Штамм гриба продуцент аттрактанта овсяной нематоды

Союз Соеетскнк

Социалистических респубини

ОП ИКАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

683701 (72) Авторы изобретения

Н. А. Мехтиева, А. А. Раджабова и С. Г. Гасанова

Сектор микробиологии AH Азербайджанской CCP (7!) Заявитель (54) ШТАММ ГРИБА Arthrabatrgs O5$OSPOm

УРВМ -117 — ПРОЛУЦЕНТ АТТРАКТАНТА

ОВСЯНОЙ НЕМАТОЛЫ

Изобретение относится к области мик-, робиологии, в частности к производству средств борьбы с фитонематодами.

Как известно, некоторые представители почвенных грибов способны использовать нематоды в качестве пищевого суб5 страта $1).

Известен также вид хишного гриба

Prthpobotriqs oEi оуро а Ргевэ способный образовывать ловчий аппарат

to для залавливания фитонематод f 2).

Однако не известна способность атого гриба синтезировать аттрактанты почвенных нематод.

Гриб д 1И оЬоТгцв обфо рога У е ь

-1 1 7 выделен из каштановой почвы

Шемахинского района Азербайджанской

ССР в апреле 196 3 г. и хранится в музее культур Сектора микробиологии

АН Азербайджанской CCP на косяке сус20 ло — arap под номером 117.

Морфологические признаки .

Органическая среда. Колония на сусловом агаре широко-распростертая, полностью покрываюшая поверхность агара в чашке Петри, на 7 день роста — ватообразно-войлочная с сильно развитыми мицелиальными тяжами; грязно-белая; запах сильный; спороношение обильное.

Конидиеносцы прямые, простые, с несколькими узлами, расположенными на заметном расстоянии, и ясно выраженными бородавками. Конидии обратно-яйцевидные, реже грушевидные с перегородкой, расположенной ниже середины, 17-29x1 116,5 мкм.

На мясопептонном агаре (М ПА) колония ограниченная, нежно-пушистая, сероватая, запах отсутствует; спороношение скудное, Конидиеносцы прямые, прос тые, с 1-2 узлами, снабженными до 4-5 бородавками. Конидии яйцевидные, удлиненно-яйцевидные, часто неравнобокие, 19,5-28х9,5-14 мкм.

Синтетическая среда. На агаризованной среде Чапека колония рыхло-ватообразная, более или менее ограниченная в росте, со слабо развитыми мицелиаль6837

fT р и м е р 1. Среду Мейзе, содержащую, г/л: 30 глюкозы, 4 крахмала, 55

1р мл глицерина, 2 пептона, 1 дигидро- фосфата калия КН РО4, 0,5 сульфата магния, 1,6 хлорида калия, 0,01 сульфата железа Fe504 и 10 агар-агара, засевают споровой суспензией, полученной смывом 40 культуры, росшей на косяке сусло-агар, и культивируют в колбах Эрленмейера емкостью 250 мл с 50 мл среды в термоь стате при 25-27 С в течение 14-20 дней.

Двухнедельную культуру, выросшую на агаризованной среде в колбе, заливают

20 мл гексана, тщательно взбалтывают и переносят в следующую колбу и т. д.

Экстракт, содержащий летучие продукты, упаривают до минимального объема под вакуумом. Таким же методом экстрагирурт мицелий водой.

Обратную сторону нижней крышки чашки Петри (диаметр 6 см) с 1,5%-ным

55 голодным агаром делят на 4 равных сектора для облегчения микроскопирования.

В центре одного сектора помешают диск ными тяжами; сероватая, запах слабо выражен спороношение умеренное; конидиеносцы прямые, простые, с 2-4 узлами, снабженными 6 бородавками. Конидии обратно-яйцевидные, с перегородкой, расположенной ниже середины, 2231х11-16,5 мкм.

В присутствии нематод в стерильной воде ловчий аппарат образуется на молодых гифах в виде округлых колец и их сплетений; иногда они возникают прямо

1 от конидий; конидиеносцы с последовательными узлами числом до 12, конидии обратно-яйцевидные и грушевидные 1837,5х12,5-25,5 мкм. 15

Физиолого-биохимические признаки.

Отношение к источнику углерода. Усваивает с образованием органических кислот глюкозу, фруктозу, лактозу и крахмал, Хорошо растет, но не образует органичес- 20 кие кислоты на сахарозе, галактозе, рамнозе и манните.

Не усваивает мальтозу и целлюлозу.

Отношение к источнику азота. Использует нитраты, минеральные и органические соли аммония, аминокислоты, а также вещества, содержащие в основном азот в виде протеидов — пецтон, дрожжевой экстракт, сусло.

Оптимальный рост при 25-27 C.

Оптимальное значение рН среды 6,06,2.

01 4 из фильтровальной бумаги диаметром 1 см, пропитанный упаренным водным или гексановым экстрактом. На противоположный . от этого сектор" наносят каплю суспензии, содержащую порядка 100 особей овсяной нематоды Рагюф"ОРСА гессен @us . (Пример 2. По 0,2 мл гексановых и водных экстрактов летучих продуктов вносят в лунку диаметром 1 см, вырезанную в агаре.

При использовании гексанового экстракта добиваются полного испарения reKсана, а затем лунку покрывают покровным стеклом. Наблюдения проводят в т чение 18 ч с интервалами в 1-2 ч. Чашки выдерживают в темном месте при

25 С и определяют активность препарата как отношение количества привлеченных нематод к общему количеству нематод.

Экстракты испытывают трехкратно.

При работе с водным экстрактом летучих продуктов контролем служит фильтр, смоченный водой.

Высокую (80%) активность по отношению к овсяной нематоде проявляет водный смыв мицелия. Активность гексанового смыва летучих продуктов составляет 70-72%. Визуальные наблюдения показывают массовое скопление нематод под покровным стеклом или бумажным фильтром через 16 18 ч выдержки.

B первые часы наблюдений нематоды проявляют повышенную подвижность. По истечении 16-18 ч отмечается некоторый парализующий или токсический эффект, большинство особей наиодятся в неподвижном состоянии.

Формула изобретения

Штамм гриба МФЬгоЬ "Ц оЯоъРог©

% аешь — 117 — продуцент аттрактанта овсяной нематоды. Хранится в музее культур Сектора микробиологии AH Азербайджанской CCP под номером 117.

Морфологические признаки, Органическая среда. Колония на сусловом агаре широко-распростертая, полностью покрывающая поверхность агара в чашке Петри, на 7 день роста — ватообразно-войлочная с сильно развитыми мицелиальными тяжами, грязно-белая, запах сильный; спороношение обильное.

Конидиеносцы прямые, простые с несколькими узлами и ясно выраженными бородавками. Конидии обратно-яйцевидные, реже грушевидные с перегородкой, располо6Н3 0l

Составитель М. Мирзаев

Редактор Т. Шарганова Техред М. Келемеш Корректор B. Синицкая.

Заказ 5166/1 Тираж 755 Подписное

12НИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 женной ниже середины, 1. 7-29х1 116,5 мкм.

На мясопептонном агаре (МПА) коло— ния ограниченная, нежно-пушистая; сероватая; запах отсутствует; спороношение скудное. Конидиеносцы прямые, простые, с 1-2 узлами, снабженными до 4-5 бородавками. Конидии яйцевидные, удлиненно-яйцевидные, часто неравнобокие, 19,528х9,5-14 мкм. ! о

Синтетическая среда. На агаризованной среде Чапека колония рыхло-ватообразная, более или менее ограниченная в росте, со слабо развитыми мицепиальны15 ми тяжами; сероватая, запах слабо выражен; спороношение умеренное. Конидиеносцы прямые, простые, с 2-4 узлами, снабженными 6 бородавками. Конидии

I обратно-яйцевидные с перегородкой, расго положенной ниже середины, 22-31хl l16,5 мкм.

B присутствии нематод в стерильной воде ловчий аппарат образуется на молодых гифах в виде округлых колец и их сплетений; иногда они возникают прямо от конидий; конидиеносцы с последовательными узлами числом до 12, конидии обратно-яйцевидные и грушевидные, 1837,5х12,5-25,5 мкм.

Физиолого-биохимические признаки.

Отношение к источнику углерода. Усваивает с образованием органических кислот глюкозу, фруктозу, лактозу и крахмал.

Хорошо растет, но не образует органические кислоты на сахарозе, галактозе, рамнозе и манните. Не усваивает мальтозу и целлюлозу.

Отношение к источнику азота. Использует нитраты, минеральные и органичес( кие соли аммония, аминокислоты, а также вещества, содержащие в основном азот в виде протеидов — пелтон, дрожжевой экстракт, сусло.

Оптимальный рост при 25-27 С.

Оптимальное значений рН среды 6,06,2.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Жизнь растений. М., Изд. AH СССР, 1976, т. 2, с. 416-419.

2. Сопрунов Ф. Ф. Хищные грибы— гифомицеты и их применение в борьбе с патогенными грибами. М., 1958 (прототип).