Способ дифференциальной диагностики хронической неспецифической пневмонии и рецидивирующего бронхита

 

ОПИСАИЙЕ

ИЗОБРЕТЕННАЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 24. 04. 78 (21) 2618784/28-13 (51) М. Кл. с присоединением заявки ¹ (23) ПриоритетA 61 A 10/00

Государственный комитет

СССР ио делам изобретений и открытий

Опубликовано 300880. Бюллетень ¹ 32

Дата опубликования описания 030980 (53) УДК 616-079.

° 4 (088. 8) (72) Авторы изобретения

И. Г. Дауранов и К. А. Аскамбаева

Институт педиатрии Министерства здравоохранения

Казахской CCP (7! ) Заявитель (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГHCCTHKH ХРОНИЧЕСКОЙ

НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПНЕВМОНИИ И РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО

БРОНХИТА

Изобретение относится к медицине, а именно к области педиатрии — детской пульмонологии.

Известен способ дифференциальной диагностики хронической неспецифической пневмонии и рецидивирующего бронхита путем определения в крови показателя Т-системы иммунитета с помощью реакции бласт-трансформации лимфоцитов.

Однако этот способ трудоемок, результаты исследования становятся известными лишь спустя 2-3 суток. При оценке результатов необходима довольно высокая цитологическая подготовка исследователя. В ходе выполнения методики необходимо неукоснительное соблюдение правил стерильности (работа в боксе, облучение помещения бактерицидными лампами, обжигание пробок и кразв пробирок в пламени горелки, наличие стерильной спецодежды и т д.), иначе результаты будут существенно искажены. Значительно затрудняет постановку реакции необходимость применения митогена.

Целью изобретения является усКорение и упрощение способа.

Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа диффе2 ренциальной диагностики хронической неспецифической пневмонии и рецидивирующего бронхита в крови определяют содержание розеткообразующих лим5 фоцитов (РОЛФ) g при величине 151350 РОЛФ в 1 мм диагностируют хроническую неспецифическую пневмонию, а при величине 601-988 РОЛФ в 1 мм рецидивирующий бронхит.

1Р Способ осуществляется следующим образом. Диагностика заболевания достигается с помощью подсчета в крови больных в фазе обострения заболевания содержания розеткообразующих лимфацитов.

Венозную кровь, больного в количестве 1,25 мл вливают в стерильные мерные центрифужные пробирки с 0,42мл

10%-ного раствора желатины, гепарина, 2р физиологического раствора (гепарин: желатина: физиологический раствор =

"-1:10:23).

Кровь осторожно смешивают со средой, отстаивают в течение 45-60 мин

25 и отсасывают надосадочный слой (суспензия лейкоцитов).

Затем суспензию лейкоцитов разбавляют физиологическим раствором, пипетируют, центрифугируют в течение

Зр 2,5 мин при 1000 об/мин и отсасывают

759094 но 985о" Б = 1478. Из них количест оо во РОЛФ вЂ” 14% то есть 1478 х14--20

- оо в 1 мм крови. Другими словами, величина показателя у данного ребенка с подозрением на хроническое или рецидивирующее неспецифическое носпалительное заболевание бронхо-легочного аппарата "укладывается" в диагноз хронической неспецифической пневмонии.

Рентгенологическое и бронхологическое исследования подтвердили диагноз. На рентгечограмме легких в мес" те проекции базальных сегментов с обеих сторон легочный рисунок оказался измененным за счет уплотнения и склероза межуточной перибронхиальной и периваскулярной тканей.

50 надосадочный слой. Процедуру отмывания лейкоцитов осуществляют трижды.

К осадку лейкоцитов добавляют 0,3мл физиологического раствора и клеточный осадок ресуспендируют.

К 0,3 мл полученной суспензии лейкоцитов добавляют 0,3 мл 2%-ной суспензии эритроцитон барана в физиологическом растворе, консернированных с помощью реактива Олсвера.Зритроциты предварительно трижды отмы- )p вают физиологическим раствором с центрифугированием взвеси клеток в течение 15 мин при 1500 об/мин.

Пробирку со смесью суспензий лейкоцитов больного и эритроцитов барана ставят на 5 мин в термостат при

37 С, затем н холодильник на 1 ч.

После инкубации осадок отмытых лейкоцитов и эритроцитов осторожно ресуспендируют и наносят каплю полученной суспензии клеток на предметное стекло (концентрация лейкоцитов больного н 1 мл суспензии — 9,4х10

6 концентрация эритроцитов барана в

1 мл 2Ъ-ной суспенэии- 77,5х10, отношение эритроциты:лейкоциты=8,1). 25

Осторожно накрывают каплю покровным стеклом.

Освещение микросокпа с фаэоконт" растным устройством КФ-4-устанавливают по Келеру, находят при малом уве- ЗО личении нужное место н нативном препарате, производят смену обычного объектива на фаэовоконтрастный с увеличением 40. Контролируют центровку колец фазового объектива при кольцевой диафрагме 0 и 40, совмещают светлое и темное кольцо. . Подсчитывают относительное, затем абсолютное число роэеткообразующих лимфоцитов (РОЛФ).

Пример. У ребенка содержание

РОЛФ в нативном препарате составило

14%, количество лейкоцитов в 1 мм крови — 9850,из которых лимфоцитов15%. Для вычисления абсолютного ко" личества РОЛФ определяют сначала абсолютное количество лимфоцитов н 1мм". крови, которое н данном случае равЗлементы рисунка деформированы, утолщены, с нечетными контурами. На этом фоне видны очаговые тени и ячеистые просветления. Корни легких расширены, тяжесты., Синусы свободны.

Сердце в прямой проекции не унеличено.

Диагноз: хроническая пневмония, пневмосклероз базальных сегментов с обеих сторон. Фаза обострения.

Бронхоскопия: двухсторонний, слева диффузный гнойный, справа, катаральный гипертрофический зндобронхит.

Бронхография :слева цилиндрические бронхоэктаэы нижней доли, деформация бронхов язычкового сегмента, справа — деформация средней доли и нижнедоленых бронхов.

Результаты изучения показателей содержания роэеткоойраэующих лимфоцитон в 1 мм крони детей, больных хронической неспецифической пневмонией и рецидивирующим бронхитом (возраст детей — от 4 до 12 лет), приведены н табл, 1.

В табл. 2 приведены данные о частоте выявления различных величин изучаемого показателя у больных.

В табл. 3 представлены даннйе о частоте выянления различных величин показателя содержания РОЛФ в 1 мм крови, не пренышающих 350, у 12 детей, больных хронической неспецифической пневмонией.

Дифференциально-диагностическая ценность такого исследования выражается более резким снижением уровня

)показателя у больных хронической пневмонией, чем у больных рецидинирующим бронхитом (табл. 1).

При этом для хронической пневмонии наиболее типичны (табл. 2) величины показателя, не превышающие

350 РОЛФ в 1 мм крови (нероятность

99%), а для рецидивирующего бронхитавеличины в пределах 601-988 РОЛФ (вероятность 96Ъ).

В подгруппе больных хронической пневмонией наиболее типичными для данного заболевания величинами показателя, не превышающими 350 РОЛФ в

1 мм Э оптимальным нижним пределом диагностического теста явилась цифра

151 (табл.3).

Способ осущестнляется значительно быстрее (2-3 часа) и является более простым, чем реакция бласт-трансфор.мации. Кратковременность исследования избавляет от. необходимости строгого соблюдения правил асептики, антисептики. Подсчет розеткообраэующих лимфоцитов с помощью фазовоконтрастной микроскопии может быть поручен даже начинающему исследователю. Все этб позволяет внедрять предлагаемый, способ даже в условиях районных больНИЦе

759094

Табл ица1

Величина показателя (Группы детей

Здоровые

18 1342,,0

90,11 382,1

Больные хронической пневмонией ,в фазе обострения заболевания

220,23

279,64

30 459,0

25 615 0

46, 19

55,93 в фазе затихания

Больные рецидивирующим бронхитом в фазе обострения заболевания

26 735,0

9 557,0

68,49

55,96

349,20

170,88 в фазе затихания

2 (ф ф (0,001, Р1 - (0,001, Р (Ор05, Р (0,001 °

Таблица 2

0,99 дб 350,0

0,96

3(11,5Ъ) П р и м е ч а н и е: Достоверность различия показателей относительной доли ойределяли при альтернативном анализе, применяя формулу Фишера 6=2 àrsiп Р, где Р— доля особей (в Ъ). При малом числе наблюдений в группах в вычислительные проценты вносили поправку на непрерывность Иетса.

Таблица 3

Количество детей

Величина показателя

130-150 РОЛФ/мм

151-200

201-250

251-300

301-350

351-600,0

601-988,0.

989,0

2 (7, 7Ъ)

8(30,8Ъ)

13 (50Ъ) 12 (40,0Ъ)

11 (26,7Ъ)

7 (23,3Ъ) 759094

Составитель

Техред Е.Гаврилешко Корректо И. емчик

Тираж 673 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва Ж-35 Ра ская наб. д 4 5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики хронической неспецифической пневмонии и рецидивирующего бронхита путем определения в крови показателя,, Т-Фветенй иммунитета, о т л и ч à io- щ u R o я тем, что ;.C целью ускорения и упрощения способа, в крови определяют содержание розеткообразукщих лимфоцитов (РОЛФ) и при величине 151-350 РОЛФ в 1 ммЗдиагностируют хроническую неспецифическую пневмонию, а при величине 601-988

РОЛФ в 1 мм - рецидивирующий бронхит.