Питательная среда для получения покоя-щихся спор гриба b глубинной культуре

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

<ллл 802362 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 03.05.79 (21) 2761265/30-15 с присоединением заявки №вЂ” (51) М.К .

С 12 К 1/06 (53) УДК 663.18 (088.8) Опубликовано 07.02.81. Бюллетень № 5

Дата опубликования описания 15.02.81 до делам изеоретеиий и открытий (72) Авторы изобретения

Э. Г. Воронина и Г. М. Гиндина

Всесоюзный научно-исследовательский институ защищуд- .. -, (71) Заявитель растении (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПОКОЯЩИХСЯ

СПОР ГРИБА ENTOMOPHTORA THAXTERIANA В ГЛУБИННОЙ

КУЛЬТУРЕ

Государстееииый комитет 23 (23) Приоритет—

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству микробиологических препаратов, и может быть использовано при производстве грибного препарата для борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур.

Известна питательная среда, содержащая пивное сусло (1).

Известна также питательная среда, содержащая бактопептон, глюкозу, мальтозу, сахарозу, казамин (2).

Недостаток этих питательных сред состоит в том, что титр покоящихся спор, полученный на этих средах, очень низкий и недостаточен для разработки промышленных методов культивирования гриба Е. taxteriana.

Цель изобретения состоит в получении высокого титра спор.

Поставленную цель достигают тем, что питательная среда содержит кислотный гидролизат мицелия Aspergilus niger при следующем соотношении компонентов, вес. %:

Сухой порошок мицелия

Asp. niger- 15,0 — 20,0

Глюкоза 1,5 — 2,0

Вода Остальное.

Питательная среда в качестве источника азота содержит кислотный гидролизат мицелия гриба Aspergilus niger. При получении лимонной кислоты в заводских условиях ежегодно накапливаются большие количества мицелия гриба Asp. niger, который является неиспользуемым отходом в производстве и может быть ценным сырьем для получения грибного препарата. Мицелий

Asp. niger содержит 4,8 — 5,1% общего азота, в том числе 2,0 — 2,4% азота белкового.

10 Сухой мицелий состоит на 46% из углеводов.

В золе мицелия Asp. niger обнаружены кальций, калий, фосфор, цинк, магний, железо, медь, алюминий, кобальт.

Мицелий содержит много витаминов груп15 пы В и ферментов. Кроме того, в мицелии

Asp. niger, полученном индустриальным методом, содержится остаточное количество лимонной кислоты, которая является хорошим дополнительным источником углеродного питания. В качестве основного источника углерода вносится 2% глюкозы.

Максимальный титр спор, полученный на этой среде -5,8-10 спор/мл.

Технология приготовления среды.

802362

Формула изобретения

Составитель В. Косовец

Редактор О. Иванова Техред А. Бойкас Корректор Г. Решетник

Заказ 10153/32 Тираж 539 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и от крытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Отжатый мицелий сушили при 60 — 80 С в течение 24 час и размалывали на мельнице. Навеску порошка мицелия заливали дистиллированной водой и подвергали кислотному гидролизу. Гидролиз осуществлялся за счет остаточной лимонной кислоты, т. е. без дополнительного введения минеральной кислоты. Гидролиз проводили в автоклаве при 1 ат в течение 30 мин. Гидролизат отфильтровывали и нейтрализовали едким натром. В среду вносили глюкозу в количестве

15 — 20 г/л. Среду стерилизовали при 0,8 ат, 1о

20 мин и выращивали на ней глубинным способом гриб E. thaxteriana.

Количество среды оценивали по титру покоящихся спор, получаемому на этой среде на 3,5 и 7 сутки культивирования.

Пример 1. Гриб Е. thaxteriana выращивали при 28 С и рН 6,8 в глубинных условиях. Для приготовления гидролизата использовали порошок первой партии мицелия, количество порошка мицелия гриба Asp.

niger — 150 г/л. В гидролизат ввели глюко- 2о зу в количестве 20 г/л. Выращивание проводили в течение 7 суток. Титр спор на 3 сутки составил — 3,2 ° 105 спор/мл, титр спор на 5 сутки — 5,8 10 спор/мл, титр спор на

7 сутки — 5,0 105 спор/мл.

Пример 2. Гриб Е. thaxteriana выращи25 вали в глубинной культуре. Для приготовления гидролизата использовался порошок первой партии мицелия, количество порошка — 200 г/л. Количество глюкозы 20 г/л.

Выращивание проводили в течение 7 суток.

Титр спор на 3 сутки — 3,0 10 спор/мл, титр спор на 5 сутки — 4,6 10 спор/мл, титр спор на 7 сутки — 4,6 ° 105 спор/мл.

Пример 3. Для приготовления гидролизата использовался порошок второй. партии мицелия, количество порошка — 200 г/л.

Количество глюкозы — 15 г/л. Выращивание проводили в течение 5 суток. Титр спор на 3 сутки — 3,2 10 спор/мл, титр спор на

5 сутки — 5,5 ° 10в спор/мл.

Как следует из примеров, на предложенной питательной среде возможно массовое получение покоящихся спор гриба Е. thaxtenana. Максимальный титр спор, полученный на предлагаемой среде — 5,8 ° 10 спор/мл, т. е. в 200 раз выше, чем на среде-прототипа.

Питательная среда для получения покоящихся спор гриба Entomophtora thaxtenana в глубинной культуре, содержащая глюкозу, отличающаяся тем, что, с целью получения высокого титра спор, она содержит кислотный гидролизат мицелия Aspergilus niger при следующем соотношении компонентов, вес. /0.

Сухой порошок мицелия гриба Asp. niger 15,0 — 20,0

Глюкоза 1,5 — 2,0

Вода Остальное.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. «Известия Латвийской Академии наук»

1978, № 2, с. 75 — 52.

2. «Ceska Mycologie», 1971, 25, с. 118—

1,24 (прототип).