Способ импрегнации нервных тканей азотнокислым серебром

) гл..,. r:

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

М. Кл, 6 Oln 1/30

Заявлено 12.IV.1968 (№ 1232855 31-16) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 28.Ч!11.1973. Бюллетень ¹ 35

Государственный комитет

Совета Министров СССР но делам изаеретений и открытий

УДК 611-018 8(088.8) Дата опубликования описания 5.1.1974

Автор изобретения

В. В. Коротченко

Заявитель Институт физиологии имени А. А. Богомольца АН Украинской ССР

СПОСОБ ИМПРЕГНАЦИИ НЕРВНЫХ ТКАНЕЙ

АЗОТНОКИСЛЫМ СЕРЕБРОМ

Изобретение относится к области медицины.

Известен способ импрегнации нервных тканей азотнокислым серебром, заключающийся в помещении срезов в 20%-ный раствор азотнокислого серебра, последующего помещения их в 20%-ный формалин, и затем в аммиачный раствор 20% ного азотнокислого серебра.

Цель изобретения — разработка способа, обеспечивающего более полную и избиратель ную импрегнацию нервных элементов. Поставленная цель достигается обработкой спезов растворами повторяющимися циклами с малыми экспозициями, например от

30 сек до 1,5 мин.

Пример. Кусочки тканей фиксируют в

10%-ном нейтральном формалине не менее

5 — 7 суток. ,После резки па замораживающем микротоме срезы толщиной 15 — 30 л к переносят в дистиллированную воду.

Импрегнируют срезы в 20 ip-ном растворе азотнокислого серебра при обычном осве;цении 30 сек для спинного и головного мозга и

1 — 1,5 мин для вегетативных ганглиев и тканей более плотных, чем спинной и головной мозг.

Окраска восстанавливается раствором

20%-ного формалина, куда срезы помещают не более чем на 10 сек.

Срезы опускают в аммиачный раствор

20%-ного азотнокислого серебра, приготовленного следую|цим образом: к 5 — 10 сл .

20%-ного раствора азотнокислого серебра прибавляют при непрерывном встряхивании по каплям 25",О-ный раствор аммиака до тех пор, пока исчезнет коричневый осадок. Для

10 проведепия реа|кции наливают в часовое стеклышко 4 — 5 см раствора и на каждый 1 с-я прибавляют по 1 капле аммиака. Затем наблюдают под микроскопом. Срезы приобретают слегка желтоватый цвет. В этом растворе срез находится около 1 мин.

Срез переносят на 1 сек в аммиа|чную воду (1 ч. аммиака, 2 ч. дистиллироваllпой Bîäû).

После этого срез помещают в 1 — 3%-ный раствор формалина. Концентрация раствора

20 формалина определяется в зависимости от степени импрегнации: при слабой импрегнации до 3%, при интенсивной — снижа|ется до 1% (длительность пребывания среза з растворе около 1 мин).

25 Затем срез снова переносят в аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра.

Если через 1 — 2 мин не достигнута требуемая окраска всех нервных элементов, срез снова помешают на 1 сек в аммиачную воду, 30 затем в 1 — 3%-ный раствоп формалина на

395746

Предмет изобретения

Составитель С. Щенева

Техред 3. Тараненко

Редактор Д. Пинчук

Корректор Е. Михеева

Заказ 3511/8 Изд. Ко 967 Тираж 755 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 475

Типография, пр. Сапунова, 2 короткое время, не превышаюЩее 1 мин, затем опять в 20%-ный раствор аммиачного серебра. Цикл аммиачный раствор 20%-ного азотнокислого серебра — аммиачная вода

1 — 3 /о-ный раствор формалина — аммиа чный 5 раствор 20%-ного азотнокислого серебра по-> вторяется 2 — 5 раз, регулируя нужную степень импрегнации. При этом учитывают, что аммиачная вода тормозит импрегнацию, а форм алин ее стимулирует.

Достигнув требуемую картину импрегнации то ли в а ммиачном растворе 20%-ного азотнокислого серебра, то ли в 1 — 3%-ном формалине, импрегнацию прекращают помеще. кием срезов в аммиачную воду на 1 мин.

Срезы промывают в дистиллированной ваде 1 — 3 мин.

В большинстве случаев при этом способе окраски отпадает необходимость помещения срезов в 0,1 /о-ный раствор хлорного золота, так как импрегнация соединительно-тканых элементов не происходит.

Срез помещают в 5%-ный раствор гипосулыфита на 5 мин.

После 3 мин промывки в дистиллированной воде срез проводят по спиртам — 70 — 80—

96%-ной концентрации, просветляют и заключают в,канадский бальзам.

Через 10 — 15 мин хорошо импрегнированный срез готов.

Способ импрегнации нервных тканей азогнокислым серебром, путем помещения срезов в раствор азотнокислого серебра, последующего помещения их в раствор формалина и затем в аммиачный раствор азотнокислого серебра, отличающийся тем, что, с целью обеспечения избирательной импрегнации нервных элементов, обра ботку срезов раствора ми производят повторяющимися циклами с экспозициями от 30 сек до 1,5 мин.