Штамм бактерий n 228, окисляющий фенолы в промышленных сточных водах

О П И С А Н И E (и) 499227

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Сею боеетскил

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 01.07.74 (21) 2039901/28-13 с присоединением заявки Ко (23) Приоритет

Опубликовано 15.01.76. Бюллетень Ме 2

Дата опубликования описания 30.07.76 (51) М. Кл. - С 02С 5/10

С 12К 1/02

Государственный комнтет

Совета Министров СССР по делам изобретений н открытии (53) УДК 576.8(088.8) (72) Автор изобретения E M Юровская (71) Заявитель Киевский научно-исследовательский институт общей гигиены и коммунальной

1 (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ I SEUDOMONAS AERUGINOSA № 2

ОКИСЛЯЮЩИЙ ФЕНОЛЫ В ПРОМЪ|ШЛЕННЪ|Х СТОЧНЫХ

ВОДАХ

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к биологической очистке промышленных сточных вод, содержащих фенолы. Известны штаммы Pseudomonas aeruginosa, окисляющие фенолы. (Japan Journal of Bacteriology. 1972 r. т. 27, Ую б, 809 — 815).

Предлагаемый штамм отличается от известных своими морфологическими, физиологическими и культуральными признаками, а также способностью окислять одно- и двухатомные фенолы в промышленных сточных водах коксохимического производства, газогенераторных станций.

Сточные воды этих производств представляют собой мно го компонентную систему, содержащую разнообразные органические токсические вещества.

Предлагаемый штамм был получен методом адаптации к фенолу с последующим отбором наиболее активных форм.

Источником выделения являлась почва, отобранная в районе сброса фенольных вод.

Выделенный штамм Pseudomonos aeruginosa

М 228 способен кислять одноатомные фенолы (орто-мета-, паракрезол), двухатомные нелетучие фенолы (пирокатехин, резоруин), а также смесь летучих и нелетучих фенолов при суммарной концентрации на уровне 200 мг/л в течение 48 ч. Штамм хранится в коллекции

Киевского НИИ общей и коммунальной гигиены.

Штамм имеет следующую характеристику.

Морфологические признаки, Палочки с ровными краями, длина клеток 2,2—

3,3 мк, ширина 0,6 — 0,8 мк. Окрашиваются по

Граму отрицательно, подвижны, спор не образуют. Размножаются делением.

Физиологические признаки. Аэроб.

Оптимальная температура роста 25 — 35 С, максимальная 42 С. Оптимальный рН 7,4—

7,6.

Культуральные признаки. При росте на мясопептонном огаре штамм образует мелкие круглые выпуклые блестящие с влажной поверхностью колонии, размером 0,5—

1,5 мм зеленовато-бурого цвета. Агар приобретает оливковый цвет и приятный ароматический запах.

20 На мясопептонном бульоне образует равномерную пленку, не смешивающуюся со средой при встряхивании. На разведенном бульоне

Хоттингера образует ярко-зеленый флюоресцирующий пигмент. На косяке картофеля рас25 тет в виде влажного бурого налета.

На фенольном синтетическом агаре растет в виде мелких бесцветных точечных колоний. На жидкой фенольной синтетической среде образует равномерную муть и легкую плен30 ку.

499227

Исходная концентрация фенола, мг/л

Остаточная концентрация фенола, мг/л

Источники промышленных стоков

Время очистки, ч

Обесфеиоливаиие, о, 160, 8

1,8

98,8

157,9

6,04

98,18

160,9

2,69

98,3

179,8

13,2

92,6

Биохимические свойства. Сбраживает глюкозу. Крахмал не гидролизует. Клетчатку не разлагает. 5Келатину разжижает за

48 ч с образованием ярко-зеленого флюоресцирующего пигмента. Молоко пептонизирует полностью, не изменяя реакции среды, с образованием ярко-зеленого флюоресцирующего пигмента. Сероводород и индол на белковых средах не образует. Восстанавливает нитраты.

Образует пиоцианин на среде Кинга через

24 ч. Растет на среде Козера с ацетамидом, дает положительную оксидазную пробу.

Разрушает фенол на 99,3 — 99,6 /о за 24 ч при исходном содержании его 200 — 300 мг/л.

Культивирование в лабораторн ы х условиях. Выделенный штамм Pseudomonas aeruginosa сохраняют в лабораторных условиях на жидкой фенольной среде, готовящейся из промышленного стока. Для приготовления среды промышленную сточную воду разбавляют водопроводной водой до концентрации фенола 200 †4 мг/л, добавляют питательные соли в количестве, г/л: К НРО

0,5; КНяРО4 0,5; MgSO4 0,5; (NH4)gS04 0,5;

FeSO4 20 мг/л. рН доводят до 7,4 — 7,6. Среду стерилизуют. Фенолразрушающую активно=ть штамма поддерживают путем периодических пересевов в среду указанного состава 1 раз в

1 — 2 месяца. После пересева штамм инкубируют 1 — 2 суток при 37 С, а в дальнейшем хранят при комнатной температуре (или при

5 — 6 С) в темноте.

Пример использования данного штамма для обесфеноливания промышленных сточных вод.

Фенолразрушающая активность штамма проверена в лабораторных испытаниях =о

1. Коксохимический завод (Кадиевки)

2. Газогеиераторная станция, работающая иа буром угле

3. Газогенераторизя станция, работающая на каменном угле

4. Газогенераторная станция ° работающая иа торфе

Формула изобретения

Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa я 228, окисляющий фенолы в промышленных сточных водах. Штамм хранится в музее Киевского научно-исследовательского института общей и коммунальной гигиены.

Мор фоло ги я. Палочки с ровными краями, длина клеток 2,2 — 3,3 мк, ширина 0,6—

0,8 мк. Окрашиваются по Граму отрицател1сточными водами различных производств: коксохимических заводов, газогенераторных станций, перерабатывающих каменный и бурый уголь, торф.

5 Основные параметры бактериального обесфеноливания промышленных сточных вод: оптимальная температура очистки 25 — 30 С (допускаются временные отклонения, но не выше 42 и не ниже 22 С);

10 оптимальная граница концентрации водородных ионов для очистки сточных вод коксохимического производства находится на уровне рН

7,4 — 7,8; для стоков от газификации бурого угля рН 6 — 9; от газификации каменного уг-

15 ля рН 7 — 7,6; и от газификации торфа рН

8,2 — 9,0; предельные содержания токсических веществ в промышленных стоках: фенол до

1,5 гул, метиловый спирт до 1 г/л; уксусная

20 кислота до 5 г л, бензол до 0,1 г/л; нафталин до 0,1 г л; аммонийные соли до 2 г/л; в воде не должны содержаться смолы и масла.

Б результате испытаний, приведенных в микроаэраторах при круглосуточной подаче в

25 устройства воздуха, установлена следующая эффективность обесфеноливания, приведенная в таблице.

Таким образом штамм Pseudomonas aerugiпоза ¹ 228 обеспечивает эффективное обес30 феноливание промышленных сточных вод, которые могут быть использованы для дальнейшей его совместной очистки с бытовыми водами, для орошения в сельском хозяйстве, и при соответствующем разбавлении сброшены

35 в водоемы бытового водопользования без нарушения санитарных условий, 55 но, подвижны, спор не образуют. Размножаются делением.

Физиологические призна ки. Лэроб.

Оптимальная температура роста 25 — 35 С, максимальная 42 С. Оптимальный рН среды

60 74 — 7 6.

Культуральные признаки. При росте на мясопептонном агаре штамм об разует мелкие круглые выпуклые блестящие с вла>кной поверхностью колонии размером 0,5—

65 1,5 мм зеленовато-бурого цвета.

499227

Составитель Л. Минеева

Техред 3. Тараненко

Корректор Е. Рожкова

Редактор Л. Новожилова

Заказ 2024/6 Изд. № 1133 Тираж 1077 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

На мясопвптонном бульоне штамм образует равномерную поверхностную пленку; не смешивающуюся со средой при встряхивании.

На разведенном бульоне Хоттингера образует ярко-зеленый флюоресцирующий пигмент. На косяке картофеля растет в виде влажного бурого налета. На твердой синтетической среде с фенолом растет в виде мелких бесцветных точечных колоний, на жидкой синтетической среде с фенолом образует равномерную муть и л егку ю пл ен ку.

Отношение к углеводам. Сбраживает глюЬ козу. Крахмал не гидролизует. Клетчатку не разлагает. Желатину разжижает за 48 ч с образованием ярко-зеленого флюоресцирующего пигмента. Молоко пептонизирует полностью, 5 не изменяя реакции среды.

Сероводород и индол на белковых средах не образует. Восстанавливает нитраты. Образует пиоцианин на среде Кинга через 24 ч.

Растет на среде Козера с ацетамидом. Да10 ет положительную оксидазную пробу. Разрушает фенол на 99,3 — 99,6% за 24 ч при исходном содержании его 200 — 300 мг/л.