Способ определения пригодности материалов для аллопластики

Союз Советсинк

Социалистические

Республик

ОЛ ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКЬМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ iii942694 (61) Доголимтельное к авт. свид-By (22)Заявлено 25.07.80 (2}) 2987217/28-13 с «рмсоедмнеииен заявки М (23) Приоритет (5I)M. Кл.

А 61 В 10/00 1твудврвтевикИ квмитвт евер ао девам изобретеиий и открытий

ОлУбликовано 15.07.82. Бюллетень Рй 26

Дата опубликования ояисаммя 18.07.82 (53) УДК 616. .07(088.8) сердечно-сосудистои хирургии им. А.Н. Бакулева

{541 СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИГОДНОСТИ МАТЕРИАЛОВ

ДЛЯ АЛЛОПЛАСТИКИ

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при отборе материалов, предназначенных для изro. товления протезов кровеносных сосудов, протезов клапанов сердца, внут5 рисосудистых катетеров.

Известен способ определения пригодности материалов для аллопластики путем взаимодействия исследуемого материала с кровью с последующим иссле- 1о дованием тромбоцитов (1) .

Однако известный способ не обеспечивает высокой точности.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Поставленная цель достигается тем, что при определении пригодности материалов для аллопластики путем взаимодействия исследуемого материала с кровью с последующим исследованием 2о тромбоцитов дополнительно исследуют цитратную бестромбоцитарную плазму, определяют в ней БАЭЭ-эстеразную (бензоиларгинина этиловый эфир) ак2 тивность, затем в тромбоцитах определяют 5-нуклеотидазную активность и по величине этих активностей определяют пригодность материалов для аллопластики.

П о и и е р 1. Для определения

БАЭЭ-эстеразной активности калликреина so фторопластовую пробирку при

37 С помещают 0,5 мл плазмы и исо пытуемый материал. Через 3 мин добавляют t мл раствора, содержащего

20 мМ N-бензоил-k-аргинин этилового эфира и 1 мл вероналового буфера (pH 7,8) и инкубируют 1 ч при 37 С.

Эатем добавляют 1,5 мл 103-ного раствора трихлоруксусной кислоты и смесь центрифугируют при 2500 об/мин в течение 10 мин. К 2 мл супернатанта приливают 2 мл щелочного гидроксиламина, I мл раствора соляной кислоты, 2 мл 103-ного раствора хлорного weлеэа в 0,1 н. растворе соляной кислоты и через 15 мин раствор фотометрируют на спектрофотометре при 540 нм.

942694

Продолжение табл.

Резина на основе силиконового каучука

21,8

22,8

0,215

0,640

Стекло

Пример 2. Для определения 5î

5-нуклеотидаэной активности исследуемые материалы (такой же площади, как в примере 1) инкубируют с 1,5 мл цельной крови во фторопластовой пробирке 15 мин, отмывают физиологическим раствором для удаления неадгезированных на поверхности форменных элементов крови. Затем добавляют следующие реактивы: О,! мл {20 мМ) раствора сернокислого марганца + 20

+ 1,5 мл (40 мМ) вероналового буфера рН 7,5 + 0 2 мл {10 MM) раствора аденозин-5-монофосфата, выдерживают

30 мин при 37 С, добавляют 2 мл охО лажденного до 4 С 104-ного раство- 25 ра трихлоруксусной кислоты, инкубируют 15 мин, центрифугидуют 20 мин при 5000 об/мин. Для определения неорганического фосфора к 2 мл супернатанта добавляют 0,6 мл 2,54-но- 30 го раствора молибденовокислого аммония в 3 н. серной кислоте + 0,4 мл

0,53-ного раствора амидола в 54-ном растворе сульфата натрия + 0,5 мл бидистиллированной воды. Через 15 мин раствор фотометрируют на спектрофотометре при 660 нм. Активность выражают в микромолях субстрата, гидролизованного в течение 1 мин 1 л исследуемого раствора для поверхности в l см .

В таблице представлена тромбогенная активность исследуемых материа-. лов.

Формула изобретения

Материал

0,043

6,5

Полиэтилен

5s шийся тем, что, с целью повышеПоливинилхлорид

О, 709

11,7

0,035

1 5 фторопласт

Количество гидролиэованного БАЭЭ определяют по градуировочному графику, построенному по известным концентрациям БАЭЭ в координатах: оптическая плотность - концентрация БАЭЭ.

Активность выражают в микромолях гидролизованного БАЭЗ в течение 1 мин

1 л плазмы для поверхности в 1 см

Как видно из данных таблицы, по способности активировать контактную фазу свертывания крови наименьшей тромбогенностью обладает фторопласт (1,5), наибольшей — стекло (22,8).

Наименьшая тромбогенность по способности взаимодействовать с тромбоцитами у фторопласта (0,035), а наибольшая - у поливинилхлорида(0,709).

Эти результаты совпадают с известной низкой тромбогенностью фторопласта, ввиду чего он используется в сердечно-сосудистой хирургии для изготовления клапанов сердца, и высокой тромбогенностью стекла, ввиду чего этот материал для предотвращения свертывания крови в гематологии в необходимых случаях покрывается кремнийорганической пленкой (силиконируется).

Для оценки пригодности материала для аллопластики учитываются одновременно 2 показателя: способность материалов расщеплять БАЭЭ и 5-нукле. отидаэная активность на их поверхности. Наименьшие показатели (ниже .1,5 для БАЭЭ-эстеразной активности и 0,035 для 5-нуклеотидазной активности) являются показателями низкой тромбогенной активности материалов и пригодности их для аллопластики.

Предлагаемый способ позволяет быстро и точно определить в течение

2-3 ч пригодность материалов для аллопластики, Способ определения пригодности материалов для аллопластики путем взаимодействия исследуемого материала с кровью с последующим исследованием тромбоцитов, о т л и ч а юния точности способа, дополнительно исследуют цитратную бестромбоцитарную плазму, определяют в ней БАЭЭ-эсСоставитель С. Иалютина

Редактор Е. Лазуренко Техред M. Рейвес Корректор И. Коста

Тираж 714 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, Ж-35, Рауаская наб., д. 4/5

Заказ 4933/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

5 94 теразную активность, затем в тромбоцитах определяют 5-нуклеотидазную активность и по величине этих активностей определяют пригодность материалов для аллопластики.

2694 в

Источники инФормации, принятые во внимание при экспертизе

1. Доброва H.Á. и др. Актуальные проблемы гемостазиологии. И.,"Наука", ф 19И