Питательная среда для выращивания анаэробных бактерий

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОП ИСАНИЕ

ИЗЬБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (и)935530 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) За в влево 19;05.80 (2 I ) 2967319/28 — 13 с присоединением заявки РЙ (23) Приоритет (51)M. Кл. C 12 и 1/20

)Ьеудеротееиный комитет

СССР ио делам изобретений н открытий

ОпУбликовано !5.0о 82. Бюллетень J% 22 (53) Ул К 576.8.093..33 (088.8) Дата опубликования описания 1506.82

А. А. Ломорад, И. И. Шамолина. Г. Е. Афиногенов;." и Л. А. Вольф (72) Авторы изобретения

Ленинградский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. P. P. Вредена и Ленинградский ордена Трудового

Красного Знамени институт текстильной и легкой й1томьппленности им, С. М. Кирова (7 I ) Заявители (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕПА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ

АНАЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ

8,7 — 11,7

12,0 — 15,0

0,4 — 0,5

0,3 — 0,4

1,3-2,6

Изобретение относится к медицине, а имен но клинической и санитарной микробиологии, и касается питательных сред для культивирования анаэробных бактерий..

Известна питательная среда для выращивания анаэробных бактерий, содержащая источники азота, натрий хлористый и воду 111.

Однако эта среда не обеспечивает высокой интенсификации роста бактерии.

Целью изобретения является ускорение и интенсификация роста бактерий.

Цель достигается тем, что питательная среда для выращивания анаэробиых бактерий, содержащая источники азота, хлористый натрий и воду, дополнительно содержит глюкозу и тиомочевину, в качестве источников азота она содержит коллаген и пелтон при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:

Коллаген

Пелтон

Хлористый натрий

Глюкоза

Тиомс вина

Питательную среду приготавливают следующим образом.

29,0 — 38,3 г сухой питательной среды разводят в 1000 мл водопроводной воды, рН доводят до 7,8 — 8,0 раствором углекислого

5 натрия (2%), нагревают до кипения и полного растворения коллагена и пептона (при необходимости фильтруют через бумажный фильтр).

Полученный бульон разливают в стерильные пробирки высоким столбиком (по 7-10 мл)

1О и стерилизуют в автоклаве при .0,5 атм30мин.

Проводят сравнительную оценку эффективности предложенной среды с известной КиттТароцци на переваре Хоттингера (pH 7,27,4, 0,1% агар-агара, 0,3% глюкозы). Полу!

5 жидкую средч наливают по 7 — 10 мл в пробирки. помещают кусочки печени массой 0,5 r.

В работе используют клинический штамм

01озтпЫ.1еп per fr ingests" 415.

В пробирки с регенернрованными средами

Китт — Тароцци и предлагаемой (ппогрев на водяной бане 30-40 мин при 80 С) вносят 0,1 мл счточной. взвеси культуры. Через 1820 ч культивирования в термостате при 37с С

935530 ф тиомочевины в питательном бульоне 1,3—

2,6 мг/мл. Подсчет количества клеток культуры C1ostrid ien per fr ingens показывает, что интенсивность роста в предлагаемой среде примерно в 2 — 3 раза больше, чем в цветной.

Причем наилучшие. результаты получены при концентрации тиомочевины 2,6 мг/мл и составляют 605 99 колоний, а в среде Китт—

Тароцци 215 24. При определении накопления биомассы иефелометрическим методом показатель плотности исследуемых растворов примерно одинаков и составляет для Китт-Тароцци

1,69),05, а для предлагаемой среды 1,47т„

0,05+1,5 - — 0,08.

Результаты исследования представлены в, таблице.

Показатели накопления биомассы в средах (D) и количества клеток на агаре Бейсслера (6 ) Питательные среды

Компоненты среды, г/л пелтон коллаген тиомочевина

М+м

Известная

8,7

12,0

Предлагаемая

1,3

15,0

11,7

2,6

11,7

15,0

5,12

11,7

15,0 щ а я с я тем, что, с целью ускорения и интенсификации роста бактерий, она дополнительно- содержит глюкозу и тиомочевину, в качестве источников азота она содержит коллаген и пептон при следующем количестве11ном соотношении компонентов, г/л воды:

Коллаген 8,7 — 11,7

Пептон 12,0 — 15,0

Хлористый натрий 0,4 — 0,5

Глюкоза 0,3 — 0,4

Тиомоч евина 1,3 — 2,6

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Лабинская А. С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М., "Медицина", 1978, с. 376-377, пропись 113.

ВНИИПИ Заказ 4158/31 Тираж 505 Подписное

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 проводят количественное определение числа микроорганизмов методом посева на кровяной агар Цейсслера, с использованием разведения культуры в физиологическом растворе в

10 раз. После посева чашки помещают в анаэростаты, создавая разрежение внутри камеры до 1 ати, и через 18 — 20 ч культивирования при 37 С проводят подсчет выросших колоний.

Определение накопления биомассы проводят не@телометрическим методом на ФЗК-56 М 1О через 18 — 20 ч выращивания культуры, используя зеленый светофильтр с длиной волны

540 нм.

При культивировании Cl ostrid÷ån perfrin—

gens в предлагаемой среде наблюдается бурное газообразование культуры при концентрации

Как видно из данных представленных в таблице, использование питательной среды предлагаемого состава по сравнению с известной средой Китт-Таропци,для культивирования аназробных бактерий обеспечивает повьппение интенсивности роста культуры в среднем в 2—

3 раза, одновременно она более проста по приготовлению и компонентному составу, ее цена в 4 — 5 раз меньше стоимости известной среды.

Формула изобретения

Питательная среда дпя выращивания ана50 эробных бактерий, содержащая источники азота, хлористый натрий и воду, о т л и ч а ю

1,6+0,04

1,45 Ю 08

1,47+0,05

1,50Ю,08

1,10Ю,08

215t24

466+23

474+23

605+99

537+23