Патент ссср 418757

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

G01N1/44 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

ОПИСАН ИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (щ 418757

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 05.Ч11.1972 (№ 1805350/31-16) М. Кл. G 01п 1/28 с присоединением заявки №

Приоритет

Гасудврствеиива квинтет

Совета Мииивтрав СссР ив делви изобретений и открытий

Опубликовано 05.03.74. Бюллетень М 9

Дата опубликования описания 14.08.74

УДК 611-018.84 (088.8) Авторы изобретения

Ю. А. Малашхия и Л. Н. Ратиани

Заявитель Тбилисский государственный институт усовершенствования врачей

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АУТОАЛЛЕРГИИ

ПРИ ИНФЕКЦИОННЫХ ПОРАЖЕНИЯХ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ

Изобретение относится к медицине.

Известен способ определения аутоаллергин при инфекционных поражениях нервной системы, например при менингитах, путем центрифугирования свежевзятой цереброспинальной жидкости, приготовления мазков, их фиксации, окрашивания и изучения клеточного состава мазка.

Целью изобретения является повышение точности диагпосцирования специфической аутоаллергии.

Предлагаемый способ характеризуется тем, что на окрашенный мазок наносят антиген мозга, помещают его во влажную среду с последующим термостатированием при температуре 37 С в течение 20 вЂ” 25 мип, промывкой, добавлением люминесцентной сыворотки, повторным термостатированием при той же температуре в течение 30 мин и определением клеточных противомозговых аутоантител в лимфоцитах.

Пример. Свежую спиномозговую жидкость (не позже 2 час после взятия ликвора

2 вЂ” 3 см ) центрифугируют (1500 об/мин в течение 15 вЂ” 20 мин). Из осадка готовят препараты: один мазок опытный и два контрольных.

Опытный препарат готовят следующим образом. Мазок сушат при комнатной температуре, фиксируют реактивом Май вЂ” Грюнвальда или метиловым спиртом в гечении 3вЂ”

5 мин (препараты следует помещать в фиксирующие жидкости очень осторожно), после этого дважды промывают в дистиллированной воде. К опытному мазку добавляют антиген мозга (прпготовленньш обычным способом 10% -ньш водно-солевой экстракт ткани мозга) и укладывают во влажную камеру, которую затем помещают в термостат при тем10 пературе 37 С на 20 вЂ” 25 мин. Вынутый из термостата мазок дважды промывают дистиллированной водой, к нему добавляют люминесцентную сыворотку в разведении 1: 32, после чего препарат вновь помещают в термо15 стат при температуре 37 С на 30 мин. Приготовленный мазок еще раз промывают в дистиллированпой воде; па него наносят каплю высококачественного иммерсионного масла и изучают под люмипесцентным микроскопом.

20 К одному контрольному препарату вместо мозгового антигена добавляют антиген печени, а к другому контрольному препарату антиген не добавляют.

На опытных препаратах, если имеется ауто25 иммунное поражение нервной системы, в большинстве случаев обнаруживают флуоресценцию цитоплазмы (редко ядра) лимфоцитов, в то время как на некоторых лимфоцитах флуоресценцию не определяют. В контрольных пре30 паратах количество флуоресцирующих лимфо418757

Составитель С. Щенева

Техред Е, Борисова

Редактор Т. Каранова

Корректор Е. Миронова

Заказ 1808/15 Изд. Ке 550 Тираж 651 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4!5

Типография, пр. Сапунова, 2 цитов очень мало по сравнению с опытными препаратами и их флуоресценция слабая. Для дифференциации неспецифического свечения лимфоцитов от специфического производят подсчет флуоресцирующих клеток как в опытных, так и в контрольных препаратах. В каждом мазке считают по 100 клеток, которые делят на две группы. К первой группе относят нормальные нефлуоресцирующие клетки, ко второй группе вЂ” разной степени светящиеся клетки. Для сравнения результатов иммуноморфологического исследования клеток спиномозговой жидкости полученные данные подвергают обработке по показателям свечения лимфоцитов (ПСЛ) по следующей формуле

ПСЛ .=

100 где Н вЂ” число флуоресцирующих лимфоцитов в опытном мазке, Н вЂ” аналогичное число их в контрольном мазке, 100 вЂ” число сосчитанных клеточных элементов (лимфоцитов).

Этой же формулой пользуются при повторных исследованиях у одних и тех же больных для определения динамики. Показатель свечепия лимфоцитов рассматривают как результат специфического действия мозговых антигенов.

Величины ПСЛ от 0 до 0,1 оценивают как

5 отрицательную реакцию (вЂ” ) лимфоцитов на мозговой антиген; от 0,1 до 0,2 вЂ” как слабо положительную (+) (++); от 0,2 до 0,4вЂ” положительную (+++), выше 0,4 вЂ” резко положительную (++++) .

Предмет изобретения

Способ определения аутоаллергии при инфекционных поражениях нервной системы, например при менингитах, путем приготовления

15 мазка цереброспинальной жидкости, его фиксации и окрашивания с последующим микроскопированием, отличающийся тем, что, с целью повышения точности диагносцирования специфической аутоаллергии, на окрашен20 ный мазок наносят антиген мозга, помещают

его во влажную среду с последующим термостатированием при температуре 37 С в течение 20 вЂ” 25 мин, промывкой, добавлением люминесцентной сыворотки, повторным термо25 статированием при той же температуре в течение 30 мин и определением клеточных противомозговых аутоантител в лимфоцитах.