Способ получения торфяного нитрагина

 

О л И с А Н И Е (1) 540852

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскик

Социалистическик

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 07.02.75 (21) 2102682/15 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 30.12.76. Бюллетень № 48

Дата опубликования описания 21.02.77 (,51),Ч. Кл.2 С 05F Il/08

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР но делам изобретений и открытий (53) УДК 576.093.1 (088.8) (72) Авторы изоорет: ния

О. И. Колешко, Ю. l{;. Фомичев, О. И. Канюко, Н. А. Дисько и Э. Г. Тутова

Белорусский ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. В. И. Ленина (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ

ТОРФЯНОГО НИТРАГИНА

Изобретение относится к производству бактериальных удобрений.

Известен способ получения торфяного нитрагина путем культивирования клубеньковых бактерий на питательной среде, содержащей бобовый экстракт, минеральные соли и источник углерода, и последующего введения культуральной жидкости в торф с влажностью

30 — 60% (1).

Однако торфяной нитрагин, полученный этим способом, вследствие высокой влажности (30 — 60% ) малопригоден для хранения из-за активного метаболизма клуб еньковых бактерий в условиях влажного торфа, приводящего к накоплению вредных продуктов обмена и гибели бактерий. Препарат быстро загрязняется посторонней микрофлорой, которая вытесняет клубеньковые бактерии и обесценивает качество продукта. Кроме того, требуется сравнительно много тары для упаковки препарата.

Указанные недостатки частично решены в способе высушивания культуры клубеньковых бактерий путем смешивания ее с сухим торфом (2).

Однако при этом способе большинство бактерий отмирает или сразу после смешивания бактериальной культуры с торфом, или при кратковременном хранении, вследствие чего он не нашел практического использования.

Наиболее близким к предлагаемому является способ изготовления торфяного нитрагина путем культивирования клубеньковых бактерий на питательной среде, содержащей бо5 бовый экстракт, минеральные соли и источник углерода, введение культуральной жидкости в торф с последующим высушиванпем смеси до влажности 18 — 23% (3).

10 Однако этот способ не нашел практического использования, так как значительная часть клубеньковых бактерий погибает при высушивании.

Цель изобретения — получить нитрагин с

I5 низкой влажностью и высокой жизнеспособностью бактерий.

Это достигается тем, что в питательную среду для культивирования клубеньковых бактерий дополнительно вносят 0,004—

20 0,02 мг/л хлористого кобальта и 150 — 500 мг/л дрожжевого экстракта. Внесение в торф с влажностью 15 — 25% культуральной жидкости производят по частям, составляющим 20—

40% всего объема культуральной жидкости, 25 причем после каждого введения в торф части культуральной жидкости производят высушивание смеси до 15 — 25% влажности.

Способ осуществляют следующим образом.

В питательную среду, содержащую бобоЗЗ вый экстракт, минеральные соли и источник о4 08 52

Таблица 1

Время роста культуры, час

Концентрация, Варианты опыта

144

120

48 мг/л

124

484

290

528

1120

286

508

848

960

104

348

508

475

64

164

182 отвар (контроль) отвар (контроль)-+- СоСI, отвар (контроль) +- CoCI отвар (коитроль)- ;дрожэкстракт отвар (контроль)+дрожэкстракт+ CoCI> отвар (контроль)+дрожэкстракт+- CoCI, Бобовый

Бобовый

Бобовый

0,02

0,004

200

Бобовый жевой

960

1500

1070

450

175

0,02

Бобовый жевой

2270

1160

2160

760

390

0,004

Бобовый жевой

Содержание жизнеспособных клеток в препарате, „ к общему количеству клеток

Способ внесения культуры клубеньковых бактерий в торф

Влажность препарата, 12,9

9,5

4,6

1,5

58,0

54,0

35,0

12,0

25,0

21,5

15,0

10,0

25,0

21,5

15,0

10,0

Однократно

Дробно

30 углерода (например, сахар), дополнительно вносят 0,004 мг/л хлористого кобальта и 150—

500 мг/л дрожжевого экстракта. Дополнительное внесение данных компонентов в указанных количествах активизирует рост и размножение бактерий, повышаетэнергетический обмен, стабилизирует культуру в физиологически активном состоянии. Влияние состава питательной среды на интенсивность развития

Rhizobium 1eguminosarum 245 показано в табл. 1.

Примечание: посевной материал вносят в количестве 1 млн. клеток на 1 мл среды.

Торф готовят заранее: измельчают, просевают через сито для удаления крупных частиц (остатков р астений, камней и т, п.), нейтр ализуют известью до рН 6,4 — 7,2, высушивают до 15 — 20% влажности и стерилизуют паром под давлением 1,5 атм в течение 1 час. Высушивание торфа до более низкой влажности (5 — 10%) нецелесообразно, так как это приводит к изменению структуры и адсорбционных свойств, впоследствии губительно влияющих на жизнеспособность бактерий. Смешивание культуральной жидкости с торфом проводят непосредственно в сушилке в соотношении

1:1 (по весу). Предназначенное количество культуры вносят в торф не все сразу, а по частям, составляющим 20 — 40% от общего объема культуральной жидкости, предназначенного для внесения в торф. После каждого внесения части культуральной жидкости смесь подсушивают до 15 — 25% влажности при 30—

35 С. Конечную сушку смеси проводят также при 30 — 35 С до влажности 15 — 25%. Дробное внесение культуральной жидкости в торф обеспечивает более высокую выживаемость бактерий, чем однократное, Результаты опытов по влиянию способов внесения культуральной жидкости клубеньковых бактерий в торф на качество препарата приведены в табл. 2.

Как видно из табл. 2, дробное внесение культуральной жидкости в торф и подсушивание способствуют сохранению жизнеспособПитательную .среду засевают двухсуточной культурой клубеньковьтх бактерий и в ней выращивают клубеньковые бактерии глубинным методом при аэрации при 28 С в течение 4—

5 5 суток. 3а этот период происходит обильное капсуло- и слизеобразование, что повышает термо- и ксерочувствительность клубеньковых бактерий. Кроме того, использование культуры, находящейся в стационарной фазе разви10 тия, для приготовления нитрагина удлиняет срок годности препарата. ности бактерий в торфяном нитрагине со сравнительно низкой остаточной влажностью.

Т аблица 2

35 Фор мула изобретения

Способ получения торфяного нитрагина, включающий культивирование клубеньковых бактерий на питательной среде, содержащей

40 бобовый экстракт, минеральные соли и источник углерода, введение культуральной жидкости в торф с последующим высушиванием смеси до воздушно-сухого состояния, отличающийся тем, что, с,целью получе45 ния нитрагина с высокой жизнеспособностью

5408 о2

Составитель М. Дранишников

Редактор M. Дмитриева Текред М. Семенов Корректор А. Степанова

Заказ 114/1 Изд. № 146 Тираж 524 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров CCCP по делам изобретений и открытий

113035, о!осква, уК-35, Раушская наб., д. 4!5

Типография, пр. Сапунова, 2 клубеньковых бактерий, в питательную среду вносят хлористый кобальт и дрожжевой экстракт из расчета 0,004 — 0,02 и 150 — 500 мг на

1 л культуральной жидкости соответственно, а внесение культуральной жидкости в торф осуществляют дробно и после каждого внесения смесь высушивают до воздушно-сухого состояния.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Бородулина Ю. С. и др.",спеки микробиологии, № 9, 1974, с. 200 — 220.

5 2. Кронгауз Е. Л. и др.Микробиологический синтез, № 22,, 11996699, с. 33.

3. Доросинский Л. М. Клубеньковые бактерии и нитрагин, «Колос», 1970 (прототвп),