Патент ссср 412255
Ссвз Советских
Социалистицесккх
Республик
П И С А -Ж И - И
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Зависимое от авт. свидетельства ¹â€”
Заявлено 07.11.1972 (¹ 1748877/28-13) с присоединением заявки №вЂ”
Приоритет—
Опубликовано 25.1.1974. Бюллетень № 3
Дата опубликования описания 19.1Х.1974
М. Кл. С 12k 9/02
С 12k 1/00
G 01п 33/00
Государственный комитет
Совета Министров СССР ло делам изобретений и открытий
УДК 637.127.5(088.8) Авторы изобретения
И. И. Архангельский, О. А. Симецкий и И. М. Глезер
Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии
Заявитель
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНДИКАТОРА ДЛЯ
ОБНАРУЖЕНИЯ АНТИБИОТИКОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ
СУБСТРАТАХ
Известен способ получения индикатора для обнаружения антибиотиков в биологических субстратах, например в молоке, предусматривающий приготовление индикаторной среды, вкл очающий тлюкозу, пептон, 2,3,5-трифенил- б тетразолиум хлорид и дистиллированную воду и внесение тест-культуры стафилококка шта м м 57П П в индикаторную среду.
По предлагаемому способу сокращается время определения наличия антибиотиков и >0 упрощается исследование.
Это достигается тем, что перед внесением тест-культуры в индикаторную среду ее предварительно выращивают на питательной среде, например мясо-пептонном бульоне, а смесь индикаторной среды и полученной микробной сусгензии расфасовывают в ампулы и высушивают леофильным методом.
Пример. Готовят индикаторную среду, состоящую из 20 — 40% глюкозы, 0,5 — 1% пептэна, 0,1 — 0,3% глютаминовой кислоты, 0,01—
0,1% 2,3,5-трифенилтетразолиум хлорида в дпстилл ировашюй воде.
Тест-культуру (стафилококк штамм 57ПП) выращивают на мясо-пептонном агаре в течение 16 — 24 чпс, смывают физиологическим раствором поваренной соли, дважды отмывают центрифугированием II приготавливают суспензию в физиологическом растворе в концентрацин 2 — 5 млрд/мл (по микробному стандарту).
Суспензшо смешивают с равным объемом индикаторной среды, заливают в ампулы II лиофильно высушивают. Всю работу с момента смешивания производят на холоде.
Для определения антибиотиков в молоке ампулу вскрывают, за IHBBioT в нее молоко, прогретое предварительно при температуре
85 С в течение 5 егин, ипкубируют в термостате при 40 — 42 С в течение 2,5 — 3 час. Если молоко окрашивается в розовый цвет, это свидетельствует об отсутствии в нем аптибиоТНКоВ. При их наличии молоко в ампуле остается неокрашенным.
Пример. Готовят среду, состоящую из
40% глюкозы, 0,5% пептопа, 0,13% глютамияовой кислоты и 0,05% 2,3,5-трифепилтетразолия хлорида. Ее смешивают с равным объемом 2 млрд-ной суспензии суточной культуры стафилококка штамма 57ПП, предварительно дважды отмь1той физиологическим раствором. Смесь заливают в ампулы по 0,4 л.г и лиофильно высушивают.
Пробы молока, содержащие и не содержащие антибиотики, прогревают прп 85 С в теч.нпе 5 игин, заливают ампулы с высушенным индикаторо I по 2 «.г и ставят в термостат при 40 С.
412255
Составитель Г. Субботина
Техред Т. Миронова Корректор С. Хейфиц
Редактор А. Бер
Заказ 1210/215 Изд. № 393 Тираж 468 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, 5Ê-35, Раушская наб., д. 4/5
Тип. Харьк. фил. пред. «Патенть
Через 2,5 час пробы молока, содержащие
0,01 ед/мл пенициллина, 0,05 ед/мл неомицина, — 3 ед/лл стрептомицина и мономицина, не окрасились, в то время как контрольные пробы, не содержащие антибиотиков, окрасились в розовый цвет.
Предмет изобретения
Способ получения индикатора для обнаружения антибиотиков в биологических субстратах, например в молоке, предусматривающий приготовление индикаторной среды, включающей глюкозу, пептон, 2,3,5-трифепилтетразолиум хлорид и дистиллированную воду, и внесение тест-культуры стафилококка штамм
57ПП в индикаторную среду, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени определения наличия антибиотиков и упрощения исследования, перед внесением тест-культуры в индикаторную среду ее предварительно выращивают на питательной среде, например мясо-пептонном бульоне, до концентрации около 1 — 2 млрд/нл, а смесь индикаторной среды и полученной микробной суспензии расфасовывают в ампулы и высушивают леофильным методом,

