоферментнои фракции и наличий хотя бы одной из аномальных фракций на фоне нормальной общей активности фермента диагносцируют хроническую и нтокси кацию опи атами.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Пятницкая И.H. Клиническая наркология. И., "Медицина", 1975, с. 208-210.