Способ обнаружения веществ с ретардантной активностью

 

Союз Советсиин

Социалистические

Республик

О П И С А Н И Е < 880348ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДИТЕЛЬСТЮУ

1 (6l ) Дополнительное к авт. свид-ву (5l)М. Кл. (22)Заявлено 25.05.80 (21) 2926738/30-15 с присоединением заявки М (23) Приоритет

А 01 G 7/00

3Ъеудеротвенный комитет

СССР яв Фенам изобретений

II открытий

Опубликовано 15. 11.81- Бюллетень М 42

Дата опубликования описания 18. 11.81 (53) УДК 58, .04(088.8) (72) . Автор изобретения

В.З. Подольный (71) Заявитель

Ордена Трудового Красного Знамени институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева (54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ВЕЩЕСТВ

С PKTAPQAHTHOA АКТИВНОСТЬЮ

Изобретение относится к регуляции роста растений и может быть использовано при поиске веществ с ретардантной активностью для использования их в сельскохозяйственной практике.

Известен способ обнаружения веществ с ретардантной активностью по различным показателям, свидетельствующим о торможении роста (1 ).

Известен также способ обнаружения веществ с ретардантной активностью, 10 включающий выращивание тест-культуры на субстрате с испытуемыми веществами. Так, используя проростки пшеницы, ретарлантную активность можно выявить на 5-й — 15-й день после на15 чала тестирования 1 2 ).

Однако известные способы имеют относительно длительный срок тестирования и недостаточную объективность обнаружения.

Рост является лишь конечным проявлением длительной цепи биохимических и физиологических процессов. Кроме того, действие ретардантов проявляется не только в их влиянии на рост, но и в изменении ряда свойств, не связанных с ростом. Например, усиливается окраска цветов, повышается содержание хлорофилла, усиливается интенсивность фотосинтеза, повышается белковость семян. Поэтому биохимические показатели могут быть более быстрыми, более объективными и специфичными, чем ростовые.

Целью изобретения является сокращение срока тестирования и повышение объективности обнаружения.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве тест-культуры использу" ют проростки гречихи, определяют в

3-5-дневных проростках содержайие фенольных соединений и по увеличению последних обнаруживают вещества с ретардантной активностью.

Тестирование на ретардантную ак» тивность проводится следующим образом.

886348

4 нений и подавлением роста, Так, хотя максимальное подавление роста гипокотиля и максимальное увеличение фе1 нольных соединений происходит под действием й,N-диметилморфолиния, хлорхолинхлорид, значительно увеличивающий уровень фенольных соединений, в меньшей степени подавляет рост, чем бромистый диметил-P-бромэтилсульфоний, который в меньшей степени уве-. личивает содержание фенольных соединений. По-видимому, это может позволить выделить различные группы ретардантов, одни из которых сильнее дейс ствуют на рост, другие — на синтез фенольных соединений, а третьи сильно влияют на оба показателя. Приведенные результаты, кроме того, еще раз показывают, что ростовая реакция и стимуляция синтеза фенольных соединений могут быть разными характеристиками ретардантной активности. Для всех испытанных соединений реакция гипокотилей сильнее, чем семядолей.

25

Семена гречихи сорта Шатиловакая замачивают на ночь в вода. Затем их, раскладывают в кюветы на влажную фильтровальную бумагу для проращивания. Проращивание проводят при комнатной температуре. Одинаково наклюнувшиеся семена с корешком, длиной

5-7 мм,,что достигается на вторые сутки, высаживают по 10 шт. в бумажные стаканчики высотой 2,5 см и объемом 40 см на вЛажный перлит, куда вносят 1 мл исследуемых веществ разной концентрации. В контроль вносят такое же количество воды.

Проростки выращивают в кондиционированных условиях при 20 С и осве0 Р, щении 35 тыс. эрг/см.сек. На 3-й день проводят анализ фенольных соединений. Промеряют также и высоту проростков. Для анализа навеску из 10 проростков, отдельно семядоли и гипокотили, замораживают жидким азотом, тщательно растирают в ступке и элюируют 807-ным этанолом или метанолом общим объемом 3 мл. После фильтрования 1 мл элюата наносят на колонку из окиси алюминия и дальнейшее определение проводят по методу Цукера и Аренса.

В таблице показано влияние ретардантов и гибберелловой кислоты на уровень фенольных соединений и рост в трехдневных проростках гречихи сорта Шатиловская.

Как видно из данных таблицы, ретарданты по-разному стимулируют об-. разование фенольных соединений в семядолях и гипокотилях проростков гречихи. Нет прямой корреляции между увеличением содержания фенольных соедиГибберелловая кислота, вещество, противоположное ретардантам по действию На рост, так же противоположно влияет и на содержание фенольных соединений понижая их уровень. Это свидетельствует о некоторой специфичности проростков гречихи, как теста на ретарданты. По литературным данным у других растений, например у гилениума, и ретарданты и гиббереллин примерно в

2 раза повышают содержание фенольных соединений.

Эффект действия ретардантов, хотя и менее четкий, сохраняется и на 5-A день.

CfI

Э сЧ О ссЪ а ж

CV ь

Ф ь ссЪ ь ь О л .

1 сч

1 1

Э Ы 1

О м

I 1

1 1

l — - с Ъ

Ор сЧ ь ь л л ь ь

1

1 с Ъ I

I 1

1 1

1 -3

I I

I I

1 сЧ I

1 I

1 I

С0 ссЪ а Ю л л ь ь сЧ ь

Ф ь

Э Ц 1

ozx а фl»

1 — -3.— и л ь

СО 1 е сЧ сч ь л

C0 I а а 1 ссЪ л ь

l 1

1 1

1 I с"Ъ I

1 ь

° л 1 О 1 ссЪ сО ь л ь ь О л ь

00 л с ъ 1

1 сЧ

1

1

1 с Ъ

a#I л ь сО

С1

Ю . ь л л

Vl!

ФГ\ л л с

Ц о

3С о

3 х сЧ л ь

g" о ссЪ О л

CVI I

I — -1

1 l

1 I

I I

I I

l сч ь ь сс) л ь ь л о

34 о

g с!3 ж х

Ц

g .

f» о

3С о

И и

Гч

3С

Ц о

C( о

2 о м а х

Ю Е

Яю

1 >ЖСЛ. A

,а I

E"

О « U

Ж Е»

I о

Я о

X к

t(%

1 g

:к ж

2с с

1 I

I с Ъ

1

1 —

I I ! 3

I I

1 I

1 I

3

I

1

I о и щ Рс

e R сО

1 иЪ ь О

1 сСЪ л с Ъ

1 оо 1 л сЪ

I! с Ъ I а

ОО 1

34

1. С 1 о

I . а 43

I Е f .

ХЗО оаа

3 МО3::

° ° °

1 с4 с Ъ

, ъ с )3с )3с

1!с 3!С ф

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

I. Задонцев А,П. и др. Хлорхолинхлорид в растениеводстве. 1973.

1в 2. Патент США В 3376125, кл. 71-65, 1968. г

Составитель Т. Роденкова

Редактор И. Петрова Техред А.Бабинец Корректор Е. Рошко

Заказ 9780/5

Тирал 703 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по. делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Уагород, ул. Проектная, 4

7 880348 8

Формула изобретения проростках содержание фенольных соединений и по увеличению последних

Способ обнаружения веществ с ретар- обнаруживают вещества с ретардантной дантной активностью, включающий выра- активностью. щивание тест-культуры на субстрате с испытуемыми веществами, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью сокращения срока тестирования и повышения объективности обнаружения, в качестse тест-культуры используют проростки гречихи, определяют в 3-5-дневных