Способ получения антигена

Союз Советских

Соцйалйстнческнх

Республик

< 631157

" -»

Ф Ф

2 (51) М. Кл.

А 61 К 39/02 (я) Дополнительное к авт. свил-ву— (22) Заявлено 08. 06.77 (21) 2493845/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет— (43) Опубликовано 05,11 78Бюллетень №41 (45) Дата опубликования описания 10.11.78

Гоеудврствеииый иамитет

6еаетв Миииетрев CCO ее девви ивебретеиий и етирытий (53) УДК 615.45: д 576.8.097.2 (088.8) (72) Авторы изобретения

Л. С. Едвабная и Е. К. Зарубина

Московский научно-исследовательский институт вакцин и сыворотки им. И. И. Мечникова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕНА

Изобретение относится к медицине, а именно к получению антигенов для производства биопрепаратов, Известен способ получения антигена путем соединения бактериального полисахарида с высокомолекулярным бел- 5 ком (1).

Однако известный способ является сложным и трудоемким и не обеспечивает высокой активности антигена.

Целью изобретения является повыше- 10 ние активности антигена и упрошение способа.

Эта цель дос тигае тся тем, ч то полисахарид или его компоненты соединяют с белком в соотношении 3:1-2 и получзн- 15 ный комплекс прогревают при 35-40 С в те,ение 20-24ч.

Способ осуществляют следующим образом.

Синегнойную палочку, выделенную от 20 больного, выращивают на мясопептонном агаре. Из высушенных ацетоном микробных клеток извлекают клеточные стенки, из которых экстрагируют липополисака2 рид. Липополисахарид подвергают кислотному гидролизу 1Ъ-ной уксусной кислотой до коогуляпии липида. Липид удаляют центрифугированием, а полисахарид осаждают из раствора 0,6%-ным этанолом и лиофилизируют. Полисахарид фракционируют на колонке сефадекса Д -75. Элюцию ведут 0,05 М пиридин-ацетатным буфером. Элюируют две фракции, высоко-. молекулярную и низкомолекулярную. Фракции лиофилизируют.

Полисахарид, высокомолекулярную фракцию и низкомолекулярную фракцию полисахарида используют для получения комплекса.

Вторую часть комплекса - JgQ глобулин человека - выделяют из сыворотки высаливанием сернокислым аммонием при 35% насыщения и нейтральном рН с последуюшей очисткой фракционированием на сефадексе ДЭАЕ-50 в

0,02 М фосфатном буфере рН- 6,6, Составные части комплекса берут в следуюших весовых соотношениях:

631 157

Составитель С. Малюгина

Техред О, Андрейко Корректор Н. Золотовская

Редакгор И. Самедова

Заказ 6234/6 Тираж 661 Подписное.0НИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

° 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5

Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Полисахарид: белок — 3:2 сухого веса;

Высокомолекулярная фракция: белок—

3:2 сухого веса;

Ннзкомолекулярная фракция: белок — 5

3:2 сухого веса.

Составные части тщательно смешивают и растворяют в физиологическом растворе, рН - 8,5 и прогревают в термо-стате 24 ч при 37 С. При использовании о комплекса в серологических реакциях расчет ведут по полисахаридному компоненту.

Предлагаемый способ обеспечивает упрощение методики и сокращение времени

1 получения ангигена и позволяет получать препарат, обладающий высокой специфической иммунологической активностью, Формула изобре гения

Способ получения антигена путем соединения бактериального полисахарида с высокомолекулярным белком, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью повышения активности ангигена и упрощения способа, полисахарид или его компоненты соединяют с белком в соотношении

3:1-2 и полученный комплекс nporpeо вают при 35-40 С в течение 20-24 ч.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1.Experi rnenbol M8di ciV8,54, 1931, р, 431.