Микроспектрофотометр

Союз Советских

397773

Социалистических

Республик

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Зависимое от авт. свидетельств" ¹â€”

Заявлено 25.Х11.1969 (№ 1388689126-25) М. Кл. 6 011 3,02 с присоединением заявки ¹â€”

Государствеииый комитет

Соаета Миииотроа СССР оо делам изобретеиий и открытий

Приоритет—! Опубликовано 17.IX.1973. Бюллетень ¹ 37

Дата опубликования описания 14.11.1974

УДК 535.8(088.8) Автор изобретения

М. А. Мильхикер

Агрофизический научно-исследовательский институт

Заявитель

МИ КРОСП ЕКТРОФОТОМЕТР

М икроспектрофотометрия как метод количественного анализа широко применяется для исследования различных пленок, растворов„ микрокристаллов, а также в цитологии, гистохимии и других областях науки и техники.

Этот метод анализа основывается:на собственном селективном поглощении света изучаемым веществом .или на поглощении красителя, связанного веществом.

В известных микроспектрофотометрах, слу жащих для исследования окрашенных препаратов, для измерения слабых световых потоков с необходимой точностью осуществляется глубокое охлаждение фотоприемника, модуляция светового потока, электронное усиление сигнала. Для регистрации сигнала применяются сложные оптические, механические и электронные узлы, каждый из которых вносит свои погрешности, прои этом точность измерения достигает только 1 — 2010 .

Предложенный прибор позволяет с большей точностью определить,и построить графическую зависимость .свойств объекта от спектрального состава подающего на него излучения благодаря тому, что в нем фотометрическое устройство установлено в измерительном окуляре, при этом одна часть этого устройства закреплена неподвижно, а другая, подвижная, жестко соединена со столом с листом бумаги. Над столом смонтирована неподвижная линейка с отверстиями и шаблоном длин волн для построения графика.

На чертеже показана схема предложенного микроспектрофотометра.

Микроспектрофотометр состоит пз осветителя 1 с источником света 2, конденсором 8, диском 4 с набором монохроматических интерференционных светофильтров 5 и нейтральных светофильтров 6 для уравнивания между со10 бой световых монохроматпческих потоков по спектру при устранении селектигности фотоприемника; объектива 7, собирающего пучок света в фокус на исследуемом объекте 8, который зафиксирован в держателе 9, укрепленном

15 на предметном столе 10 микроскопа.

В случае работы в проходящем свете осветитель опускается и используется зеркало 11 микроскопа и его конденсор 12. С помощью

20 оптической системы микроскопа — микрообъектива 18, механизмов грубой наводки 14 и микронаводкн 15 — изображение объе та наводится на резкость и проецируется на призму 16, раздгаиваюшую это,пзображенне, наблюдаемое через прицельный окуляр 17. В последнем установлен окуляр-.м икрометр 18, снабженный крестом нитей, который используется для нахождения и оценки в микронах размеров и расположения исследуемого объекта.

397773

Для фотометрирования объекта служат; измерительный окуляр 19, в котором смонтирована мнкродиафрагма 20, ограничивающая поле зрения и вырезающая исследуемую часть препарата; фотометрический светоослабляющий элемент, например неподвижный поляри зационньш светофильтр 21,,и вращаемый поляризационпый светофильтр 22 нли фотометрический клин, жестко соединенный тягой 28 с подвижным столом 24, на котором укрепле:t лист бумаги 25. Тяга !t стол г;еремсщаются синхро.шо с помощьк механизма 26, например микровинта. Над столом 24 tteподвижно укреплена масштабная линейка 27 с масштаоом длин волн и рядом отверстий, каждое нз которых соответствует определенной длине волны при используемом светофильтре.

Фотометрирование осуществляется фотоприемн rкoм 28, наприъгер адаптированным к темноте, глазом оператора, при этом второй глаз «выключается» с помощью «слепого» окуляра 29. Источник света питается через стабилизатор напряжения 80. Лист бумаги 25 освещается осветлтелем 31.

Для фотометрических измерений живой оиологический объект 8, например лист растения, фиксируется с помощью держателя 9, затем лезвием бритвы срезается часть листа, и держатель 9 устанавливают на предметньш стол 10 микроскопа. Объект освещается монохроматическим светом с помощью осветителя через соответствующий монохромати вский светофильтр 5. С помощью механизмов грубой наводки 14 и микронаводки 15 оператор наводит на резкость пзображение псследуемого участка ооъекта 8 в прицельно;! 17 и измерительном 19 окулярах. Вращая механизм 26 передвижения стола 24, жестко связанный с фотометрическим светоослабляющим э-.ементом — светофильтром 22, оператор, постепенно вводя этот элемент, добивается, чтобы видимый в измерительном окуляре 19 свет, отраженный илп прошедший через исследуемый объект 8, был полностью погашен и пепестал

15

2С

40 фиксироваться фотоприе»ttttt orat 28. Добившись эгого, оператор ставит точку карандашом на листе бумаги 25, закрепленном на подвижном столе 24, через отверстие в неподвнж ой масштабной линейке 27, соответствующее длине волны монохроматического света, освещающего в данный момент исследуемый объект 8. Так как оптические свойства исследуемых объектов в разных монохроматических пучках света различны, то, произведя аналогичные измерения с различными монохроматическими светофильтрами, оператор получает на листе бу»a ги 25 состоящую из ряда точек кривую, объективно характеризующую оптические свойства исследуемого ооъекта,в относительных единицах. Эту кривую сравнивают с прямой, полученной аналогично при тех же монохроматнчески.; пучках света от эталона, например окисл магния, которая принимается за 100О1о.

Описанный микроспектрофотометр позволяет исследовать спектральные свойства живых и неживых мпкрооб ьектов.

Предмет изобретения

Микроспектрофотoitåòð, содержащий осветитель с конденсором, диск с набором, интерференционных .и нейтральных светофильтров, микроскоп, измерительный окуляр и фотометрическое устройство, изменяющее величину проходящего через него светового потока, в виде двух составных частей, перемещающих ся одна относительно другой, от,гичающийся тем, что, с целью получения возможности определения и непосредственного построения графических зависимостей свойств объекта от спектрального состава падающего на него излучения, а также упрощения конструкции, в нем фотометрическое устройство установлено в измерительном окуляре, при этом одна часть этого устройства крепится неподвижно, а другая — подвижная — жестко соединена со столом с листом бумаги под неподвижной линейкой с отверстиями и шаблоном длин волн для построения графика.

Редактор Т. Орловская

Составитель А. Дедловский

Техред Т. Курилко

Корректор Е. Михеева

Заказ 744/2449 Изд. ¹ 994 Тираж 755 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Тип. Харьк. фил. пред. «Патент»